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pET-28b(+)

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  • Ybscience
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  • YB-0019
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      pET-28b(+)

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      大量

    • 供应商

      钰博生物

    • 规格

      1ug/5ug

    pET-28b(+)

    载体基本信息

    出品公司: Ybscience
    别名: pET28b, pet 28b, pET-28(+)
    质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达
    表达水平:
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 5368 bp
    5' 测序引物: T7
    5' 测序引物序列:   5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
    载体标签: N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His
    载体抗性: 卡那霉素
    表达宿主菌: BL21(DE3) 、BLR(DE3)、BL21(DE3)pLysS
    备注: 载体带有N端凝血酶蛋白酶切位点; pET28a, b, c的差异主要是在多克隆位点;
    稳定性: 瞬时表达
    组成型: 组成型
    病毒/非病毒: 非病毒
     

    pET28b载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pet28b载体图谱
    pet28c多克隆位点

    pET28b载体简介

    pET-28b载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签,同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28b载体的单一的 多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。

    T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。

    pET28b载体序列

    LOCUS       pET-28 b (+)    5368 bp     DNA  Circular   SYN
    DEFINITION  pET-28 b (+)
    ACCESSION   
    KEYWORDS    
    SOURCE      
      ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.
    COMMENT     This file is created by Vector NTI
                http://www.biofeng.com/
    COMMENT     ORIGDB|GenBank
    COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    COMMENT     VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..5368
                         /organism="pET-28 b (+)"
                         /mol_type="other DNA"
         terminator      complement(1..129)
                         /label="T7_terminator"
         misc_feature    69..87
                         /label="T7_Terminal_primer"
         misc_feature    complement(206..238)
                         /label="T7_leader"
         misc_feature    complement(221..239)
                         /label="Xpress_fwd_primer"
         misc_feature    complement(306..322)
                         /label="T7_transl_en_RBS"
         misc_feature    complement(340..367)
                         /label="lacO"
         promoter        complement(367..385)
                         /label="T7_promoter"
         gene            417..680
                         /label="tet (300 - 563)"
                         /gene="tet (300 - 563)"
         misc_feature    complement(469..488)
                         /label="pBRrevBam_primer"
         CDS             522..1022
                         /label="ORF frame 3"
         misc_feature    763..1854
                         /label="lacI"
         CDS             895..1854
                         /label="ORF frame 1"
         gene            1913..2188
                         /label="tet (576 - 851)"
                         /gene="tet (576 - 851)"
         misc_feature    2663..2854
                         /label="ROP"
         misc_feature    complement(2848..2870)
                         /label="pGEX_3_primer"
         rep_origin      complement(3269..3888)
                         /label="pBR322_origin"
         gene            3994..4809
                         /label="KanR2"
                         /gene="KanR2"
         CDS             3994..4809
                         /label="ORF frame 1"
    ORIGIN
        1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
       61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
      121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
      181 cgacggagct cgaattcgga tcccgaccca tttgctgtcc accagtcatg ctagccatat
      241 ggctgccgcg cggcaccagg ccgctgctgt gatgatgatg atgatggctg ctgcccatgg
      301 tatatctcct tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac
      361 aattccccta tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatctcgatc ctctacgccg
      421 gacgcatcgt ggccggcatc accggcgcca caggtgcggt tgctggcgcc tatatcgccg
      481 acatcaccga tggggaagat cgggctcgcc acttcgggct catgagcgct tgtttcggcg
      541 tgggtatggt ggcaggcccc gtggccgggg gactgttggg cgccatctcc ttgcatgcac
      601 cattccttgc ggcggcggtg ctcaacggcc tcaacctact actgggctgc ttcctaatgc
      661 aggagtcgca taagggagag cgtcgagatc ccggacacca tcgaatggcg caaaaccttt
      721 cgcggtatgg catgatagcg cccggaagag agtcaattca gggtggtgaa tgtgaaacca
      781 gtaacgttat acgatgtcgc agagtatgcc ggtgtctctt atcagaccgt ttcccgcgtg
      841 gtgaaccagg ccagccacgt ttctgcgaaa acgcgggaaa aagtggaagc ggcgatggcg
      901 gagctgaatt acattcccaa ccgcgtggca caacaactgg cgggcaaaca gtcgttgctg
      961 attggcgttg ccacctccag tctggccctg cacgcgccgt cgcaaattgt cgcggcgatt
     1021 aaatctcgcg ccgatcaact gggtgccagc gtggtggtgt cgatggtaga acgaagcggc
     1081 gtcgaagcct gtaaagcggc ggtgcacaat cttctcgcgc aacgcgtcag tgggctgatc
     1141 attaactatc cgctggatga ccaggatgcc attgctgtgg aagctgcctg cactaatgtt
     1201 ccggcgttat ttcttgatgt ctctgaccag acacccatca acagtattat tttctcccat
     1261 gaagacggta cgcgactggg cgtggagcat ctggtcgcat tgggtcacca gcaaatcgcg
     1321 ctgttagcgg gcccattaag ttctgtctcg gcgcgtctgc gtctggctgg ctggcataaa
     1381 tatctcactc gcaatcaaat tcagccgata gcggaacggg aaggcgactg gagtgccatg
     1441 tccggttttc aacaaaccat gcaaatgctg aatgagggca tcgttcccac tgcgatgctg
     1501 gttgccaacg atcagatggc gctgggcgca atgcgcgcca ttaccgagtc cgggctgcgc
     1561 gttggtgcgg atatctcggt agtgggatac gacgataccg aagacagctc atgttatatc
     1621 ccgccgttaa ccaccatcaa acaggatttt cgcctgctgg ggcaaaccag cgtggaccgc
     1681 ttgctgcaac tctctcaggg ccaggcggtg aagggcaatc agctgttgcc cgtctcactg
     1741 gtgaaaagaa aaaccaccct ggcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc
     1801 gattcattaa tgcagctggc acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa
     1861 cgcaattaat gtaagttagc tcactcatta ggcaccggga tctcgaccga tgcccttgag
     1921 agccttcaac ccagtcagct ccttccggtg ggcgcggggc atgactatcg tcgccgcact
     1981 tatgactgtc ttctttatca tgcaactcgt aggacaggtg ccggcagcgc tctgggtcat
     2041 tttcggcgag gaccgctttc gctggagcgc gacgatgatc ggcctgtcgc ttgcggtatt
     2101 cggaatcttg cacgccctcg ctcaagcctt cgtcactggt cccgccacca aacgtttcgg
     2161 cgagaagcag gccattatcg ccggcatggc ggccccacgg gtgcgcatga tcgtgctcct
     2221 gtcgttgagg acccggctag gctggcgggg ttgccttact ggttagcaga atgaatcacc
     2281 gatacgcgag cgaacgtgaa gcgactgctg ctgcaaaacg tctgcgacct gagcaacaac
     2341 atgaatggtc ttcggtttcc gtgtttcgta aagtctggaa acgcggaagt cagcgccctg
     2401 caccattatg ttccggatct gcatcgcagg atgctgctgg ctaccctgtg gaacacctac
     2461 atctgtatta acgaagcgct ggcattgacc ctgagtgatt tttctctggt cccgccgcat
     2521 ccataccgcc agttgtttac cctcacaacg ttccagtaac cgggcatgtt catcatcagt
     2581 aacccgtatc gtgagcatcc tctctcgttt catcggtatc attaccccca tgaacagaaa
     2641 tcccccttac acggaggcat cagtgaccaa acaggaaaaa accgccctta acatggcccg
     2701 ctttatcaga agccagacat taacgcttct ggagaaactc aacgagctgg acgcggatga
     2761 acaggcagac atctgtgaat cgcttcacga ccacgctgat gagctttacc gcagctgcct
     2821 cgcgcgtttc ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac
     2881 agcttgtctg taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt cagcgggtgt
     2941 tggcgggtgt cggggcgcag ccatgaccca gtcacgtagc gatagcggag tgtatactgg
     3001 cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatatg cggtgtgaaa
     3061 taccgcacag atgcgtaagg agaaaatacc gcatcaggcg ctcttccgct tcctcgctca
     3121 ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg
     3181 taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc
     3241 agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc
     3301 cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac
     3361 tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc
     3421 tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata
     3481 gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc
     3541 acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca
     3601 acccggtaag acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag
     3661 cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta
     3721 gaaggacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg
     3781 gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc
     3841 agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt
     3901 ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaac aataaaactg
     3961 tctgcttaca taaacagtaa tacaaggggt gttatgagcc atattcaacg ggaaacgtct
     4021 tgctctaggc cgcgattaaa ttccaacatg gatgctgatt tatatgggta taaatgggct
     4081 cgcgataatg tcgggcaatc aggtgcgaca atctatcgat tgtatgggaa gcccgatgcg
     4141 ccagagttgt ttctgaaaca tggcaaaggt agcgttgcca atgatgttac agatgagatg
     4201 gtcagactaa actggctgac ggaatttatg cctcttccga ccatcaagca ttttatccgt
     4261 actcctgatg atgcatggtt actcaccact gcgatccccg ggaaaacagc attccaggta
     4321 ttagaagaat atcctgattc aggtgaaaat attgttgatg cgctggcagt gttcctgcgc
     4381 cggttgcatt cgattcctgt ttgtaattgt ccttttaaca gcgatcgcgt atttcgtctc
     4441 gctcaggcgc aatcacgaat gaataacggt ttggttgatg cgagtgattt tgatgacgag
     4501 cgtaatggct ggcctgttga acaagtctgg aaagaaatgc ataaactttt gccattctca
     4561 ccggattcag tcgtcactca tggtgatttc tcacttgata accttatttt tgacgagggg
     4621 aaattaatag gttgtattga tgttggacga gtcggaatcg cagaccgata ccaggatctt
     4681 gccatcctat ggaactgcct cggtgagttt tctccttcat tacagaaacg gctttttcaa
     4741 aaatatggta ttgataatcc tgatatgaat aaattgcagt ttcatttgat gctcgatgag
     4801 tttttctaag aattaattca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga aaaataaaca
     4861 aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct gaaattgtaa acgttaatat
     4921 tttgttaaaa ttcgcgttaa atttttgtta aatcagctca ttttttaacc aataggccga
     4981 aatcggcaaa atcccttata aatcaaaaga atagaccgag atagggttga gtgttgttcc
     5041 agtttggaac aagagtccac tattaaagaa cgtggactcc aacgtcaaag ggcgaaaaac
     5101 cgtctatcag ggcgatggcc cactacgtga accatcaccc taatcaagtt ttttggggtc
     5161 gaggtgccgt aaagcactaa atcggaaccc taaagggagc ccccgattta gagcttgacg
     5221 gggaaagccg gcgaacgtgg cgagaaagga agggaagaaa gcgaaaggag cgggcgctag
     5281 ggcgctggca agtgtagcgg tcacgctgcg cgtaaccacc acacccgccg cgcttaatgc
     5341 gccgctacag ggcgcgtccc attcgcca
    //

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