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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Magic Vector B
- 库存:
729
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")B载体多少钱,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:B载体多少钱
产地:国产|进口
英文名:Magic Vector B
品牌:百奥莱博
本产品是专门用于高效快速克隆平末端DNA片段的专用载体,它是由Sma I酶切ClionG载体后经过纯化得到的即用型线性载体。跟ClionG载体一样,本产品带有自杀基因,Sma I位点位于该基因之中,只有当外源平末端DNA 插入片段插入Sma I位点,连接后的DNA转化的细胞才能生长,所以最后得到的转化子几乎都是含有平末端DNA 插入片段的重组子。
产品特点:
1. 即用性,可以直接用于连接反应,免去繁琐的酶切,电泳检测,纯化,去磷酸化,再纯化等步骤。
2. 具有Clion-G载体的所有优点,包括零背景,适用于所有E.Coli菌株,多拷贝的colEI型复制起始位点。
3.高效率,由于自杀基因的使用有效地减除了载体自身环化对平末端DNA 克隆的影响,自身环化得到的转化子在有选择液存在时只占总转化子的1%-5%。
4. 应用广泛,可用于克隆酶切产生的平末端DNA,Pfu酶扩增的PCR片段,cDNA片段,3´和5´RACE片段,Taq酶扩增的PCR片段(部分为平末端)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
自备试剂:
1.外源DNA片段。如果含又DNA片段的反应液中不含其他载体DNA(如酶切反应液,PCR反应液),可以不需要凝胶回收,灭活酶后即可直接将反应液用于连接反应。PCR引物5´端一般为OH基团,最好在PCR后用T4 激酶磷酸化,否则连接效率极低。
2.感受态宿主菌。DH5α,DH10B或HB101等常用E.coli菌株。
3.连接反应试剂。请购买现成试剂盒。
4. 选择培养基。在倒LB 平板之前随产品赠送的选择液和Amp(如果附赠的选择液含Amp,则不必须额外加Amp)按比例加入到LB 之中,使选择液终浓度为1×,Amp 终浓度为50μg/mL(如果附赠的选择液含Amp,稀释到1X后Amp的终浓度即为50μg/mL),混匀后倒盘。
使用方法:
1.连接反应
a. 取新的经过灭菌处理的0.5mL Eppendorf 管,编号。
b. 将100 ng载体DNA转移到无菌离心管中,加两倍摩尔量的外源DNA片段,折合成重量(ng)=(外源DNA片段bp 数X 100 ng×2)/5330bp(载体DNA 长度)
c. 加蒸馏水至体积为8μl,于45℃保温5分钟,使重新退火的粘端解链。将混和物冷却至0℃。平末端DNA片段的克隆可以省去45℃保温5分钟这一步。
d. 加入10×T4 DNA ligase buffer 1μl,T4 DNA ligase 0.5μl,混匀后用微量离心机将液体全部甩到管底,于16℃保温1-24小时。
e. 同时做只有外源DNA片段没有质粒载体的组对照反应。没有必要做只有质粒载体而无外源DNA的对照组,因为自身环化的载体不能生长,能够生长的转化子基本上是两个载体分子相互连接形成的新载体。但在有两倍于外源DNA片段存在的情况下,两个载体分子连接的机率很小。
2. E.coli感受态细胞的转化
a. 各取每组连接反应液2μl按标准方法转化E. coli感受态细胞。
b. 每组连接反应转化原液取100μl用无菌玻棒均匀涂布于筛选培养基上,37℃下培养半小时以上,直至液体被完全吸收。
MCS位点:

除B载体多少钱外,我公司正在打折促销以下产品:
·柱式鼠尾DNA提取试剂盒
编号:BTN121102
英文名称:Rat tail DNA column extraction kit
规格:50次
大鼠和小鼠是重要的生命科学实验材料,鼠尾则是小鼠最佳活体样品,常用于基因型的快速检测。本试剂盒采用独特的酶和缓冲体系,可以快速得高质量、高纯度的基因组DNA。
产品特点:
1. 即开即用,不需要自己准备各种溶液。
2. 简单快速,最快可在60分钟内从0.5 鼠尾中提取到10μg DNA。
3. 柱式法回收,所得DNA 纯度高(OD260/280一般在1.7-1.9)。片段大(一般在20 kb以上)、纯度高。
4. 安全环保:无需有机试剂抽提。
5.可用于后续的酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等实验。
6. 除鼠尾外,还可用于其他动物组织(心,肝、肾、脾和肌肉等)。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 蛋白酶K溶液(10mg/mL) | 1ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱(15层膜) | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 剪取0.5-1cm鼠尾(约15-30mg),尽量剪短成的1mm左右小段,放入干净的1.5mL塑料离心管中。若不需要立即使用,可以在液氮中或-80℃长期放置,或-80℃放置数天。如果是动物心,肝、肾、脾和肌肉等组织,则取30mg左右并充分剪碎。
2. 加入1mL溶液A和20μl蛋白酶K溶液(10mg/mL),37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。也可以放置于65℃金属浴或水浴中保温2小时,其间每间隔10分钟涡旋混匀一次(或用手指用力弹击离心管底部数次)以帮助鼠尾酶解。对于老年小鼠鼠尾,可以适当增加酶解时间到3-4小时。如果有温控混合器使反应体系始终处于摇晃状态,则效果更佳。
3. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿,振荡器上振荡30秒充分混匀。
4. 12000rpm室温离心3分钟,小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C,上下颠倒30秒充分混匀。
6. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000rpm室温1分钟,弃穿透液。再把剩余的一半上柱,重复此操作。
7. 将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
9. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50μl DNA 洗脱液2.0。
11. 12000rpm离心1分钟,管底即为DNA溶液,可立即用于PCR,也可长期保存在-20℃。
B载体多少钱关键词:Magic Vector B,B载体,BTN51104
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*芴酮 TPPTS 975-17-7
盐*(代"酸")柔红霉素 CPA-mN 23541-50-6
*甲酰胺 HMB 55-21-0
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71-44-3 Spermine 精胺
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B载体多少钱关键词:Magic Vector B,B载体,BTN51104
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