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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
杰美基因
- 规格:
50次
供应试剂主要类别:细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中细胞技术相关试剂类别如下:
细胞培养试剂专题
细胞繁殖与毒性检测试剂专题
细胞筛选试剂专题
线粒体试剂专题
亚细胞分离试剂专题
血液研究试剂专题
血液抗凝试剂专题
细胞转染试剂专题
β-半乳糖苷酶活性检测试剂专题
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文献和实验tydyhan:我一直做细菌这块,对病毒操作不是很懂,请教大家:建立表达某基因的重组逆转录病毒载体的B16细胞系含某基因的重组逆转录病毒载体已获得,需转染PA 317包装细胞,通过G418筛选获得表达某基因的重组逆转录病毒。Polybrene进行转染B16细胞,筛选阳性转化克隆,获得稳定表达的B16细胞株。这里怎么具体进行操作??丁香园网友adychen认为:1、首先最好选择的是带EGFP逆转录病毒载体,方便以后的转染率和感染率的观察.2、重组载体;3、得出载体抗性基因的抗生素最佳细胞筛浓度
臂区域如果 GC 含量过高过低,或者有重复序列,都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构,影响重组效率,可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题:有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建,或者更换载体或感受态的方式尝试解决。 2. 质粒提取量不足 质粒提取量少常见的原因可能是: ①摇菌时间过长:大肠杆菌生长已经超过对数期,细菌老化,导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足:细菌生长不充分
蛋白质 腺病毒介导的基因转移可以在人细胞中最高水平地表达目的蛋白质 (1)。因为含目的基因的重组腺病毒DNA是游离于细胞基因组外的 (不整合入宿主基因组),所以目的蛋白质得到瞬时的高水平表达。更重要的是利用腺病毒表达系统可以将外源基因转到分裂及不分裂的细胞中表达。 下表比较了腺病毒和逆转录病毒系统的特点。这两个表达系统是互补的,选择适当的表达系统,就可以把目的基因转入任何种类的人细胞。如果需要瞬时、高水平地表达蛋白质,那么腺病毒表达系统是最佳的选择. 腺病毒表达系统vs.逆转录病毒表达
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