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Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒促销

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  • ¥180 - 1830
  • 百奥莱博
  • 北京
  • WE0279-OGC
  • 2025年07月08日
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    • 保存条件

      2~8℃

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      Tricine-SDS-PAGE Gel Kit

    • 库存

      987

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒促销
    英文名:Tricine-SDS-PAGE Gel Kit
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
      常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白,对于相对分子量小的,尤其是10 kD以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。本产品包括Tricine-SDS-PAGE凝胶制备所需全*(代"套")试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的凝胶,方便、快捷,电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。

    试剂盒组成

     
    组份 50次
    49.5%T 3%C 30ml
    49.5%T 6%C 100ml
    Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer 140ml
    Glycerol 30ml
    APS 0.5 g
    TEMED 750μl

    本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末,使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水),将溶液分装后置于-20℃保存,通常半年内有效。溶液在使用中可放置4℃保存两周。

    注意事项
    1、本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末,使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水),10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定,应尽量减少室温存放时间,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换,使用-20℃保存的10%APS。
    2、在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
    3、在分离胶上层加纯水时要小心操作,加水时速度不能太快。
    4、丙*(代"烯")酰胺具有神经毒性,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
    5、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。

    操作步骤

    根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,凝胶浓度配方参考附表。

    I 配制分离胶
    1、将不同体积的纯水、49.5%T 6%C、Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer和Glycerol(甘油)加入到离心管中混合。
    2、加入10%APS和TEMED,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
    3、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液(对于1 mm mini-gel,分离胶溶液加约4ml),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
    4、静置,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

    II 配制夹层胶
    去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水尽量吸去。
    1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
    2、加入10%APS和TEMED,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
    3、将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面(对于1 mm的mini-gel,夹层胶溶液加约1ml), 然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层,使凝胶表面保持平整。
    4、静置,待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

    附表Tricine-SDS-PAGE凝胶配方表:
    组份 分离胶(胶浓度/配制体积) 夹层胶
    (胶浓度/配制体积)
    浓缩胶
    (胶浓度/配制体积)
    20%/4.5ml 16.5%/4.5ml 15.5%/4.5ml 10%/2ml 4%/2ml
    49.5%T 3%C - - - 0.407ml 0.16ml
    49.5%T 6%C 1.82ml 1.5ml 1.395ml - -
    凝胶缓冲液 1.5ml 1.5ml 1.5ml 0.667ml 0.496ml
    甘油 0.48ml 0.48ml 0.48ml - -
    ddH2O 0.7ml 1.02ml 1.125ml 0.926ml 1.344ml
    10% AP 40μl 40μl 40μl 20μl 20μl
    TEMED 5μl 5μl 5μl 3μl 3μl


    III 配制浓缩胶
    去除覆盖在夹层胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
    1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
    2、加入10%APS和TEMED,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
    3、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
    4、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
    5、进行电泳操作。

    IV 电泳
    将电泳槽放入4℃或冰水浴中,外槽加入阳极缓冲液,内槽加入阴极缓冲液,30V预电泳10 min,将样品(已经过Tricine专用上样缓冲液处理)加入点样孔后30V电泳1小时,100V电泳至*酚蓝到达胶底部后停止电泳,进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。

    储存条件:2~8℃

    欲咨询购买Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:

    ·水性封片剂
    编号:WE0317
    英文名称:Mounting Solution(Aqueous)
    规格:10ml
      在免疫组化切片染色中,有些显色底物(如AEC,AP-Red)生成的颜色产物以及一些核复染试剂(如核快红)为脂溶性,可溶于有机溶剂。因此,染色和复染过程中若用到此类试剂,就不适合用梯度酒精脱水、二甲*透明、中性树胶封片,而应使用水性封片剂进行封片。本产品适用于AEC、AP-Red染色,以及BCIP/NBT染色(核快红复染)后封片使用。

    注意事项
    1、本封片剂是水溶性的,凝固后再遇水仍可溶解。因此封好的组织片应避免与水接触,否则需要再次凝固或重新封片。
    2、本产品含有防腐剂,操作时应戴手套。

    操作步骤
    1、IHC染色结束后,擦干组织周围水分,加适量(一般约100μl)水性封片剂于组织上,使其覆盖整个组织表面。
    2、将切片放置于干净平整处,使封片剂凝固。封片剂完全凝固时间:室温1小时左右,65ºC 5-10分钟。

    实验图例:

    水性封片剂封片后显微照相效果(400倍放大)

    储存条件:室温


    Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒促销关键词:Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒,Tricine-SDS-PAGE Gel Kit,WE0279


    ·BAmp DNA Polymerase
    编号:WE0105
    英文名称:BAmp DNA Polymerase
    规格:500U
      BAmp DNA Polymerase在具有5"-3"DNA聚合酶活性的同时具有3"-5"外切酶活性,是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以高效扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其优势更加明显,所扩增的片段最长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。优化的缓冲体系使酶的应用更加广泛,即使以复杂的基因组DNA为模板,也可以保证很高的特异性和长片段的扩增。特有的PCR增强剂(C-Solution)使GC含量高,有二级结构和重复序列的复杂模板也能得到高效扩增。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于高保真度的长片段PCR扩增和复杂模板的PCR扩增,如构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。

    产品组成
    组份 500U
    BAmp DNA Polymerase, 5 U/μl 100μl
    10×PCR Buffer 1.8ml
    5×C-Solution(PCR Enhancer) 1.8ml

    注意:本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

    活性定义
    用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

    质量控制
    1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
    2、经检测无外源核酸酶活性;
    3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
    5、室温存放一个月,无明显活性改变。

    使用方法
    以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    10×PCR Buffer 5μl
    dNTP Mix,10 mM each 1μl 200μM each
    Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
    BAmp DNA Polymerase, 5 U/μl 0.5μl 2.5 U/50μl
    5×C-Solution 10μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:
    1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
    2)当利用常规条件仍然未能得到扩增时,可以加入5×C-Solution(PCR Enhancer),PCR增强剂可以使富含GC,有二级结构和重复序列的复杂模板到高效扩增,可以提高反应的特异性。但PCR增强剂也有可能使常规条件成功扩增的反应扩增失败,因此第一次使用PCR增强剂时建议设置一个不加PCR增强剂的对照。

    2、PCR反应条件
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 94℃ 2 min  
    变性 94℃ 30 s 25-35 个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 30 s
    终延伸 72℃ 5 min  


    注意:
    1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
    3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


    Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒促销关键词:Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒,Tricine-SDS-PAGE Gel Kit,WE0279

    147-85-3 L-Proline  L-脯*酸
    ARB13146 小鼠活化蛋白C(APC)酶免分析 Mouse activated protein c,apc ELISA KIT
    ARB13954 猪载脂蛋白A1(Apo-A1)酶标法分析 Porcine apoprotein a1,apo-a1 ELISA KIT
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    角鲨烷 4-Fluorobenzoic acid 111-01-3
    ARB13185 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)酶免分析 Mouse insulin-like growth factor 1,igf-1 ELISA KIT
    BTN90407 Lambda DNA Lambda DNA(λ DNA)
    乙二*(代"胺")四乙酸二**盐四水物 dIMP 29932-54-5
    BTN120511 CpG 甲基转移酶(M.SssI) CpG Methyltransferase(M.SssI)
    F050314 马IgG抗体 Horse IgG
    SJ0688 300bp
    ARB10019 人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)elisa检测说明书 Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme a synthase 1,hmgcs1 ELISA KIT
    PY02-330  FraserⅠ增菌液基础  250克  
    ARB10422 人丙*(代"酮")酸激酶(PK)酶联免疫定量检测 Human pyruvate kinase,pk ELISA KIT
    79-06-1 丙*(代"烯")酰胺 Acrylamide
    BTN121122 柱式探针纯化试剂盒 Column Probe Purification Kit
    ARB13648 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)免费代测 Rabbit glucose dependent insulin releasing polyPeptide,gip ELISA KIT
    ARB12612 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)检测服务 Rat granulocyte-macrophage colony stimulating factor,gm-csf ELISA KIT
    BTN100838 遗传霉素(G418)干粉 G418 Sulfate(Geneticin)Powder
    ARB13427 鸡弓形虫循环抗体(TCAb)elisa检测 

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