一步式RT-PCR Mix 核酸扩增(PCR)

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一步式RT-PCR Mix 核酸扩增(PCR)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多一步式RT-PCR Mix等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：一步式RT-PCR Mix 核酸扩增(PCR)
品牌：百奥莱博
英文名：One-Step RT-PCR Mix
规格：1mL
编号：BTN130609
产地：国产|进口
本产品是基于Tth DNA聚合酶的单酶一管式RT-PCR试剂盒。Tth DNA聚合酶通过其逆转录酶活性合成cDNA，再通过其DNA聚合酶活性进行PCR扩增。它跟常规MMLV和AMV的最大区别是逆转录过程可以在高温进行，能有效打开RNA的二级结构，其示意图如下：

同时操作简单一步完成，其操作流程图如下：


产品特点：
1.中途添加试剂，省去反复打开和关闭反应管盖的麻烦，便于同时处理多个检测样品。
2.样品之间的交叉感染和纵向感染的危险性比较低，可以避免假阳性。
3. 改良了酶的品质，实现了优良的检测敏感度。
4. 即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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·dNTP溶液(10mM)
编号：BTN51208B
英文名称：dNTP Solution，10mM
规格：0.5mL
本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液，每种核苷酸的浓度为10mM，纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定，请参考相关手册。



储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

DNA为何使用2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶？
 DNA为何不选择现成的光合作用产物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分别作为其糖分子和碱基，而去选择需要额外的合成步骤才能得到的2"-脱氧核糖和胸腺嘧啶(thymine)，其原因何在呢？目前的主流观点是：DNA不能选择核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基团会使得到的双螺旋骨架结构不均匀、不平行，难以有效地折叠进染色体结构中，而使用2"-脱氧核糖则能得到均匀平行的双螺旋结构；原因之二是核糖2"位置上的OH基团会对邻近的磷酸二酯键进行分子内亲核攻击，降低分子的稳定性，而对遗传物质来说稳定性十分重要，所以DNA选择了失去分子内亲核攻击能力的2"-脱氧核糖。对信使分子而言，稳定性并不重要，所以RNA仍然使用核糖。
 DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)会缓慢水解变成尿嘧啶，如果尿嘧啶也是DNA的正常组成成份，则DNA修复系统就不能区分哪些尿嘧啶是正常的，哪些是需要修复的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一个甲基)不但能保持跟尿嘧啶一样的形成碱基对的能力，同时又能跟尿嘧啶区别开来，使DNA分子中出现的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)发现和修复。


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ARB11866 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)检测服务 Human glycogen phosphorylase mm,gp-mm ELISA KIT
BOC-L-谷*酸5苄脂 Aniline blue water soluble 13574-13-5
ARB12579 大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)elisa检测 Rat factor-related apoptosis,fas ELISA KIT
铜检测试剂盒(Cuprizone微板法)   100T
吡硫鎓* Elastase 3811-73-2
ARB11794 人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)Elisa方法检测 Human basic fibroblast growth factor 9,bfgf-9 ELISA KIT
PY04-093  头孢菌素*  3.2mg/支×10支  每支添加于100ml 改良CCDA琼脂培养基基础中，用于弯曲杆菌的选择性分离培养
色苷酸* BOC-ON 15826-37-6
姜黄素 Fibronectin 458-37-7
SJ0328 GMP Na2  5"-单磷酸鸟苷二*盐水合物
F040108 鸡卵清蛋白偶联莱克多巴胺 OVA-RAC
ARB12661 大鼠酸性成纤维细胞生长因子1(AFGF-1)ELISA检测服务 Rat acidic fibroblast growth factor 1,afgf-1 ELISA KIT
ARB13236 小鼠蛋白激酶B(PKB)elisa测定使用说明书 Mouse protein kinase b,pkb ELISA KIT
ARB10586 人自噬基因BeclIn 1(BECN1)ELISA代测服务 Human beclin 1,becn1,ELISA KIT
BTN130544 AEBSF溶液 AEBSF Solution
ARB10977 人免疫球蛋白j链(Ig-j)Elisa方法检测 Human immunoglubin joining chain,ig-j ELISA KIT
ARB12499 大鼠神经营养因子3(NT-3)elisa检测操作说明书 Rat neurotrophin 3,nt-3 ELISA KIT
SJ0842 胎牛血清(澳洲血源)
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·藻类RNA柱式提取试剂盒
编号：BTN120503
英文名称：Algae RNA Column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于各种藻类样品RNA提取的产品。

试剂盒特点：
1. 操作简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
2. RNA纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. RNA产量高，一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法，适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
溶液D	30ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将1-5mL液体藻类培养物在1.5mL塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心 1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.5mL溶液A并充分吹打混匀。注意：溶液A存放时容易产生沉淀，如果有沉淀，用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入0.5mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意：不要超过5分钟，否则RNA容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的1.5mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入0.2mL自备的*仿，充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3～5分钟，转移上清液到一自备的、干净的5-10mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约1mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D，充分混匀。如果上清为1mL，则加入3mL溶液C和1mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次转移0.7mL混合液到离心吸附柱中，室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合，然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒，弃收集管中的穿透液，然后再加入0.7mL混合液，重复上面的操作，直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤：将0.7mL通用洗柱液加到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤：一次洗涤一般足够去除杂质，但如果样品OD260/280比值不高，可以再用0.3mL通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中，加入30-100μL RNA洗脱液。具体加多少根据RNA浓度决定，建议先使用小体积洗脱液，这样浓度过高还可以稀释。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测：
 注意：普通DNA上样液不含变性剂，更没经过去RNase处理，所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定：
 将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE(pH7.5-8.2之间)中测得的低10%-15%；也不要稀释过度，使OD读数在仪器的有效范围之外，这样得到的OD比值没有意义。

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