莽草酸厂家

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莽草酸厂家
规格：1g
产地：国产|进口
编号：QN0635
品牌：百奥莱博
莽草酸是白色精细粉末,易溶于水，在水中的溶解度为18g/100ml，难溶于*仿、*和石油醚。熔点185℃～191℃ ，旋光度-180°，气味辛酸。用途：生化研究，是一种抗肿瘤药物，同时也是二恶霉素、乙二醛酶抑制剂等抗肿瘤药物的合成原料。

别名：3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-甲*(代"酸")，蟒草酸
英文名称：Shikimic acid
CAS号：138-59-0
分子式：C7H10O5
分子量：174.15
储存条件：-20℃
纯度：≥98%

莽草酸厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·蛋白酶K
编号：QN0469
英文名称：Proteinase K
规格：100mg|100mg*10
本品是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝*酸蛋白酶，来源于白色念球菌，具有很高的比活性，常用于mRNA和DNA与蛋白质的分离。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活，反而增强和稳定酶活性，并在较广的PH范围内(PH4-12.5)均有活性。在组织或细胞核酸分离时，使核酸酶(RNA和DNA)以及反应中其他酶失活。

CAS号：39450-01-6
分子量：28.9 kDa
储存条件：－20℃，避免反复冻融，有效期12月。
活力：40mAnsom u/mg
性状：粉末
来源：白色念球菌
失活：95℃加热10分钟，则完全失活
活性pH范围：pH4～12.5
工作浓度：50～100μg/ml
推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是，如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白，如角蛋白一类，则可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2+。

蛋白酶K，是一种切割活性较广的丝*酸蛋白酶。它切割脂族*基酸和芳香族*基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，因而它应用很广泛，包括制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。

可替代DEPC处理RNA抽提用的离心管和头，实现灭活RNase A的目的，也用于处理RNase-Free的水。充分降解组织或细胞中蛋白质分子特别是核酸，以达到释放和萃取高质量核酸的辅助试剂。用于质粒或基因组DNA、RNA的分离以及蛋白多肽印迹实验。

值得注意的是，蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果.孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。

蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K)：将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。


莽草酸厂家关键词：莽草酸,138-59-0,3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-甲*(代"酸")，蟒草酸
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·CCK-8试剂盒
编号：QN1293
英文名称：Cell counting KIT-8
规格：100T|500T|500T*10
本试剂盒为MTT法的替代方法，是一种基于WST(水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。

使用说明：
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁，然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD 值，制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴)，OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)

二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃，5% CO2的条件下)。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如：6、12、24或48小时)。
3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基)，去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

活力计算：.
细胞活力(％)=[A(加药)－A(空白)]／[ A(0加药)－A(空白)]×100
A(加药)：具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白)：具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0 加药)：具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力

注意事项：
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片，但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

储存条件：4℃，有效期一年


莽草酸厂家关键词：莽草酸,138-59-0,3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-甲*(代"酸")，蟒草酸
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