一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)价格

一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)价格

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  • ¥130 - 2390
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN81212C-EAM
  • 2025年07月05日
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    • 保存条件

      常温运输和保存(上样液需-20℃保存),

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      One-Stop Protein Native PAGE Pack(C)

    • 库存

      884

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)价格
    规格:30次
    英文名:One-Stop Protein Native PAGE Pack(C)
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN81212C
    非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一,跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同,它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同,所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐,为此本公司开发了本产品。

    产品特点:
    1.即开即用,不需单独准备各种成分,十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
    2.非变性,电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用,得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
    3.可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
    4.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
    5.提供具有3种不同pH的缓冲液套装,便于客户选择最适合的缓冲液体系。

    产品组成:

     
    成分 规格
    丙*(代"烯")酰胺干粉 60g
    甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉 3g
    TEMED 1.5ml
    过硫*(代"酸")铵干粉 1g
    高中低缓冲液套装选一 ABC之一(见下)
    说明书 1份
    高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分)
    高pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× 100ml
    高pH分离胶配胶液(pH8.9),4× 200ml
    高pH电泳液(pH8.3) 10L(干粉)
    高pH上样液,5× 1ml
    中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分)
    中pH浓缩胶配胶液(pH5.5),4× 100ml
    中pH分离胶配胶液(pH7.5),4× 200ml
    中pH电泳液(pH7.0)干粉A 55.2g
    中pH电泳液(pH7.0)干粉B 10g
    中pH上样液,5× 1ml
    低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分)
    低pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× 100ml
    低pH分离胶配胶液(pH4.3),4× 200ml
    低pH电泳液(pH4.5) 10L(干粉)
    低pH上样液,5× 1ml

    注:高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液,只是pH不同。

    储存条件:常温运输和保存(上样液需-20℃保存),保存期为一年。

    使用方法:
    如何选择缓冲液?
    高pH浓缩胶,高pH分离胶,高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此,绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液,电泳液,配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要,缓冲液的最佳pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI,则蛋白质分子带电多(电荷密度大),电泳速度快,分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性,失去活性,所以最佳pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡,需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定,没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5,所以在不知道目标蛋白的pI时,可以先选用高pH缓冲系统。

    一、配制分离胶
    1.确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质,可选用3-5%的胶;对分子量在20-150KD之间的蛋白质,可选用5-10%的胶;对分子量在10-80KD之间的蛋白质,可选用10-15%的胶。对未知样品,建议使用7.5%的胶。
    2.配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液,该溶液可以在4℃存放一周。
    3.配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液最好在一个月内用完,必须4℃避光保存。
    4.配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
    5.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
    6.加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则按比例增加),迅速摇匀后倒胶。注意:如果购买的是低pH缓冲系统,由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低,所以需要增加上述两成分的用量。
    7.在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水,使胶顶部液面平整。由于比重不同,水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
    8.室温聚合30-60分钟后,用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部,待用。

    二、配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率,适合于成分复杂的样品,一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同,蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品,可以不用浓缩胶,此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度,尺寸和形状相关。)
    1.配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
    2.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
    3.按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则用量需按比例增加),迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
    4.在液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
    5.室温聚合30-60分钟,拔出梳子,用1×电泳液冲洗加样孔。

    三、电泳
    1.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注:本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种,低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液,可以室温放置,用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH,但保险起见,可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3,7.0和4.5。
     注意:中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液,否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A,5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀,加去离子水至彻底溶解,调PH7.0,定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
    2.连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI,目标蛋白将带负电荷并向阳极移动,可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极);如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI,目标蛋白将带正电荷并向阴级移动,此时应该下阴极上阳极。
    3.300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
    4.换电泳液。
    5.在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl,1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意:如果用考染检测,每个孔的蛋白最好在50-100μg总蛋白,如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀,可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA),用前最好用pH试纸测试一下,不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
    6.上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
    7.用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意:电泳过程最好在冷室或有冷却系统,以免电泳产热使蛋白质变性。
    8.终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。

    我公司的一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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    ·卵白蛋白标准品(2mg/mL)
    编号:BTN90610
    英文名称:Ovalbumin Standard
    规格:1mL
    本产品是浓度为2mg/mL的卵白蛋白,用做蛋白测定的标准品。

    储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。

    ·丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(19:1)
    编号:BTN130967
    英文名称:Premixed Acr-Bis Powder
    规格:100g
    本产品为即用型丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺预混干粉(19:1),用户可直接加入去离子水溶解即可得到丙*(代"烯")酰胺溶液,用于配制各种PAGE胶,如SDS-PAGE,Tricine-SDS-PAGE等。使用方便,避免了用户直接接触有毒的丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺。

    储存条件:常温运输及避光干燥保存,有效期一年。

    ·杆菌肽溶液
    编号:BTN120682
    英文名称:Bacitracin Solution
    规格:1mL
    本产品是浓度为100mg/mL的杆菌肽溶液。杆菌肽(枯草菌肽; 雀西杆菌素;Ayfivin;Baciguent;Bacitin),分子式C66H103N17O16S ,分子量是1422.69,CAS号是1405-87-4,易溶于水,能溶于乙醇、甲醇和冰乙酸。杆菌肽是由地衣型芽孢杆菌产生的多肽类抗生素,对大多数革兰氏阳性菌特别是耐药葡萄球菌具有较强的抗菌作用。

    抗性机制:本品溶液能被多种重金属盐类沉淀,抗菌谱与青霉素相似,对革兰阳性细菌和阴性球菌、肺炎双球菌、葡萄球菌、淋球菌、脑膜炎双球菌及螺旋体等均有杀菌作用。其作用机制不仅作用于细胞壁,也影响原生质体,对胞浆膜也有损坏作用,影响其渗透性。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期6个月。



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