- ￥680 - 2280
- ATCC,ECACC,ScienCell, DSMZ, RIKEN 等
- ATCC/国内细胞库
- L509
- 2025年09月08日
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
10的6次方个
- 细胞类型：
详见说明书
- 品系：
具体详细询问公司细胞培养专家
- 组织来源：
猪肺泡巨噬细胞
- 相关疾病：
具体详细询问公司细胞培养专家
- 物种来源：
猪
- 免疫类型：
详见说明书
- 细胞形态：
贴壁
- 器官来源：
人、大鼠、小鼠等其它动物
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 年限：
代数：3-4代
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
T25瓶/株
请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。
- 收货
- T25是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T25瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态（有条件可以拍下此时细胞照片）。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用，如细胞密度高于80%，可以直接消化传代，相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。
- 离心管是用15mL离心管发货的方式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及平衡参考上述T25瓶。平衡完成后，离心（1000rpm，3min）收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。
- 血清是用牛血清直接发货的形式，是细胞冻存管加入含有细胞的牛血清的形式。收到细胞后，拆开自封袋，冻存管表面喷75%酒精消毒后，在超净台中打开冻存管，将细胞用1mL枪头轻轻几次以将细胞吹匀，接种至含有预热的培养基的培养瓶或皿中，显微镜下观察细胞是否吹匀，如果没有吹匀，继续吹匀至3-5个细胞一团，放回培养箱继续培养。
- 干冰是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
- 如不能在收到细胞后及时操作细胞，T25及离心管发货的细胞可以消毒后在37度过夜，血清发货的细胞可以在室温下静置1-2天（注意不要放冰箱），干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。
- T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心（1200rpm，5min）后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
- 部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍在加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心（1000rpm，3min）收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。
- 细胞培养及传代
- 细胞请于细胞培养箱中培养，大部分细胞是37℃，5% CO2，湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致，请仔细阅读相应的细胞说明书，使用正确的培养基及培养条件；
- 细胞于培养瓶或皿中培养，加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基（一般液面高度2-3mm即可）。
- 细胞培养至密度达80%以上时即可传代，先将细胞培养基取出3mL用15mL离心管装好，其他培养基全部吸干舍弃；
- 培养皿加入2-3mL无菌PBS，轻轻晃动皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍弃；
- 加入1mL胰酶，轻轻晃动皿，使胰酶浸没到皿底所有部位，将皿盖好放入培养箱中消化；
- 若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至不贴壁为止；
- 将细胞悬液均匀分成几份，分别加入不同培养皿中，补加新培养基后放回培养箱培养。
- 部分细胞在传代后时，会有以下现象：细胞内会有黑色小点、细胞间隙有些颗粒物、培养基漂浮一些死细胞或者细胞长的极慢。出现以上现象时，可以咨询本公司技术人员此现象是否正常及相关处理方式，不要频繁换液，大多数细胞1周换液2-3次即可。
- 细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心（900rpm，3min）能有效改善。
- 传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的按1:2传代。传代后，建议不要使用传代前培养所使用的培养基，会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。
- 细胞状态不好或者生长极慢的时候，可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。
- 请不要随意更换培养基，因实验需要，可以逐步驯化。
- 细胞冻存
- 冻存液配方：建议使用92%FBS+8%DMSO，客户自身实验室所使用的冻存液也可以适用，血清浓度不低于30%，DMSO含量不高于12%即可。
- 收集细胞按照以上细胞传代步骤操作至第④步后，将细胞悬液收集入15mL离心管，离心（1200rpm，3min）；
- 弃上清，加入配制好的冻存液，重悬细胞，悬液加入无菌冻存管中；
- 将冻存管在4℃静置10min，后将之正置于室温下的厚壁有盖泡沫盒中，盖紧盒盖，放入-80℃冰箱过夜，第二天放入液氮即可长期保存。
- 10cm皿的细胞长满一般可以冻存2-3管，部分细胞长的比较慢，冻存的细胞密度要稍微大点，以防止复苏后生长困难。
- 冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO，同时浓度不要太高。部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡，所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度。
- 细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则，即冻存时温度不能急剧下降，应控制温度缓慢下降。复苏时应快速融化，融化后尽快加入培养基中。
- 冻存时建议设置冻存检测，即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中，与正常体积冻存的细胞共同冻存，至液氮后复苏检查冻存结果。冻检合格前，留一部分细胞继续培养，以防万一。
- 细胞复苏
- 将冻存细胞从液氮中取出后迅速放入37℃温水中摇晃融化，时间1min左右；
- 于1000rpm离心1min，弃冻存液，加入1mL新的完全培养基重悬细胞；
- 接种至新培养瓶或皿中，补加足量完全培养基，放入培养箱中培养。
- 复苏过程应迅速操作，时间不能太长。
- 复苏过程中注意污染，小心操作。
细胞培养需要耐心与细心，希望您能获得一个满意结果！
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验恩泽康泰进军家畜外泌体研究领域——全面解锁猪/牛/羊/鸡外泌体研究
参考。 例如以下“猪”疾病/疫情相关外泌体研究：非洲猪瘟病毒（ASFV）感染传播，ASFV在感染后期诱导原代猪肺泡巨噬细胞（PAM）的细胞凋亡，以有效地脱落ApoBDs，随后被相邻的PAM吞噬，从而引发二次感染(Proc Natl Acad Sci U S A. 2023 Nov 28;120(48):e2309506120. IF=11.1 1区)；外泌体介导猪流行性腹泻病毒PEDV的抗体抗性细胞间传播(Vet Microbiol. 2023 Sep;284:109834. IF=3.3
重大突破！哈尔滨兽医研究所成功创制猪瘟疫苗，有望控制猪瘟疫情
Life Sciences为了评价不同基因缺失的 ASFVs 毒力，研究人员利用 DNA 同源重组技术，通过删除 MGF505 - 1R、MGF505 - 2R、MGF505 - 3R、MGF360 - 12L、MGF360 - 13L、MGF360 - 14L、CD2v、9 GL、DP148R、UK 等基因片段构建了 6 种不同的病毒。并将携带报告基因 GFP 和 / 或 mCherry 的基因缺失病毒在猪肺泡巨噬细胞 (PAMs) 中纯化，经序列分析命名为 HLJ/ 18 - 6 GD、HLJ
位升高），不知道我的这个结果是否可以说明gsk活性降低了？还是一定需要第九位的结果才能解释这个问题？似乎也有些人说216特异性不强，没有第九位有说服力，不是很能理解这其中的原因，再次感谢你！ ylhuang0502 As for the GSK phosphorylation, it is clear now that, GSK serine phosphorylation (S9 for beta and S21 for alpha
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
