cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-) 核酸扩增(

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北京百奥莱博专业生产供应cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-) 核酸扩增(PCR)，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-) 核酸扩增(PCR)
规格：20次|100次
英文名：First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus)
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：YT397
本试剂盒是一种采用了经过改造和优化的M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394），用于以总RNA、mRNA等为模板反转录合成cDNA第一链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂。

使用本试剂盒合成的第一链，可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、 cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。

使用本试剂盒可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1)，反转录的最大长度可以超过10 kb。在采用M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394）的情况下，由于缺失了RNase H酶活性，RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解，这样反转录出来的cDNA的长度就会更长，并且产量更高。


使用本试剂盒对总RNA反转录后，对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。

本试剂盒中的M-MLV反转录酶II(RNase H-)（YT394）热稳定性高，最适反应温度为42-45℃，但当温度达到50℃时仍具有很高活性，且可获得较高产量的cDNA。

试剂盒中提供了RNase Inhibitor，确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。

试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物，前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录，后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA第一链的合成。

本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应时足够进行20个cDNA第一链样品的合成。

产品组份：
M-MLV反转录酶II(RNase H-)——————————20μl
Reaction Buffer (5X)————————————0.1ml
RNase Inhibitor (20U/μl)——————————20μl
dNTP Mix (10 mM each)————————————40μl
Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl)——————20μl
Random Hexamer Primer (0.2μg/μl)——————20μl
DEPC-treated Water——————————————0.3ml

储存条件：-20℃。

更多有关cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-) 核酸扩增(PCR)的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·GSK-3β抗体
编号：YT782
英文名称：anti-GSK-3β antibody
规格：>20次
本抗体是用经过适当修饰的人工合成的人GSK-3β中的一段多肽作为抗原制备而成的抗GSK-3β兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本GSK-3β抗体识别的是总GSK-3β(total GSK-3β)，可以检测内源性的GSK-3β。未发现和其它激酶有交叉反应。

Glycogen synthase kinase-3，即糖原合成酶激酶-3，简称GSK-3，是一种广泛表达的serine/threonine蛋白激酶。GSK-3包括51kD的GSK-3α和46kD的GSK-3β，两者有85%的氨基酸相似性。GSK-3最初被发现可以被胰岛素信号通路调控，可以磷酸化糖原合成酶(glycogen synthase)并使之失活。GSK-3是PI3 kinase/Akt信号通路的关键下游蛋白，Akt可以磷酸化GSK-3α的Ser21和GSK-3β的Ser9，并抑制它们的酶活性。这样在饮食诱导胰岛素分泌的情况下，胰岛素诱导Akt磷酸化，随后GSK-3β被Akt所磷酸化抑制，导致糖原合成酶磷酸化水平下降，糖原合成酶活性升高，糖原合成增加，从而降低血糖。GSK-3β在能量代谢、体型发育(body pattern development)和神经细胞发育过程中起重要作用。GSK-3β可以磷酸化β-catenin并调控Wnt信号通路，还可以调节cyclin D1的蛋白降解和细胞内定位。

产品组份：
GSK-3β抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：
免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人GSK-3β中的一段多肽
克隆性：单克隆
宿主：兔
用途：WB,IP,IHC
交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
同种型：IgG
GSK-3β分子量：～46kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:50),IHC(1:100)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·AMCA标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号：YT857
英文名称：AMCA-labeled Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
规格：0.2ml
本AMCA标记山羊抗小鼠IgG (H+L)用于免疫荧光染色。

AMCA(7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid-NHS ester)是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。AMCA的荧光光谱与DAPI和Hoechst比较接近。AMCA的吸收(激发)和发射峰如下。
Absorption Peak：350nm
Emission Peak：450nm

本抗体为用纯化的小鼠IgG免疫山羊，然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化，并经过人IgG、牛IgG(bovine IgG)、兔IgG、猪IgG(swine IgG)和马IgG吸附纯化的优质二抗。对人IgG、牛IgG(bovine IgG)、兔IgG、猪IgG(swine IgG)和马IgG几乎没有结合能力。特别适合于对于二抗种属特异性要求比较高的荧光染色实验。

本AMCA标记山羊抗小鼠IgG (H+L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:250。实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节荧光标记二抗的稀释比例，推荐的调节范围为1:50-500。

本抗体如果用于常规的免疫染色，以每次检测需1毫升1:250稀释的荧光标记二抗计，至少可以检测50次。如果适当重复使用已经使用过的荧光标记二抗，至少可以多检测150-250次。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·核酸酶/RNA/DNA清除剂(喷雾清除剂)
编号：YT402
英文名称：RNase, DNase, RNA and DNA Away
规格：250ml
本品是一种高效清除实验仪器、设备、材料固相表面的RNase和DNase等核酸酶污染的无毒喷洒型试剂，主要用于创造洁净的DNase和RNase Free操作环境；同时，本产品还能清除环境中DNA和RNA的污染。

本产品能有效清除RNase、DNase、RNA和DNA，具体的使用效果优于进口品牌同类产品对RNase、DNase、DNA和RNA的作用效果。

本产品使用比较安全，无毒性，但略有腐蚀性，在某些用途方面是一种非常安全的DEPC替代品。

本产品使用便捷。使用时直接将本产品均匀喷洒于固体表面，约5分钟后用洁净纸巾擦拭干净即可进行后续的实验操作。本产品适用于实验仪器设备如PCR仪、离心机、移液器、实验台、试管架、离心管架、电泳槽等，及实验耗材如离心管、枪头、手套等表面核酸酶污染的清除，对于塑料制品、乳胶制品、玻璃制品、不锈钢制品均有效。

注意事项：
1）本产品每次使用后应当拧紧喷头，保证本产品的密闭保存，避免长时间接触空气，以免影响使用效果。
2）使用本产品清除实验器材等表面的核酸酶污染后，仍需注意戴手套、口罩等进行操作，以免工作环境和样品被污染。
3）本产品用于仪器设备时，仅限于仪器设备表面可以擦拭清洗的地方，严禁本产品流入仪器设备内部，以免影响或破坏仪器设备的正常运行。

储存条件：室温密封，有效期一年。


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·氨苄青霉素钠溶液(100mg/ml)(细菌培养用)
编号：YT429
英文名称：Ampicillin(100mg/ml,1000X)
规格：5ml
本产品已经过滤除菌，可以直接使用。使用时可以按照1:1000的比例稀释使用。本品是细菌培养常用抗生素，用于配制含氨苄的LB或LB平板等。也可以用于培养细胞的杀菌。

CAS：69-52-3
分子式：C16H18N3O4SNa
分子量：371.39

储存条件：-20℃。

·Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)
编号：YT310
英文名称：Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8
规格：100次
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或总SOD活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。

试剂盒组分：
SOD检测缓冲液———————70ml
WST-8———————————800μl
酶溶液———————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl
Cu/Zn-SOD抑制剂A——————500μl
Cu/Zn-SOD抑制剂B——————500μl

超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。

目前有多种SOD活性测定法，其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差，易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到100%等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法，但细胞色素C其氧化活性高，易受样品中的还原剂干扰，另外该方法需要连续测定吸光度值，对于SOD的检测灵敏度比较低，并且不太适合大批量样本的检测。

目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图，WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。


基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO：xanthine oxidase。

WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时，最大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。

哺乳动物编码3种SOD。在大部分组织中，含量最高的是定位在细胞浆中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表达在线粒体中，并且Mn-SOD是可以被诱导表达的。Mn-SOD在某些情况下也可以定位在细胞浆中。有些组织或体液中会含有第三种SOD，extracellular SOD，简称EC-SOD。EC-SOD也是一种Cu/Zn-SOD，和编码细胞浆Cu/Zn-SOD的基因相似性很高，但有所不同。综上所述，细胞或组织内共有两类SOD，即铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。这两种SOD酶活性的总量就是总SOD的酶活性。当用Cu/Zn-SOD的抑制剂抑制其酶活性时测定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此时同时测定总的SOD酶活性，就可以计算出Cu/Zn-SOD的酶活性。

KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性，也被大量用于测定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有剧毒，并且对Cu/Zn-SOD的抑制百分比达不到很接近100%。

本试剂盒采用了一种无毒的两步双重抑制Cu/Zn-SOD的方法，在避免使用有毒药品的情况下同时确保了对于Cu/Zn-SOD的抑制百分比达到高度接近100%，即对于Cu/Zn-SOD的抑制效果显著优于KCN或NaCN。使对于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的测定更加安全和准确。

注意事项：
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色，如果设置了使用说明中的空白对照3，就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
4. Cu/Zn-SOD抑制剂A对人体有刺激性，使用时请注意适当防护。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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