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冷藏
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长期
- 英文名:
SABC(Mouse/Rabbit IgG)-POD Kit
- 库存:
358
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)报价,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:SABC(Mouse/Rabbit IgG)-POD Kit
编号:QN1223
本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔IgG的免疫组化实验,DAB显色。
试剂盒组份:
封闭液(5% BSA)——————————10ml
3% H2O2-—————————————10ml
Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液—————200ul
SABC-POD浓缩液——————————100ul
稀释液——————————————30ml
20×DAB显色液A——————————1ml
20×DAB显色液B——————————1ml
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
操作步骤:(以石蜡切片为例)
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*,三次乙醇)。
2. 3% H2O2室温处理5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3. 可选步聚:
a、热修复抗原,将切片浸入0.01M柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾 后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟,PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步,直接进入下一步。
4. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
5. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
6. 根据用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液按1:50-100稀释成工作液(1ml稀释液加入10-20ul Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液,20-37℃ 孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。
7. 根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液混匀,此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。
8. DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1ml PBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色,镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9. 苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞爬片,固定后,PBS漂洗两次,再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟,PBS漂洗两次,3% H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,接上述第4步。
对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,接上述第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
关键词:SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色),QN1223,SABC(Mouse/Rabbit IgG)-POD Kit
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| 编号 | 名称 |
| QN0867 | 反-对香豆酸 |
| QN0043 | *唑西林* |
| QN0719 | 肝素* |
| QN0886 | 通用基因组DNA提取试剂盒 |
| QN0893 | 全血基因组DNA提取试剂盒(吸附柱法) |
| QN0415 | 单宁酶 |
| QN0085 | *啶酮酸 |
| QN0368 | 荧光素酶 |
| QN0327 | 胶原蛋白Ⅰ型(可溶) |
| QN0539 | 尿苷-5"-三磷酸三*盐 |
| QN0224 | 他莫昔芬 |
| QN0172 | 糖元Ⅱ(糖原Ⅱ) |
| QN0452 | 乙酰辅酶A |
| QN0111 | 维生素B12(钴胺素) |
| QN0416 | 辅酶Q10 |
| QN0626 | 二水*化* |
| QN0776 | 1-丁基-3-甲基咪唑四*硼*(代"酸")盐 |
| QN0328 | 胶原蛋白Ⅰ型 |
| QN0164 | 甲基纤维素 |
| QN0471 | 果胶酶 |
| QN0589 | 丙*(代"烯")酸 |
| QN1267 | PBS缓冲液干粉 |
| QN0364 | L-天门冬*酸 |
| QN0690 | 丹磺酰* |
| QN0916 | RNA提取酚试剂 |
| QN0784 | 2-丁烯-1-醇 |
| QN0155 | D-山梨醇 |
| QN1276 | 非变性蛋白预制胶(12%) |
| QN0163 | D-甘露醇 |
| QN0712 | 聚乙二醇 PEG 4000 |
| QN1018 | 5×TBE 缓冲液 |
| QN1079 | 核蛋白提取试剂盒 |
| QN0546 | 利波腺苷 |
| QN0635 | 莽草酸 |
| QN0188 | 硫*(代"酸")葡聚糖 |
| QN0038 | 盐*(代"酸")克林霉素 |
| QN0668 | 羟基乙酸 |
| QN0849 | 2,3-二甲基*甲醛 |
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yfsm 最近想买TUNNEL凋亡试剂盒,代理商分别给我推荐了Roche和Promega公司,以前没做过心理没辙,想请各位专家帮忙分析一下,非常感谢! xiaoluks 我想做TNNEL,罗氏的给你报价多少钱啊,楼主想买哪个货号的,如果好的话我也买一样的,呵呵,我也是没做过的,不过当时师姐有用DAB显色法做的,是用的罗氏的试剂盒,质量挺好的,不过我想用荧光的,楼主有什么意见? woxingwosu
把肝脏或睾丸片子从 4 ℃ 过夜拿出后,直接用 PBS 洗没发生过脱片现象。事实胜于雄辩。 七、DAB 显色时间如何把握? 1、DAB 显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现浅棕色本底时即可冲洗。 2、DAB 显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短抗体孵育时间。 3、若很短时间就出现背景很深,还有可能是你前面的封闭非特异性蛋白不全,需要延长封闭时间。 4、DAB 显色时间很长(如超过十几
差异,且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。 4.种属来源,一般兔来源的多是多克隆;而小鼠来源的多是单克隆,但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。 5.生产厂家的选择。如 santa Cruz 公司抗体一般 1 ml,价格 2100 元左右;而 chemicon 公司一抗一般 100 μl,价格 2800 元左右。这两个厂家的同一种抗体,它的实际效价稳定是不同的,我一般用后者抗体做免疫组化效果较好,而前者做 WB 效果还可以。 三、在什么情况下使用 Triton-X100? 1.Triton X
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