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- 2026年09月01日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月，-80°C不超过12个月
- 保质期：
1年
- 英文名：
Recombinant Mitoferrin (MFRN)
- 库存：
30
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
10µg/50µg/200µg/1mg/1g
| 来源 | 原核表达 |
| 宿主 | E.coli |
| 内毒素水平 | <1.0EU/µg(LAL法测定) |
| 亚细胞定位 | n/a |
| 片段与标签 | N-terminal His Tag |
| 缓冲液成份 | 磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） |
| 性状 | 冻干粉 |
原理：
蛋白质的翻译效率很大程度上跟翻译起始效率有关，因此mRNA的5'端必须得很好翻译，最好不要有复杂的二级结构；通过PCR的方法在基因的5‘端引入简并序列，构建克隆，挑选多个克隆，诱导表达之，SDS-PAGE电泳检测表达量的高低，挑选高表达克隆进行测序。
实验步骤：
1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。
2.引物合成上述简并序列，同时设计合成目的基因反向引物。
3.PCR扩展目的基因，这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列，同时不改变氨基酸序列。
4.双酶切，插入到目标载体。
5.转化。
6.挑选多个克隆（比如100-200个）到1.5ml EP管，直接诱导表达（记得带上为改造克隆菌株的对照）。
7.SDS-PAGE检测。
8.挑选高表达的多个克隆，测序。
重组蛋白的特性
Immune tech的重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式，原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态，真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存，这样使得重组蛋白非常稳定，在-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，其中溶解的方法非常关键，因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意，这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。
（1）原核细胞表达的重组蛋白。Immune tech大肠杆菌表达的冻干重组蛋白，已经从包涵体中提纯，添加了蛋白保护剂，使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可，复溶冻干蛋白100 μg，用86 μl的超纯水，轻轻摇晃使蛋白溶解，再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解，一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。
（2）真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译，还要进行翻译后的加工，使得蛋白质的空间折叠方式维持正常，所以重组蛋白必须在真核细胞中进行，如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子，对翻译后的蛋白质进行加工，这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存，保持了其良好的活性和稳定性。
（3）重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集，甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。
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文献和实验Nature重磅技术TransTAC选中的受体！TFR1这个铁转运蛋白要火了
，已用于CAR-T活性调控；CD24-H7双特异性降解剂通过TFR1介导CD24溶酶体降解增强抗肿瘤免疫。在铁死亡治疗方面，TFR1高表达肿瘤对铁死亡诱导剂敏感性增强，青-蒿-素通过TFRC-HSPA9轴选择性诱导胃癌铁死亡。总体而言，TFR1在PDC、双抗、蛋白降解和铁死亡诱导等方向均展现临床转化前景，未来需在靶向特异性、安全性和联合免疫治疗策略方面深入探索。 5. 华美生物TFR1相关产品 ● TFR1重组蛋白 Recombinant Human Transferrin receptor
基因，负责转运几乎所有的小分子代谢物。 近年来，铁死亡与肿瘤代谢、免疫代谢、药物转运、罕见病、病原体感染和成熟靶点拓展等领域的突破不断揭示SLC的疾病关联与转化价值。本文围绕SLC超家族的生物学特征，从上述六个方向梳理其研究进展与转化前景。 NO--.1 SLC超家族概况 SLC超家族目前包含464个蛋白编码基因，根据序列相似性（同一家族成员间至少共享20–25%序列相似性）归为70个家族[1][2]。SLC转运蛋白广泛分布在细胞质膜和细胞器膜上，转运的底物涵盖糖类、氨基酸、核苷酸、维生素、离子
【第101期】前沿靶点速递｜谁最可能率先成药？13个潜在靶点盘点
图源：[3] 中国科学技术大学倪芳教授团队联合周颖教授团队在Cell Reports发表了一篇研究，鉴定发现线粒体蛋白GBP6是影响宫颈癌患者预后的关键分子。研究揭示GBP6定位于线粒体，通过与翻译因子TACO1相互作用维持呼吸链复合物IV功能稳定。GBP6缺失导致线粒体能量代谢受损、氧化应激积累，削弱GSH-GPX4抗氧化体系并促进铁死亡。更重要的是，GBP6缺失通过ROS-NF-kB通路增强肿瘤细胞表面ICAM-1表达，促进NK细胞免疫突触形成并提高杀伤效率，首次揭示GBP6连接线粒体
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