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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
First Strand cDNA Synthesis Kit
- 库存:
547
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20μl×50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售第一链cDNA高效合成试剂盒北京现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:第一链cDNA高效合成试剂盒北京现货促销
英文名:First Strand cDNA Synthesis Kit
编号:ALH262
产地:国产|进口
规格:20μl×50次
本试剂盒以RNA为模板,用RTase/RNase抑制剂Mix、5×RT Reaction Mix高效合成第一链cDNA,操作简单。制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本试剂盒适用于第一链cDNA合成。可用于高拷贝、低拷贝基因的检测。合成cDNA*(代"片")段长度最高可达12kb。
试剂盒组分(50次):
RTase/RNase Inhibitor Mix-———————50μl
5×RT Reaction Mix———————————200μl
Oligo(dT)18(0.5μgμl)—————————50μl
Random primer (N6)———————————50μl
RNase free H2O—————————————1ml
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 可选步骤(一般不需要):如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
4. RTase/RNase Inhibitor Mix非常粘稠,溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请点甩离心后使用,并且避免吸头外壁沾附损失。可以每次按照0.8μl使用,也不影响使用效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
本品别名:第一链cDNA高效合成试剂盒|cDNA第一链合成试剂盒|高效RT-PCR试剂盒
第一链cDNA高效合成试剂盒北京现货促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·组织细胞基因组DNA提取试剂盒
编号:ALH125
英文名称:Cells/Tissue genomic DNA extraction kit
规格:50次|100次|200次
本试剂盒用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液,首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
试剂盒组份(200次):
RNase A(10mg/ml)——————400μl
细胞核裂解液————————120ml
蛋白沉淀液—————————40ml
DNA溶解液—————————30ml
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂。
2.快速,简捷,组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定,产量高(比离心柱型的产量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70%乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织)、0.5M EDTA和蛋白酶K(用于鼠尾)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量,请联系我们索取其它处理量的操作手册。
储存条件:室温,有效期12个月。
第一链cDNA高效合成试剂盒北京现货促销关键词:cDNA第一链合成试剂盒,第一链cDNA高效合成试剂盒,高效RT-PCR试剂盒
·酵母RNA提取试剂盒
编号:ALH041
英文名称:Yeast RNA rapid extraction kit
规格:50次
本试剂盒适用于酵母RNA的提取,酵母细胞经溶壁酶处理去除细胞壁后,独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 10次 |
| 缓冲液SE | 30ml |
| 溶壁酶(10U/μl) | 2500U |
| 裂解液RLT | 20 |
| 去蛋白液RW1 | 40 |
| 漂洗液RW | 10 |
| RNase-freeH2O | 10ml |
| 吸附柱和收集管 | 10套 |
储存条件:室温,有效期12个月(溶壁酶需-20℃保存)。
注意事项
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,β-巯基乙醇,水浴锅。
4. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般情况下,一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
第一链cDNA高效合成试剂盒北京现货促销关键词:cDNA第一链合成试剂盒,第一链cDNA高效合成试剂盒,高效RT-PCR试剂盒
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