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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃或-80℃避光保存,有
- 保质期:
长期
- 英文名:
Firefly Luciferase Assay Kit
- 库存:
613
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒 是高品质的细胞及免疫学产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒等细胞及免疫学产品请联系我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒 细胞及免疫学,产品信息:
类别:细胞及免疫学
英文名:Firefly Luciferase Assay Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒 | BTN130597 | 100次 |
品牌:百奥莱博
英文名:Firefly Luciferase Assay Kit
编号:BTN130597
产地:国产|进口
本试剂盒采用通用裂解缓冲液,能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。本产品与海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒共同使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
报告基因检测是真核基因表达调控研究的常用方法。因为检测光量子的方法非常敏感,所以生物发光法是报告基因检测最常用的手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化,发射出光子。萤火虫荧光素酶催化的发光反应,具有很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围),酶的检测灵敏度达到10⁻²ºmol。原理如下:

试剂盒特点:
1.高度灵敏:可检测10⁻¹⁸~10⁻²ºmol荧光素酶。
2.线性范围宽:线性范围达到7~8个数量级。
3.快速简便:特别适合于高通量筛选。
4.兼容性好:与其它常用报告基因检测试剂兼容。
5.本产品可足够100次荧光素酶检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 5×Universal Lysis Buffer (通用裂解缓冲液) |
20mL |
| Fassay Buffer | 10mL |
| Fassay Substrate(底物) | 0.5mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃或-80℃避光保存,有效期半年。
使用方法:
★裂解细胞:
1. 配制裂解液:临用前,取适量5×Universal Lysis Buffer(ULB),用双蒸水稀释至1×ULB,混匀。1×ULB可在4℃存放数周。
2. 清洗细胞:倾去培养板/皿中的培养液,加入足量PBS ,轻轻洗涤细胞。完全倾去洗涤液。
3. 裂解细胞:按照下表中推荐的体积,在孔/皿中加入1×ULB ,混匀。培养板可在微型振荡器上震荡5-10分钟;培养皿可直接用细胞刮刀刮下细胞,将细胞悬液移入1.5mL离心管,在涡旋振荡器上充分混悬震荡30秒。裂解细胞悬液可直接用于发光测定,也可离心30秒,取上清液做发光测定。
表:不同孔/皿所需1×ULB体积
| 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 | 35mm平皿 | 60mm平皿 |
| 50μL | 80μL | 150μL | 250μL | 500μL | 500μL | 1000μL |
★配制发光反应液:
测定前,室温溶化Fassay Buffer和Fassay Substrate,混匀。按20/1比例用Fassay Buffer稀释Fassay Substrate,配制所需体积的Fassay Reagent(注意避光)。
★测定仪器的设置:
按仪器操作说明开启发光测定仪。手动操作型仪器,将测读时间设为10~20秒。自动操作型仪器,一般将测定延迟设为2秒,将测读时间设为10~20秒,Fassay Reagent的注入体积设定为100μL。
★手动发光测定:
取待测样品20μl加入测量管底部,取Fassay Reagent 100μL立即加入管底部,轻轻敲击管壁3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。如用多孔板同时手动测定多个样品,则将各待测样品20μL分别加入连续的各孔底部,用多道加样器于各孔底加入Fassay Reagent 100μL,轻轻敲击板侧3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
★自动发光测定:
配制好的Fassay Reagent置于测定仪内并连接好对应管道。取待测样品20μL分别加入测定管/板孔底部,启动自动测量程序。记录Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
注意事项:
1.Fassay Substrate(底物)溶液应密封、盖严存放,避免蒸发。Fassay Buffer和Fassay Substrate(底物)应避免反复冻熔,可分装成合适体积分次使用。
2.1×细胞裂解液一般在当天测定。如需隔日测定,应将样品于-20℃保存。长期保存应在-80℃。
3.用多孔板同时手动测定多个样品时,要尽量缩短样品间试剂加入的时间间隔。
4.本产品与海肾荧光素酶活性检测试剂盒联合使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒 细胞及免疫学专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:Firefly Luciferase Assay Kit,BTN130597,萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒
我公司依托国内外技术研发人才的优势,公司的销*(代"售")额保持高速增长,企业规模不断扩大,拥有专业的技术研发团队,长期致力于ELISA试剂盒、生物试剂(包括)的研发,为客户提供引物设计与合成、免疫组化、PCR定量服务等一系列实验代测服务。
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN131038 | 核酸扩增(PCR) | dUTP溶液,100mM |
| BTN130639 | 工具酶 | 核酸内切酶III(Nth) |
| BTN120694 | 克隆与表达 | 制霉菌素溶液 |
| BTN131224 | 其他细胞生物学试剂 | Helly固定液 |
| BTN60903 | 其他生化试剂 | Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.5)(不含RNase) |
| BTN111009 | 基因结构和功能 | 端粒酶重复片段扩增试剂盒(TRAP试剂盒) |
| BTN81212A | 蛋白质研究 | 一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH) |
| BTN120676 | 探针标记及检测 | Southern封堵液(NC专用) |
| BTN131236 | 蛋白质研究 | 牛血清白蛋白封堵液 |
| BTN100211 | 核酸电泳和回收 | 50×TAE电泳液 |
| BTN3621 | 核酸电泳和回收 | 微量DNA助沉剂 |
| BTN101005 | 核酸扩增(PCR) | 即用型易错PCR试剂盒 |
| BTN81109B | 克隆与表达 | 酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型) |
| BTN121110 | 探针标记及检测 | 超快DNA-RNA两用转膜试剂盒 |
| BTN100831 | 蛋白质研究 | 5-*-4-*-3-吲哚磷酸(BCIP) |
| BTN121206 | 探针标记及检测 | DNA稀释液 |
| BTN3191 | RNA纯化 | Tris饱和酚 |
| BTN3280 | 核酸电泳和回收 | 电泳级SYBR Green I |
| BTN131053 | 蛋白质研究 | DTT(蛋白级) |
| BTN131183 | 工具酶 | 链激酶 |
| BTN110809 | 蛋白质研究 | 6mL亲和层析柱 |
| BTN120406 | DNA纯化 | 柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒 |
| BTN80801 | DNA纯化 | 柱式拭子DNA提取试剂盒 |
| BTN90303 | DNA纯化 | 硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取) |
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文献和实验zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题,未得其解,恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
一、简介 多种化学和生物发光方法目前已用于基础生化和微生物研究、分析生化、分子毒理学、药学和环境生物学领域 (3) 。萤火虫的荧光素 - 荧光素酶系统是最早建立的发光模型之一 (4) ,仍被广泛用于发光应用中,并且是检测 ATP 的最灵敏的方法 (1) 。与细胞外基质相比,活细胞表现出更高的 ATP 浓度,并且多数细胞生命活动与 ATP 浓度的变化相关。 在最佳的反应条件和较低的 ATP 浓度下,光强度与 ATP 浓度
前言 体外分子水平的研究要结合细胞学的体内研究,才能得到更全面更真实的认识。尤其是免疫学研究中的细胞实验,包括细胞形态,细胞功能,细胞间的相互作用等,更是被越发看重。传统的方法,比如某个时间点对细胞固定染色通过显微镜拍照的方式观察细胞的变化情况,或是用流式、ELISA、PCR等终点法实验对细胞的免疫反应进行检测,这些方法都难以在活细胞状态下进行长时间监测和分析。 如果能够通过实时动力学反映出活细胞的状态随时间的变化,岂不是更好? 赛多利斯Incucyte®实时活细胞分析系统,可以将设备
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