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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年
- 保质期:
长期
- 英文名:
Instant Realtime RT-PCR Kit
- 库存:
821
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京即用型荧光定量RT-PCR试剂盒报价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:即用型荧光定量RT-PCR试剂盒
品牌:百奥莱博
编号:BTN101219
英文名:Instant Realtime RT-PCR Kit
产地:国产|进口
本产品是基于荧光染料检测的即用型双酶一管式RT-PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有一管式实时定量RT-PCR所需要的成分,用户只需加入RNA模板和引物即可进行实时定量RT-PCR反应,具有广泛的用途。
产品特点:
1.一管式完成qRT-PCR反应,避免样品交叉污染,尤其适合临床应用。
2. 即开即用,用户不需要单独准备qRT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix),将加样步骤减少到最低,极大降低了加样误差,增加了可重复性。
4. 使用范围广,适用于从病毒RNA到人RNA的各种RNA模板。
5.高灵敏度,每个RT-PCR体系最低可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 双酶一管式qRT-PCR Buffer,2× | 750μl |
| MMLV-Taq Mix | 100μl |
| RNase-free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分(下面只列出样品管的设置情况,用户可自己根据需要设置阳性和阴性对照):
| 成分 | 样品 |
| 自备RNA模板(分下面三种情况) | 见下 |
| 总RNA | 100-500ng |
| 或poly(A)mRNA | 10-500ng |
| 或体外转录得到的专一RNA | 0.01pg-500ng |
| RNA特异性引物一(自备) | 终浓度300nM(注1) |
| RNA特异性引物二(自备) | 终浓度300nM |
| RNase-free水 | 补到10μL |
| 双酶一管式qRT-PCR Buffer(2×) | 15μl |
| 自备ROX(某些荧光PCR机型需要) | 3μL(注2) |
| MMLV-Taq Mix | 2μl |
注1:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM范围内调整引物浓度。引物、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减RNase-free水用量,保证总反应体积不变即可。
注2:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每30μl反应体系中加3μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每30μL反应体系加0.3μL 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入3μL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行荧光定量RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃ 30分钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm值和PCR产物长度由用户自行决定注)、最后72℃ 5分钟。并在退火或延长步骤中记录荧光信号。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,最大吸收光谱在471nm,结合DNA时的最大吸收光谱在500nm,最大发射光谱在530nm。
关键词:Instant Realtime RT-PCR Kit,BTN101219,即用型荧光定量RT-PCR试剂盒
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| 编号 | 名称 |
| BTN80803 | 柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级) |
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| BTN70303 | 绿如蓝核酸染料(UV) |
| BTN100405 | 20×SSC溶液 |
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| BTN160686-25A | SuperTOPO-Amp TA克隆试剂盒 |
| BTN60402 | 超快非醇核酸沉淀剂 |
| BTN140383 | 农杆菌EHA105化学感受态细胞 |
| BTN131197 | 96孔板病毒DNA提取试剂盒(真空法) |
| BTN131096 | 生物素化的碱性磷酸酶 |
| BTN131247 | 4%多聚甲醛(RNA专用) |
| BTN131227 | 10nt随机引物(0.5μg/uL) |
| BTN131180 | 通用酶缓冲液 |
| BTN140390 | 酿酒酵母Y2HGold化学感受态细胞 |
| BTN160906 | 植物RNA提取试剂盒(无酚无*仿柱式提取) |
| BTN160680 | 无缝克隆试剂盒 |
| BTN80205 | DMSO,PCR级 |
| BTN131006 | 强RIPA裂解液 |
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| BTN130661 | RecA蛋白 |
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| BTN130616 | Bsu DNA聚合酶,大片段 |
| BTN90313 | TBE电泳液,10× |
| BTN100908A | 一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD) |
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| BTN100838 | 遗传霉素(G418)干粉 |
| BTN70908 | PAGE胶DNA回收试剂盒 |
| BTN101104 | 3´RACE试剂盒 |
| BTN130857 | T4 RNA连接酶2(截短型K227Q) |
| BTN131103 | 生物素化山羊抗亲和素 |
| BTN120696 | 土霉素盐*(代"酸")盐溶液 |
| BTN81027 | TRIzol试剂伴侣 |
| BTN60403 | 红细胞裂解液A型(核酸纯化) |
| BTN100604 | 鲑鱼精DNA溶液 |
| BTN131033 | 小鼠基因组DNA |
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文献和实验actin,山东大学提供样品基因。cDNA制备:测定小鼠肝脏总RNA浓度后,使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。一步法荧光定量PCR:Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit20μl反应体系包括:10μl 2×One-step SYBR premixture,7.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl Primer R,1μl cDNA,1μl One-step
gene99 美国KAPA的 一步法的RT-PCR试剂盒说明书见附件!或者是染料法 探针法的荧光定量试剂盒。不知道您具体是需要什么 可以加我Q:512580331 把说明书及我这边做的对比实验的图发给你。 qisanni05 十分感谢!我的QQ号:546483973,能不能麻烦您把您的说明书及您做的对比试验结果发我QQ邮箱里,谢谢! king19890405 我也想知道啊,感谢回答 本文由丁香
怎么整板都没有扩增曲线,是哪一步实验出问题了吗? 这个病原体这段时间怎么经常检出?不会是有污染了吧? 在您看到荧光定量 PCR 结果的时候是否也有过这样的疑问?隐隐约约感觉实验某个步骤出现问题,却又不知该从何下手。别担心,有「对照精灵」们来助您一臂之力。 荧光定量 PCR 实验,从样本采集到结果分析包含多个实验步骤,针对不同的步骤,可以选择不同的对照对流程进行监控(图 1)。 图 1. 实验流程和常见阴阳性对照种类。 阴性对照 荧光定量 PCR 的灵敏度可以达到 1 拷贝/孔,如此高灵敏
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