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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli DH5α Chemical Competent Cell
- 库存:
666
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 克隆与表达的品牌:百奥莱博,是优质的克隆与表达产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多大肠杆菌DH5α化学感受态细胞等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。
名称:大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 克隆与表达
规格:0.1mL*10
编号:BTN81024
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测,转化效率不低于107,适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
本菌种来源于Hoffman-Berling 1100菌种。
| 基因型 | 表现型 |
| deo R | 组成型合成脱氧核糖 |
| end A1 | 核酸内切酶I缺失 |
| gyr A96 | 具有*啶酮酸抗性 |
| hsd R17 | 限制性酶EcoK缺失 |
| △(lac)U169 | lac基因缺失 |
| rec A1 | DNA重组活性降低 |
| Rel A1 | 允许在无蛋白质合成时有RNA合成 |
| sup E44 | 抑制琥珀突变突变,为某些噬菌体必需 |
| thi-1 | 不能自身合成硫* |
| φ80(lac ZΔM15) | 提供α-互补所需的ω片断 |
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入800μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm(小于225rpm)振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
更多有关大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 克隆与表达的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·人基因组DNA混合液
编号:BTN131034
英文名称:Human Genomic DNA Mix
规格:100μg
本产品为人基因组DNA,由来源于多位匿名的捐献者的DNA混合而得到。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
·单细胞悬浮液
编号:BTN130805
英文名称:Single Cell Suspension Solution
规格:1mL
本产品是单细胞悬浮溶液,本产品与后续各种单细胞分析实验、单细胞扩增实验兼容。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
·液相RNase清除剂
编号:BTN3091
英文名称:Solution RNase Scavenger
规格:1.5mL
本品含有特殊化合物,能使溶液中可能污染的微量的RNase失活,适合于溶解RNA沉淀。同时它还能用于处理用DEPC 不能处理的含*基的溶液,如Tris、MOPS等。
产品特点:
1. 灭活溶液中RNase,60℃20分钟处理可灭1μg/mL的RNase,37℃ 20分钟处理可灭50 ng/mL RNase。
2. 不影响绝大多数后续反应,包括逆转录、RNA 合成和RT-PCR等反应3. 对RNase A,RNase 1和RNase T1 有效。
4.适合于各种缓冲液,包括不能用DEPC处理的Tris 及MOPS等缓冲液。
5. 使用简单,60℃处理10-20分钟既可,处理过的溶液随还可以再处理。处理后溶液不需高压灭菌(不同于DEPC处理)。
6. 本产品含A和B 两种成份,可以在-20℃保存一年,配成溶液后可以在-20℃保存六个月。
储存条件:4℃运输,-20℃保存,有效期为1年。
使用方法:
1. 将120mg 成份A 全部加入到1.5mL 成份B中,摇晃致全部溶解,得到20X的液相RNase 清除剂,分装成小包装放-20℃长期保存。20X液相RNase 清除剂溶液的有效期为六个月。
2. 使用时在待处理的溶液或反应液中加入1/20 体积的液相RNase 清除剂(如:100μL溶液中可加5μL液相RNase 清除剂)。
3. 如果用于溶解提取或纯化的RNA样品,需要先用超纯水将液相RNase 清除剂稀释20倍,然后直接用于溶解RNA(注意:稀释后的液相RNase 清除剂不能长期保存,只能现配现用)。
4. 60℃处理20分钟以使污染的RNase 失活。
5. 冷却至室温即可使用,或置于-20℃长期保存。
6. 对60℃处理敏感的酶(如RNA 多聚酶)应在60℃处冷却后再加入。
7.处理过的溶液随时可以再处理(60℃ 10-20分钟),以去除任何可能发生的RNase污染。
8. 如果溶液中有不能用60℃处理的样品,也可以用37℃处理20分钟,但最多只能灭活50 ng/mL的RNase 。
大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 克隆与表达关键词:E.coli DH5α Chemical Competent Cell,BTN81024,大肠杆菌DH5α化学感受态细胞
·Flemming固定液
编号:BTN140410
英文名称:Flemming Fixative Solution
规格:250mL
本产品为铬酸-锇酸-醋酸混合固定液,现配现用。该固定液对脂肪组织既有固定作用,又有染色作用,对有髓神经纤维也有固定兼染髓鞘的作用。该液不适合做HE的染色。应用该液固定的组织,切片不能太大过厚,一般1-2毫米。固定时间1-3天,后经水洗,保存于80%酒精中。可用于各种植物组织的固定。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·填入法DNA末端标记试剂盒(地高*(代"辛")标记dUTP)
编号:BTN120653C
英文名称:Fill-in DNA End Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于Klenow DNA聚合酶填平DNA片段能力的填入法标记试剂盒,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2.可用于标记5´突出的双链DNA。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 组份 | BTN120653A | BTN120653B | BTN120653C |
| 填入法标记缓冲液,5× | 50μl | 50μl | 50μl |
| Klenow DN聚合酶(1U/μL) | 5μl | 5μl | 5μl |
| dNTP(2mM) | 25μl | - | - |
| 含Biotin-dUTP的dNTP | - | 25μl | - |
| 含DIG-dUTP的dNTP | - | - | 25μl |
| 超纯水 | 1ml | 1ml | 1ml |
| 说明书 | 一份 | 一份 | 一份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 克隆与表达关键词:E.coli DH5α Chemical Competent Cell,BTN81024,大肠杆菌DH5α化学感受态细胞
ARB12071 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)酶免分析 Rat neutrophil elastase,ne ELISA KIT
PC2001 长片段PCR扩增试剂盒
HC0130 大张滤纸
ARB11205 人组织蛋白酶抗体(CAth Ab)尿液中含量检测 Human cathepsin antibodies,cath ab ELISA KIT
ARB13657 兔子髓磷脂碱性蛋白(MBP)含量测试 Rabbit myelin basic protein,mbp ELISA KIT
87-79-6 L-山梨糖 L-Sorbose
9005-64-5 Tween-20 吐温-20
ARB13600 兔子补体片断3A(C3A)免费代测 Rabbit complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
SJ0273 Ficoll 400 聚蔗糖400
BTN130613 9°Nm DNA聚合酶 9°Nm DNA Polymerase
酒石酸铵 DL-Homocysteine thiolactone hydrochloride 3164-29-2
柠檬酸* Lithium oxalate 6080-58-6
ARB12803 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)代做ELISA实验 Mouse β-glucuronidase,βgd ELISA KIT
ARB13949 猪胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)血清中含量检测 Porcine cholecystokinin,cck ELISA KIT
BL1273 *仿:异戊醇=24:1
瓜尔豆胶 Sarcosine 9000-30-0
我公司强烈推荐克隆与表达系列产品,热情期待您的咨询选购大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 克隆与表达。
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文献和实验4.操作步骤 1)大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落,接种于3~5ml LB液体培养中,37℃振荡培养12h左右,直至对数生长期。将该菌悬液以1:100~1:50转接于100ml LB液体培养基中,37℃振荡扩大培养,当培养液开始出现混浊后,每隔20~30min测一次OD600nm,至OD600nm≤0.5时停止培养;(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中,在冰上冷却20-30min,于4℃,4000r/
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