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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存(避光)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Premixed BCIP/NBT Solution
- 库存:
699
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京预混型BCIP/NBT溶液厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京预混型BCIP/NBT溶液厂家
品牌:百奥莱博
英文名:Premixed BCIP/NBT Solution
规格:250mL
本产品是在BCIP/NBT底物显色试剂盒(BTN81224)的基础改良而得的升级产品。
产品特点:
1.含有BCIP和NBT 两种成分的混合液,不需混合和稀释,直接使用,十分方便。
2.在碱性磷酸酶存在时形成暗紫色沉淀,具有和其他AP底物(包括分开提供的BCIP/NBT溶液)一样的灵敏度。
3.稳定,使用精心优化的溶剂,在低温条件下可以保存一年。
4.可用于Western Blot。
储存条件:常温运输和保存(避光),有效期一年。
自备试剂:Western印迹膜洗膜液(BTN81211)或TBST缓冲液。
使用方法:
1.按常规方法进行Western 印迹膜杂交,直到跟二抗-AP 复合物保温这步结束。
2.用Western 印迹膜洗膜液洗印迹膜5次,每次至少1分钟。注意:可以用TBST缓冲液代替Western 印迹膜洗膜液。
3.用水迅速冲洗一次。
4.将印迹膜转移到本产品中(每cm2印迹膜需要0.1mL本产品),室温平缓摇晃5-30分钟显色。37℃可加速反应。
5.细心观察蛋白条带的颜色变化,显色到满意程度后(一般需要20分钟,具体跟蛋白浓度密切相关)迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃,终止显色反应。数分钟后需要换水,共三次。
6.用吸水纸吸干膜上的水分,照相或扫描处理后避光干燥保存印迹膜。
更多有关北京预混型BCIP/NBT溶液厂家的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·动物RNA提取试剂盒(柱式提取)(无需*仿)
编号:BTN160905
英文名称:Animal RNA column extraction kit(chloroform-free)
规格:50次
本试剂盒是在本公司柱式动物总RNA快速提取试剂盒基础上升级的免*仿产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 免去*仿抽提步骤,操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. 不使用有毒的*仿,健康环保。
3. RNA纯度很高,OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 所得RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
7. 性价比高于进口的柱式RNA
试剂盒组成:
| 组分 | 编号 | 规格 |
| 溶液A | BTN71201A | 50mL |
| 溶液B | BTN71201B | 25mL |
| 离心吸附柱 | BTN90303 | 50套 |
| 通用洗柱液 | BTN60408 | 50mL |
| RNA洗脱液 | BTN71207 | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但溶液A需要4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。
1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,12000rpm室温离心3~5分钟。
3. 将上清液(残留沉淀为每裂解的细胞和组织)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
4. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
5. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
6. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加0.3mL通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
9.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free收集管中,加入50-100μL RNA洗脱液。
11.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA最好用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA专用上样液RNAload(操作详见RNAload使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
13. RNA完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如百奥莱博的RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
北京预混型BCIP/NBT溶液厂家关键词:BTN100214,预混型BCIP/NBT溶液,Premixed BCIP/NBT Solution
·50mL亲和层析柱
编号:BTN140653
英文名称:Affinity Chromatography Colum(50mL)
规格:50mL
本产品适用范围广泛,可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子;还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法,其示意图如下:
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
常用亲和标签及纯化方案:
北京预混型BCIP/NBT溶液厂家关键词:BTN100214,预混型BCIP/NBT溶液,Premixed BCIP/NBT Solution
NF-224 抗人a1AT血清
BL0912 FITC标记OVA抗体
ARB13552 兔子γ干扰素(IFN-γ)Elisa方法检测 Rabbit interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
ARB11552 人恙虫病抗体IgG(STA-IgG)含量检测
甲*(代"酚")红 CAMP 1733-12-6
ARB10492 人白介素5(IL-5)elisa测定使用说明书 Human interleukin 5,IL-5 ELISA KIT
ARB12492 大鼠活化蛋白C(APC)酶免分析 Rat activated protein c,apc ELISA KIT
L-胱*酸 Indoxyl acetate 56-89-3
137-08-6 (Vitamin B5) D-Pantothenic acid D-泛酸*
PY01-031 可溶性淀粉 AR|BR 500克
ARB13400 羊住肉孢子虫(SArcocystIs)Elisa方法检测
NF-216 羊抗人FN血清
维生素B5 Anthraquinone 137-08-6
PY02-390 志贺氏菌增菌肉汤基础培养基 250克
ARB10548 human皮质醇(CortIsol)含量分析 Human cortisol ELISA KIT
ARB12766 小鼠NA-K-ATP酶检测服务 Mouse na-k-atp ELISA KIT
维生素D3 Naphthol AS-TR acetate 67-97-0
ARB11136 人肽聚糖识别蛋白(PGRP-S)酶标法分析 Human pgrp-s ELISA kit
146-68-9 INT 碘硝基*化四氮唑蓝
BTN100539 胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液 Chymostatin Solution
F050319 豚鼠IgG抗体 Guinea Pig IgG
69-89-6 Xanthione 黄嘌呤
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文献和实验和蒸汽,现已有可代替的核酸燃料 Goldview 等,建议实验室取缔。含此物质的废液处理请参考相关书籍。 ● 十二烷基硫酸钠(SDS):有毒,是一种刺激物,并造成对眼睛的严重损伤的危险。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。 ● X‐半乳糖(X‐gal):对眼睛和皮肤有毒性。应注意,X‐gal 溶液以 DMF 为溶剂,该物质刺激眼睛、皮肤和黏膜。慢性吸入可导致肝、肾损害。应在通风橱内操作。 ● TEMED:强神经毒性,防止
, 5mmol/L MgCL2 BCIP溶液/NBT溶液: 50mg/ml BCIP溶于100%二甲基甲酰胺 50mg/ml BCIP溶于70%二甲基甲酰胺 ⑤ 其他试剂 A. 考马斯亮蓝染液,1L 考马斯亮蓝R-250 1.0g、甲醇 450ml、冰醋酸 100ml B. 考马斯亮蓝脱色液 甲醇 100ml、冰醋酸 100ml、蒸馏水800ml 二、方法 1.Bio-Rad微型凝胶电泳模具的安装 带上手套将凝胶
(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。 5、NBT显色液 试剂A液:5%NBT:称 取0.5gNBT溶于10ml 70%的DMF(二甲基甲胺)内,充分混合,常存于4℃,也可装成小份,-20℃保存,用前复温。 B液:5% BCIP:称取BCIp
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