- ￥1980 - 4280
- LMAI Bio
- 美国/中国
- LM718Mu02
- 2025年12月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月，-80°C不超过12个月
- 保质期：
1年
- 英文名：
Recombinant Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1)
- 库存：
30
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
10µg/50µg/200µg/1mg/1g
| 来源 | 原核表达 |
| 宿主 | E.coli |
| 内毒素水平 | <1.0EU/µg(LAL法测定) |
| 亚细胞定位 | n/a |
| 片段与标签 | N-terminal His Tag |
| 缓冲液成份 | 磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） |
| 性状 | 冻干粉 |
原理：
蛋白质的翻译效率很大程度上跟翻译起始效率有关，因此mRNA的5'端必须得很好翻译，最好不要有复杂的二级结构；通过PCR的方法在基因的5‘端引入简并序列，构建克隆，挑选多个克隆，诱导表达之，SDS-PAGE电泳检测表达量的高低，挑选高表达克隆进行测序。
实验步骤：
1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。
2.引物合成上述简并序列，同时设计合成目的基因反向引物。
3.PCR扩展目的基因，这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列，同时不改变氨基酸序列。
4.双酶切，插入到目标载体。
5.转化。
6.挑选多个克隆（比如100-200个）到1.5ml EP管，直接诱导表达（记得带上为改造克隆菌株的对照）。
7.SDS-PAGE检测。
8.挑选高表达的多个克隆，测序。
重组蛋白的特性
Immune tech的重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式，原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态，真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存，这样使得重组蛋白非常稳定，在-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，其中溶解的方法非常关键，因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意，这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。
（1）原核细胞表达的重组蛋白。Immune tech大肠杆菌表达的冻干重组蛋白，已经从包涵体中提纯，添加了蛋白保护剂，使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可，复溶冻干蛋白100 μg，用86 μl的超纯水，轻轻摇晃使蛋白溶解，再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解，一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。
（2）真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译，还要进行翻译后的加工，使得蛋白质的空间折叠方式维持正常，所以重组蛋白必须在真核细胞中进行，如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子，对翻译后的蛋白质进行加工，这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存，保持了其良好的活性和稳定性。
（3）重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集，甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。
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文献和实验茨海默病（AD）老年期常见大脑类疾病，他以进行性记忆力减退和认知功能障碍为主要特征的。目前大脑经过哪些活动会引起阿尔茨海默病仍不十分明确，但 Aβ（β-淀粉样蛋白）的产生和聚集一直被认为是重要因素之一。最新研究发现，在脑的「私生活」中，Aβ存在类似于抗菌肽一样的「正面角色」——保护大脑免于病原体的侵袭。 这么一说，小编就更加不明白了「Aβ到底是好还是坏？」 跟着小编一起涨涨知识，看看 Aβ是个什么神通广大的东西，既能保护大脑还能让全世界 3.5 亿人丧失
胆甾醇的侧链切断酶系 cholesterol side－chain cleavage enzymes
该酶系存在于肾上腺、睾丸、胎盘等的线粒体组分中，是胆甾醇的侧链 20S和 22R的位置羟化后，再将 20位与 22位间切断，而生物合成娠烯醇酮的酶系。所以该酶系是由 20S和 22R的羟化酶和 C20 、 C22 的裂解酶所组成。三种酶都需要分子态氧和 NADPH，含有 P－ 450。可与同样存在于肾上腺中的 11β -羟化酶而被提纯。也称为娠烯醇酮合成酶，是支配类固醇激素生物合成的规则迅速进行阶段的重要酶素。
的早期诊断和治疗对 AD 的防治具有重要的临床意义。 二、AD 诊断的常见蛋白标志物 对于 AD 的早期诊断和疾病风险评估，生物标志物的检测是一项重要指标。关于 AD 发病机制的各种假设导致了许多不同类型的生物标志物的发展，其中更是以 Aβ 寡/多肽、tau 蛋白和载脂蛋白 E（ApoE）的衍生物为主。 1、淀粉样蛋白 β（Aβ） Aβ 肽是由淀粉样前体蛋白（APP）经过 β 和 γ 分泌酶相关的一系列剪切事件后产生的，通常由 38‒42 个氨基酸组成，分子量约 4 kDa。Aβ
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