北京现货5×非变性非还原蛋白上样缓冲液特价优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京现货5×非变性非还原蛋白上样缓冲液特价优惠在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京现货5×非变性非还原蛋白上样缓冲液特价优惠
规格：2ml
编号：SY0351
本品用于常规的非变性非还原性聚丙*(代"烯")酰胺（PAGE）蛋白样品的上样。5×非变性非还原蛋白上样缓冲液(Native Gel Sample Loading Buffer)是一种经过改良的以*酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。产品中不含SDS等变性试剂，也不含DTT、β-巯基乙醇等还原性试剂。

操作方法
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×非变性非还原蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4 μl蛋白样品加入1 μl 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和5×非变性非还原蛋白上样缓冲液。
3.直接上样到PAGE胶加样孔内即可。
4.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·c-Jun-GFP报告基因质粒
编号：SY0183
英文名称：c-Jun GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
c-Jun-GFP报告基因是用于检测c-Jun转录活性水平为目的的报告基因。c-Jun参与机体内的多种生物学功能包括细胞增殖和凋亡等，同时c-Jun还参与了多种细胞因子的信号转导途径。

c-Jun-GFP报告基因主要用于检测细胞中c-Jun的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMc-Jun-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个c-Jun结合位点，可以高效地检测c-Jun的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得c-Jun-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM c-Jun -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMC-JUN-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·腔肠素h
编号：SY0235
英文名称：Coelenterazine h
规格：1×500μg
本品为粉末形式供应的腔肠素h（Coelenterazine h），是海肾荧光素酶（Rluc）和Gaussia荧光素酶（Gluc）等多种荧光素酶的作用底物，其发光强度比天然腔肠素高10倍以上，适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子，可用于检测活细胞中*离子浓度。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，
1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：2,8-Dibenzyl-6-(p-hydroxyphenyl)-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one; 2-Deoxycoelenterazine; CLZN-h; h-CTZ
CAS：50909-86-9
分子式：C26H21N3O2
分子量：407.48 g/mol
熔点：142℃±2℃(dec)
UV：l max: 433 nm ± 2 nm
外观：浅黄色至橘色粉末
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不可溶于DMSO
纯度：＞99%（TLC）
结构：


运输和保存方法：冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存，最好保存在惰性气体下以避免接触空气。

注意事项

1）腔肠素h粉末或者储存液最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成腔肠素h氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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N-乙酰-L-酪*酸 HCTU 537-55-3
BTN110801 核酸浓缩剂 Nucleic Acid Concentration Solution
E0613 抗凝裂解驴血(无菌) 100ml/500ml
冈田酸*盐 CIAP 209266-80-8
干酪素* Sodium citrate dihydrate 9005-46-3
ARB12583 大鼠烟*(代"碱")型乙酰胆碱受体(N-AChR)ELISA代测服务 Rat nicotinic acetylcholine receptor,n-achr ELISA KIT
虾青素 Fluconazole 472-61-7
BL1090 新生牛血清
BTN131134 Percoll Percoll
BL1208 鞭毛染色液(试剂盒)
98-92-0 Nicotinamide  烟酰胺(维生素pp)
SJ0329 GTP xNa   5"-三磷酸鸟苷*盐
PY02-154  *甲*(代"酚")紫葡萄糖蛋白胨水培养基  250克  
BL0959 胶体金标记兔抗猪IgG抗体
BL0920 RBITC标记兔抗人IgM抗体
孕酮 Isovanillic acid 57-83-0
Con A琼脂糖凝胶4B Vitamin E acetate
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·Stbl2 化学感受态细胞
编号：SY0019
英文名称：Stbl2 Chemically Competent Cell
规格：100μl×10管
Stbl2是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，适合于多种插入片段的化学转化。本品使用pUC19质粒检测，转化效率可达109cfu/μg。

具有以下特点：
① 更适于不稳定插入片段（正向重复序列，逆转录病毒序列等）的克隆；
② 更适于克隆慢病毒载体、甲基化的基因组序列；
③ 利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取；
④ 不存在lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。

本品基因型：F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB) 。

注意事项

1）感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2）整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3）为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。
4）为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，最低化实验可能遇到的风险。

使用方法
1）取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
【注】：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用，应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
2）向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置25min。
3）置于42℃水浴中热激45 s，然后快速将管转移到冰浴中，冷却2-3min，该过程不要摇动离心管，否则会降低转化效率。
4）向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于30℃摇床振荡培养90min（225rpm），目的是促使菌体复苏。
【注】：当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化Control pUC19 计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60min。
5）将上述复苏的菌液于5000rpm离心1min，留取100μl左右上清轻轻混匀菌液并涂布到含相应抗生素的SOC培养基上。
6）将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。
【注】：若转化control pUC19 计算转化效率，则需37℃培养过夜。

储存条件：-80℃

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