抗荧光淬灭封片液价格

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括抗荧光淬灭封片液价格在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：抗荧光淬灭封片液价格
产地：国产|进口
编号：YT097
规格：5ml
品牌：百奥莱博
英文名：Antifade Mounting Medium
本品是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭。操作简单，在封片时用移液器滴一滴抗荧光淬灭封片液在样品上，盖上盖玻片即可完成操作。按照每个样品封片需要50微升计算，足够用于100个样品的封片。

注意事项：
1. 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。可以向百奥莱博选购各种型号的载玻片存储盒。
2. 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光。

储存条件：-20℃，有效期一年。

欲咨询购买抗荧光淬灭封片液价格，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：
SJ0764 大豆蛋白胨
ARB12654 大鼠催乳素(PRL)检测服务 Rat prolactin,prl ELISA KIT
三*基甲*(代"烷") Glycine ethyl ester HC1 519-73-3
BL1430 10×TBST
ARB13140 小鼠总三碘甲腺原*酸(TT3)酶免分析 Mouse tt3 ELISA KIT
3,3-二*基联*(代"*")*(代"胺")四盐*(代"酸")盐 Resazurin sodiu*(代"m") salt  868272-85-9
BL0885 兔抗猪IgG免疫血清
F050321 猫IgG抗体 The cat IgG
ARB14065 鲤鱼卵黄蛋白原(VTG)elisa检测操作说明书 Fish vtg ELISA KIT
丽春红2R EDTA-3K 3761-53-3
ARB14100 人精浆弹性硬蛋白酶酶免分析 
BL0812 HRP标记人纤维蛋白原抗体
ARB11424 人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA检测服务 Human apolipoprotein e,apo-e ELISA KIT
甘*酸* Leucine Dehydrogenase 6000-44-8
91079-40-2 Casein Enzymatic Hydrolysate  酶水解酪素
抗荧光淬灭封片液价格关键词：抗荧光淬灭封片液,YT097,Antifade Mounting Medium

ARB12762 小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)Elisa方法检测 Mouse gata binding protein 4,gata4 ELISA KIT
ARB12818 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa检测 Mouse dipeptidyl peptldase Ⅳ,dppⅣ ELISA KIT
PY04-069  *啶酮酸  2.25mg/支×10支  每支添加于225mlFraser增菌液中制成FraserⅠ培养基，用于李斯特氏菌选择性增菌培养
BL1426 5×TBE 缓冲液
9007-34-5 Collgen TypeⅡ  胶原蛋白Ⅱ型(牛)
植酸*盐水合物 Acridone 123408-98-0
ARB11685 人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)定量分析 Human glucose transporter 1,glut1 ELISA KIT
90-33-5 4-Methylumbelliferone 4-甲基伞形酮 4-MU
PY02-256  TTC卵磷脂-吐温80-营养琼脂  250克  
J0301 兔抗人IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB10375 人甘露糖(MN)含量测试 Human mannose,mn ELISA KIT
牛磺酸 3-Mercaptopropionic acid 107-35-7
BTN130580 小鼠抗GFP标签单抗 Anti GFP-Tag Mouse Mab
卡特缩合剂 IAM 56602-33-6
4-(4-硝基*(代"*")偶氮)-1-*酚 Grape Seed Extract 5290-62-0
三*乙酸 Phenylhydrazine hydrochloride 76-05-1
ARB12310 大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)血清中含量检测 Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,mag ab ELISA KIT
PY01-174  结晶紫  BS  25克  
L-葡萄糖 Tetramethyl ammonium fluoride 921-60-8
001001 新生牛血清
F030611 FITC标记山羊抗小鼠IgA抗体 Goat Anti-Mouse IgA*FITC
纤维素酶(绿色木霉) Sodium malonate monohydrate 9012-54-8
抗荧光淬灭封片液价格关键词：抗荧光淬灭封片液,YT097,Antifade Mounting Medium


·蛋白质分子量标准(14.4-116kD)
编号：YT627
英文名称：Protein Marker(14.4-116kD)
规格：200μl|1ml
本品包含了从14.4kD到116kD共7种纯化的蛋白质(见下图)，适合作为SDS-PAGE的蛋白质分子量标准。一个包装的本产品后续如果用于考马斯亮蓝染色，大约可以使用约20-40次。

产品特点：
1. 本蛋白质分子量标准已经配制在1X SDS-PAGE上样缓冲液中，可以直接使用。
2. 根据上样孔的大小，本蛋白质分子量标准通常每次上样5-10微升，就可以用染色观察到非常清楚的蛋白条带。


本蛋白Marker包含7个条带：14.4kD，18.4kD，25kD，35kD，45kD，66.2kD，116kD

注意事项：
1. 本蛋白质分子量标准用1X SDS-PAGE上样缓冲液配制，不适用于非变性PAGE胶。
2. Western实验时，建议使用百奥莱博的彩色预染蛋白分子量标准(YT621、YT622)，以便更好地观察转膜效果。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·基因定点突变试剂盒
编号：YT027
英文名称：Site-directed Gene Mutagenesis Kit
规格：10次
本试剂盒可以用于点突变，多个邻近密码子的突变，单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)。

本试剂盒是一个利用目前最新的基因点突变技术设计而成的试剂盒。只需通过基于PCR的突变质粒的合成，和基于Dpn I的模板质粒的消化，转化培养以及后续的酶切或测序鉴定，即可得到预期的突变质粒(参考图1)。累计操作时间不足2小时即可完成基因的定点突变。



参考上图，使用本试剂盒时需要先设计长度通常为30个碱基以上的互补的两个引物，在引物中含有预期的突变位点。然后以待突变的质粒为模板，用这两个引物进行PCR扩增反应。这样可以产生含有预期的突变位点的双链质粒，但这个双链质粒中有两个nick位点。待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌，在细菌中会被甲基化修饰，而在体外通过PCR扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶Dpn I处理，可以消化掉待突变的质粒模板，而使通过PCR扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性地保留下来。这样把Dpn I处理过的产物转化细菌后，质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复，得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。

本试剂盒提供了DH5α甘油菌，可用于感受态细菌的制备。

试剂盒组份：

Pfu DNA Polymerase	10μl
Reaction Buffer(10X)	100μl
dNTP Mix(2.5mM each)	50μl
Dpn I	10μl
DH5α 甘油菌	200μl
Nuclease-Free Water	1ml

储存条件：-20℃，有效期一年。

使用说明：

1. 引物设计：
用于特定基因突变的引物需要单独设计，请参考如下一些基本原则进行设计：
(1) 共需设计两条互补的引物。可以先集中设计一条，然后就可以得到互补的另一条引物。
(2) 引物的长度通常为25-45个碱基。
(3) 引物中突变位点任何一侧都必需满足 4X(GC碱基数)＋2X(AT碱基数) ≥45。但引物也不宜过长，否则通常会形成非常稳定的二级结构。通常把突变位点两侧的碱基数控制在15个左右，且使两侧按照上述计算得到的数值相近。
例如引物为agtcaggccaattcgaagcagtcgaattgccaag，其中蓝色的aag为突变位点，则
左侧：4X(GC碱基数)＋2X(AT碱基数)＝4X8＋2X7＝46≥45
右侧：4X(GC碱基数)＋2X(AT碱基数)＝4X8＋2X8＝48≥45
(4) 在可能的情况下，尽量把引物的GC含量控制在40％-60％。
(5) 在可能的情况下，尽量使引物不要产生非常稳定的二级结构和引物二聚体。二级结构和二聚体可以通过一些软件进行分析。
(6) 最好使用经过PAGE纯化的引物或更高纯度的引物。

2. 引物的配制：
如果合成得到的一个引物A的量是20nmol，另外一个互补引物B的量是19nmol。在引物A中加入200微升水，配制成浓度为100µM，在引物B中加入190微升水也配制成浓度为100µM。吸取20微升100µM引物A和20微升100µM引物B到一新的离心管中，再加入160微升水，混匀后即可得到可以直接用于基因定点突变反应的引物(10µM each)。

3. 待突变模板质粒的选择：
选择GC含量在40-55％的待突变模板质粒，并且每一个50bp左右的局部GC含量最好也不超过70%。如果GC含量过高，请先把目的基因克隆到其它合适的载体上，再进行基因定点突变反应。另外目的基因GC含量最好也在40-55％的范围，并且每一个50bp左右的局部GC含量最好也不超过70%。如果目的基因GC含量过高，而突变位点不在高GC含量区域，可以先把该基因的不含高GC含量的一个区域克隆出来，进行定点突变，然后再把突变后的片断克隆回原基因中。如果必需使用高GC含量的质粒模板，或者有局部高GC含量的质粒模板，请另外使用专门用于高GC含量模板的PCR反应试剂。
必需使用从dam＋的大肠杆菌(这类菌中质粒可以被甲基化)中抽提得到的质粒用于基因定点突变。常用的大部分大肠杆菌都是dam＋的，包括DH5α、JM109等。

4. 基因定点突变反应：
(1) 如下设置基因定点突变反应体系：
Nuclease-Free Water———>?µl
Reaction Buffer (10X)——>5µl
引物 (10µM each)————>2µl
dNTP Mix (2.5mM each)——>4µl
待突变模板质粒(0.5µg)——>?µl
总体积——————————>49µl
按照上面的顺序依次加入各种试剂。在上述反应体系中，根据待突变模板质粒的量，计算出需加入的Nuclease-Free Water的量，使总体积为49微升。适当混匀后，加入 1 ul Pfu DNA Polymerase，混匀。如果用的PCR仪没有热盖，在反应体系上加入一滴矿物油(mineral oil)以防止蒸发。
(2) 按照如下参数设置PCR仪：

步骤	循环数	温度	时间	说明
1	1	95℃	1分钟	最初变性
2	18	95℃	40秒	变性
		60℃	1分钟	退火
		68℃	1分钟/kb	延伸
3	1	72℃	10分钟	延伸、补全
4	1	4℃	长时间保持	暂时存放

说明：上面表格中1分钟/kb表示，如果待突变的质粒为6kb，那么68℃的延伸时间为6分钟。

5. Dpn I消化：
PCR反应后，直接在PCR反应体系中加入1微升Dpn I，混匀后37℃孵育1小时。37℃孵育可以在PCR仪上进行，也可以在水浴锅中进行。Dpn I消化完毕后可以直接用于转化，或者-20℃保存备用。

6. 转化、挑克隆鉴定：
感受态细菌的转化效率必需至少在107以上，否则很难得到克隆。根据所使用的感受态细菌，加入尽量多的经过Dpn I消化后的突变产物用于转化。通常每100微升感受态细菌中可以加入5-10微升经过Dpn I消化后的突变产物。按照所使用的感受态细菌的操作方法进行操作，在涂板前通过离心浓缩的办法，把所有被转化后的细菌，全部涂布到含有适当抗生素的平板上，培养过夜。通常会得到50个以下的克隆。如果发现克隆有上千个，那么肯定是有什么地方出了问题。
对于得到的克隆，可以先挑克隆小抽酶切鉴定。以确认得到的质粒的大小和质粒中插入片断的大小与预期结果是否相符。
取3-5个酶切鉴定正确的克隆去测序，以最终确认得到的克隆是否是预期的突变克隆。通常大约每2个克隆中会得到一个预期的突变克隆。但有时也可能会因为随机因素，会测序了3-5个克隆才得到一个预期的突变克隆。

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