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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存(SDS-PAGE上样液需
- 保质期:
长期
- 英文名:
One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(B)
- 库存:
741
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)价格
英文名:One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(B)
产地:国产|进口
编号:BTN100908B
规格:30次
品牌:百奥莱博
本产品是在SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)套装基础上改良而得,主要改良的地方有两处:一是配胶液的pH偏酸,二是将还原剂加入到电泳液中。
产品特点:
1.偏酸的pH使PAGE胶比常规SDS-PAGE 更加稳定,便于配预制胶,增加实验的可重复性。
2.能降低蛋白质的脱*反应和烷基化反应,也能阻止蛋白质的二硫键再生成。
3.把还原剂整合到电泳液中,避免了蛋白质在电泳过程中重新形成二硫键,蛋白条带比常规SDS-PAGE 更加锐利。
4.可把分离胶和浓缩胶配胶液整合成一个,成分更简单。
5.更换电泳液即可用于不同大小的蛋白(A型电泳液适合20 kD以上蛋白,B型适合2-50 kD蛋白),分离多肽时不需要Tricine-SDS-PAGE。
6.即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
7.安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
8.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
产品组成:
| 成分 | 30T(A) | 30T(B) |
| 丙*(代"烯")酰胺(干粉) | 60g | 60g |
| 甲叉双丙*(代"烯")酰胺(干粉) | 3g | 3g |
| 长效期SDS-PAGE 配胶液,4× | 200ml | 200ml |
| 长效期SDS-PAGE还原剂 | 10ml | 10ml |
| TEMED | 1.5ml | 1.5ml |
| 过硫*(代"酸")铵 | 1g | 1g |
| 长效SDS-PAGE上样液,5× | 1ml | 1ml |
| 长效期SDS-PAGE电泳液A型 | 20L | - |
| 长效期SDS-PAGE电泳液B型 | - | 20L |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(SDS-PAGE上样液需-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一、使用本产品不需要浓缩胶,直接配制分离胶。如果使用A型电泳液(分离30 KD以上蛋白质用),最好配制10%的PAGE胶;如果使用B型电泳液(分离2-30 KD的蛋白质用),最好配制12%的PAGE胶。也可以选择其他胶浓度,但各成分用量需要按比例调整。
1.第一次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水,充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2.第一次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(简称30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对长效期SDS-PAGE电泳,丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1,因为此时PAGE胶的孔径最小,分辨率最高。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中,摇晃溶解即得30%的AB溶液,该溶液最好4℃避光(可包上锡箔纸壁光)保存并在一个月内用完。30% AB溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
3.新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL 去离子水的比例将去离子水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中,摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
4.本产品不需要配制分离胶和浓缩胶两种胶,只需要配一种连续胶。配制方法如下(以下是以配制10mL的胶的用量为例,用户自己需要根据胶的大小决定所需体积):
| 胶浓度 | 用量(mL) | 总体积 (mL) |
||
| 去离子水 | 30% AB溶液 | 4×长效期SDS-PAGE配胶液 | ||
| 10%(对A型) | 4.20 | 3.30 | 2.50 | 10 |
| 12%(对B型) | 3.50 | 4.00 | 2.50 | 10 |
5.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6.加入50μL新配制的10%APS和30μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则按比例增加),迅速摇匀后倒胶。
7.在胶的液面达到顶部的时候停止灌胶并插入梳子,室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
8.拔出梳子,用水冲洗加样孔。
9.配制的PAGE胶可以在4℃长期放置数月,直到使用。注意:需要盖上1×长效期SDS-PAGE 配胶液,否则PAGE胶会变干而无法使用。
10.使用时,将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够量的1×长效期SDS-PAGE电泳液(A型或B型)。
注意:长效期SDS-PAGE电泳液A型或B型均以干粉形式提供,足够配20 L 1×电泳液。配制时需将全部干粉(含多种没有充分混合的成分,必须一次性全部使用)溶解在去离子水中,并定容到1 L,得到20×长效期SDS-PAGE电泳液,使用时再用去离子水稀释成1×电泳液。20×长效期SDS-PAGE电泳液不需要调pH,可以室温放置。
11.在上槽中加入适量的1×长效期SDS-PAGE电泳液和1/200 体积(以电泳液体积为基数)的长效期SDS-PAGE还原剂并用玻璃棒搅拌混合均匀。
12.在蛋白质样品中加入5×长效期SDS-PAGE上样液(8μL样品加2μL上样液),72℃加热10分钟。注意:上样液中的一些成分在低温保存时会沉淀,所以用前需要65℃保温10分钟左右使沉淀溶解,混匀后才能使用。上样液中的2-巯基乙*(代"醇")容易挥发,使用多次后用户可以在10μl样品(蛋白质样品+上样液的混合液)中补加0.5μl自备的2-巯基乙*(代"醇")原液,以便使蛋白质充分变性。如果样品是蛋白质沉淀(如TCA沉淀得到的蛋白质),则需要用Tris缓冲液将其pH调到中性(可用pH试纸检测),否则残留溶剂可能会改变上样液的pH,严重影响电泳效果。
13.短暂离心,取上清液上样。上样的蛋白总量跟检测方法相关,如果用银染,可以只上样ng级别(对每条带的蛋白量而言),如果用考染,需要上样μg级别(对每条带的蛋白量而言)。
14.用150V恒压电压进行电泳,直到染料进入胶底部(在B型电泳液中,*酚蓝的速度相当于3-5 KD的蛋白质)。注意:在长效期SDS-PAGE中的电泳速度要快于普通SDS-PAGE。在B型电泳液中的速度又快于A型电泳液。过程中,电流会降低,属于正常现象。
15.终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或转膜)。注意:Western转膜需要专门的转膜液(百奥莱博可以提供)。
二、如果需要更高分辨率,也可把上法配制的胶当成分离胶,并在其上再叠加4%的浓缩胶,操作如下:
16.按上面方法配制分离胶,只是倒胶后在胶面距离顶部1.5cm的时候,或者距梳子齿0.5cm时,停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm 厚的水,使胶顶部液面平整。室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)后,用1×长效期SDS-PAGE 配胶液洗涤凝固的胶的顶部,待用。
17.配制4%浓缩胶(参考上节第4-6 步)。倒胶后在液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子,室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
18.拔出梳子,用1×电泳液(A型或B型)冲洗加样孔,后续处理接第7步。
我公司的一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·Ficoll-Paque介质
编号:BTN131136
规格:100mL
本产品含Ficoll PM400、EDTA等成分,它化学惰性,其密度和浓度经过优化,专门用于从外周血中分离淋巴细胞的密度梯度离心介质,同时能保持B和T淋巴细胞的活性和完整性。内毒素含量低于0.2EU/mL。所得淋巴细胞可以用于DNA提取、RNA提取和其他体外实验。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·硫*(代"酸")卡那霉素干粉
编号:BTN60302
英文名称:Kanamycin Sulfate Powder
规格:1g
卡那霉素硫*(代"酸")盐是*基糖甙类广谱抗生素。分子式为C18H36N4O11·H2SO4。分子量为582.60,白色或类白色粉末或不规则棱柱体结晶。易溶于水,几乎不溶于一般醇类和非极溶剂。
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。
·甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)
编号:BTN130644
英文名称:Formamidopyrimidine DNA Glycosylase
规格:500U
Fpg(甲酰胺嘧啶[fapy]-DNA糖基化酶)也称作8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG),既有N-端糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链DNA上受损的嘌呤碱基,产生一个脱嘌呤(AP)位点。AP-裂解酶活性可以切割AP位点的3´或5´端,因此可以除去AP位点,产生一个具有3´和5´磷酸的碱基缺口。被Fpg识别并切除的受损碱基包括:7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤(8-氧代鸟嘌呤)、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和5-羟基尿嘧啶。
产品特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数,1:10³~10⁴;
2.碱性析出;
3.碱解旋;
4.修饰的切刻平移技术。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| Fpg(8000U/mL) | 62.5μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl反应体系中,37℃ 1小时,能够切割1pmol含单个与胞嘧啶配对的8-氧代鸟嘌呤的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。
一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)价格关键词:一站式长效期SDS-PAGE套装B,BTN100908B,One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(B),2-30KD,一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)
·谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖)
编号:BTN120101
英文名称:Glutathione Agarose
规格:2mL
谷胱甘肽琼脂糖亲和基质是结合谷胱甘肽(GSH)的4%浓度的交联珠状琼脂糖基质,可用于结合和分离纯化带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)等谷胱甘肽亲和性蛋白质分子,特别是重组表达的GST融合蛋白。可用于带有GST标签的重组蛋白的纯化和GST pull-down实验。
产品特点:
1.特异性高,不与非GST融合蛋白相结合。
2.高结合量,每毫升基质可结合5~10mg重组GST融合蛋白。
3.高度灵活,可填装任意品牌的柱子。
储存条件:低温运输,4℃保存(切勿冻结),有效期一年。
·dNTP溶液(100mM)
编号:BTN51208C
英文名称:dNTP Solution,100mM
规格:0.5mL
本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液,每种核苷酸的浓度为100mM,纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定,请参考相关手册。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
DNA为何使用2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶?
DNA为何不选择现成的光合作用产物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分别作为其糖分子和碱基,而去选择需要额外的合成步骤才能得到的2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶(thymine),其原因何在呢?目前的主流观点是:DNA不能选择核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基团会使得到的双螺旋骨架结构不均匀、不平行,难以有效地折叠进染色体结构中,而使用2"-脱氧核糖则能得到均匀平行的双螺旋结构;原因之二是核糖2"位置上的OH基团会对邻近的磷酸二酯键进行分子内亲核攻击,降低分子的稳定性,而对遗传物质来说稳定性十分重要,所以DNA选择了失去分子内亲核攻击能力的2"-脱氧核糖。对信使分子而言,稳定性并不重要,所以RNA仍然使用核糖。
DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)会缓慢水解变成尿嘧啶,如果尿嘧啶也是DNA的正常组成成份,则DNA修复系统就不能区分哪些尿嘧啶是正常的,哪些是需要修复的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一个甲基)不但能保持跟尿嘧啶一样的形成碱基对的能力,同时又能跟尿嘧啶区别开来,使DNA分子中出现的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)发现和修复。
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