YT374型DNA聚合酶(高保真)(高效率)(双平端克隆)优

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名称：YT374型DNA聚合酶(高保真)(高效率)(双平端克隆)优惠
规格：200U|1000U
编号：YT374
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本品是一种超高性能DNA聚合酶，它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。

本品扩增速度极快，扩增小于6kb的DNA片段时，延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。由于其超快的扩增速度，可以显著缩短PCR扩增所需的时间。

本品是一种高保真DNA聚合酶，不仅可以非常高效地催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应，它同时还具有3’至5’的外切酶活性，它的错误发生概率比Taq酶要低52倍，比pfu酶要约低6倍。

本品扩增长度长，可以达到12kb。非常适合长片段DNA的扩增，扩增出来的片段可以轻松达到12kb，更长片段的扩增效果未经测试。本品可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA片段的准确扩增，因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。

以λDNA为模板，PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图如下



用途：高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。扩增出来的DNA片断为双平端，可以直接用于双平端克隆。

来源：通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
活性定义：One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 74℃
.
纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。

酶储存溶液：20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v) glycerol。

失活或抑制：酚*仿抽提可以使本酶失活。

注意事项：PCR反应非常灵敏，在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照。

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·TMB显色液(组化或膜HRP显色用)
编号：YT077
英文名称：TMB Horseradish Peroxidase Color Development Solution for Immunohistochemistryor Blotting
规格：100ml
本试剂盒是一种采用了最新单一溶液TMB显色技术，通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色，用于免疫组化、原位杂交或膜显色等的显色液。本显色液也可以用于原位检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。

通常的TMB显色试剂由多个组份组成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不太方便，并且也容易导致结果不太稳定。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术，把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中，仅由单一溶液组成，简化了操作步骤，并且使检测结果更加稳定可靠。

TMB，即3，3′，5，5′-Tetramethylbenzidine，是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下，TMB会产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。

本试剂盒主要适用于免疫组化或原位杂交时HRP的显色检测，以及Western、Southern、Northern等HRP的膜显色检测。

用于免疫组化检测时，如果每个样品的显色液用量为0.1ml，则可以检测1000个样品；对于膜的显色检测，如果每次使用2.5ml显色液，则可以检测40次。

注意事项：
1. TMB对人体有刺激性，请注意适当防护。
2. 如果发现TMB辣根过氧化物酶显色液出现混浊或颜色变成蓝色，应该停止使用。

储存条件：4℃，避光，有效期一年。


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·ARE凝胶迁移突变探针(1.75μM)
编号：YT206
英文名称：ARE Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－ARE的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

EMSA突变探针－ARE的序列如下：
5"-ACT GAG GGT GAC TCA ATA AAA TC-3"
3"-TGA CTC CCA CTG AGT TAT TTT AG-5"

EMSA突变探针－ARE中ARE的公认的位点发生了突变，从而使相应的转录因子无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和ARE的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和相应转录因子的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1. 阴性对照反应(标记探针)；
2. 常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3. 探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4. 突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5. Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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