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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
杰美基因
- 规格:
A液:10毫升,B液:91毫升
供应试剂主要类别:细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中蛋白化学技术相关试剂类别如下:
蛋白制备试剂专题
蛋白定量试剂专题
蛋白处理试剂专题
核酸-蛋白结合凝胶电泳定量分析(McKay)试剂专题
核酸-蛋白结合凝胶迁移电泳分析(EMSA)试剂专题
核酸-蛋白结合足迹法(FOOTPRINTING)分析试剂专题
核酸-蛋白结合免疫沉淀分析(CHIP)试剂专题
蛋白-蛋白结合分析试剂专题
融合蛋白处理试剂专题
蛋白/抗体标记试剂专题
蛋白电泳试剂专题
蛋白电泳染色试剂专题
蛋白杂交试剂专题
糖蛋白试剂专题
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文献和实验(1)DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现浅棕色本底时即可冲洗; (2)DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗 体孵育时间; (3)此外,若很短时间就出现背景很深,还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全,需要延长封闭时间; (4)DAB显色时间很长(如超过十几分钟)才出现
。 2. 把握好细胞通透的时间。一般根据切片的厚薄,选择蛋白酶k的孵育时间,常用 10-30 min,几 μm 厚的切片用短时间;几十 μm厚的 切片用长时间,通过摸索达条件使实验过程做到既不脱片,也能够使后面的酶或抗体进入胞内。 3. 适当延长 TUNEL 反应液的时间。一般是37ºC孵育 1 h,也可以根据细胞的凋亡损伤程度,选择更长的时间,可长至 2 h,但要结合实验最终的背景着色来确定。 4. DAB 显色条件的选择。如果是用DAB显色,一般 DAB 反应不超过10 min,可结合显微镜观察控制背景
静置,或 37℃ 1 小时;12)II抗中可加入 0.05% 的 tween-20。13)PBS 洗 3 次各 5 分钟;14)DAB 显色 5~10 分钟,在显微镜下掌握染色程度;15)PBS或自来水冲洗 10 分钟;16)苏木精复染 2 分钟,盐酸酒精分化;17)自来水冲洗 10~15 分钟;18)脱水、透明、封片、镜检。 二、SABC法 1)脱蜡、水化。2)PBS 洗两次各 5 分钟。3)用蒸馏水或PBS配置新鲜的3%H2O2,室温封闭5~10分钟,蒸馏水洗3次。4)抗原修复。5)PBS洗5分钟
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