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- 北京
- BTN130430-TFN
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输
- 保质期：
长期
- 英文名：
E.coli DNA Polymerase I
- 库存：
810
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ特价优惠，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ特价优惠
编号：BTN130430
产地：国产|进口
规格：500U
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(DNA polymeraseⅠ)，1956年由Arthur Kornberg首先发现的DNA聚合酶，又称Kornber酶。纯化的DNA polⅠ由一条多肽链组成，约含1000个*基酸残基，分子量为109KD。含有一个二硫键和一个-SH基。
图注：左图为Klenow片段，右图为大肠杆菌DNA聚合酶Ι
产品组成：
| 成份 | 规格 |
| DNA聚合酶I(10000U/μL) | 50μL |
| 10×工具酶通用缓冲液 | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
产品特点：
1．除具有5´→3´DNA聚合酶功能，还具有5´→3´外切酶活性，3´→5´外切酶活性，焦磷酸解作用和焦磷酸交换作用。
2．可应用于切口平移和cDNA第二链合成。
3．本品不含DNase I，因此切刻平移反应时需额外添加 DNase I。
单位定义：1单位指37℃条件下，30分钟内能催化10nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
反应条件：1×Buffer [10mM Tris-HCl，50mM NaCl，10mM MgCl2，1mM DTT(pH7.9@25℃)]。加入dNTPs(不随酶提供)。
Buffer成分：25mM Tris-HCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，50% Glycerol，pH7.4 @25℃
热失活：75℃ 20分钟。
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文献和实验大肠杆菌DNA聚合酶（E.Coli DNA polymerase）主要有3种作用：①5’→3’的聚合作用。但不是复制染色体而是修补DNA，填补DNA上的空隙或是切除RNA引物后留下的空隙。②3’→5’的外切酶活性。消除在聚合作用中掺入的错误核苷酸。③5’→3’外切酶活性。切除受损伤的DNA。它在切口平移（nick translation）中应用。 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段是完整的DNA聚合酶Ⅰ的一个片段，只有在5’→3聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，失去
平移法(nick translation)是一种最常用的标记双链DNA探针的方法，该方法利用DNA聚合酶I的多种酶促活性将标记的三磷酸脱氧核糖核苷(dNTP)掺入到新合成的DNA链中，从而合成高比活性的均匀标记的DNA探针。其基本原理是首先用适当浓度的DNA酶I在DNA探针分子的一条链上打开缺口(nick)，缺口处形成3，羟基末端；利用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ 5， →3， 方向外切酶活性，将缺口处5， 端核苷酸依次切除；与此同时，在大肠杆菌DNA聚合酶I的5， →3， 聚合酶活性的催化
NDA链，同时切除原来的旧链。这样，从切口开始合成了一条与被取代的旧链完全相同的新链。如果新掺入的脱氧核苷酸三磷酸为α-32P-dNTP，则重新合成的新链即为带有同位素标记的DNA分子，可以用作探针进行分子杂交实验。 尽管DNApolⅠ是第一个被鉴定的DNA聚合酶，但它不是在肠杆菌中DNA复制的主要聚合酶。主要证据如下:[1]纯化的DNApolⅠ催化dNTP掺入的速率为667碱基/分，而体内DNA合成速率要比此高二倍数量级;[2]大肠杆菌的一个突变株中，此酶的活力正常，但染色
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