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细胞增殖示踪荧光探针现货

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  • ¥100 - 1750
  • 百奥莱博
  • 北京
  • SY0510-MXU
  • 2025年07月11日
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      -20℃干燥避光

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      长期

    • 英文名

      CFDA, SE

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      774

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括细胞增殖示踪荧光探针现货在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:细胞增殖示踪荧光探针现货
    规格:25mg
    品牌:百奥莱博
    编号:SY0510
    产地:国产|进口
    CFDA, SE,英文全称Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。

    CFDA, SE是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)的衍生物,具细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的*基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。

    CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。CFSA,SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。

    CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。本品以粉末形式提供,需用DMSO制备储存液后再使用。

    注意事项
    1)不同的细胞其细胞内酯酶活性不同,因此染色效果具有差异性。
    2)荧光染料均存在淬灭问题,染色过程需尽量避光。
    3)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

    CAS:150347-59-4
    分子量:557.46
    分子式:C29H19NO11
    纯度:≥95%(HPLC)
    储存条件:-20℃干燥避光,避免反复冻融,有效期一年
    结构式
    产品细节图片1

    关于细胞增殖示踪荧光探针现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:

    ·CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂
    编号:SY0485
    规格:100μl
    本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-1(货号SY0488)或者JC-10(货号SY0490)来进行相关研究。

    CCCP,即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,一种质子载体(H+ ionophore),是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。

    CCCP还具有其他功能:
    1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放;
    2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性;
    3)对细胞内*水平的各种调节效应;
    4)抑制脂肝酶的分泌;
    5)部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。

    英文别名:Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone; m-Cl-CCP; Mesoxalonitrile 3-chlorophenylhydrazone;(3-Chlorophenyl)hydrazonomalononitrile
    CAS:555-60-2
    分子式:C9H5ClN4
    分子量:204.62
    纯度:≥97% (TLC)
    储存条件:-20℃,有效期12个月
    结构式
    产品细节图片2

    ·阿利辛蓝-过碘酸雪夫染色试剂盒
    编号:SY0596
    英文名称:AB-PAS Stain Kit
    规格:20ml×4
    糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,高碘酸-雪夫技术是McManus在1946年最先使用的,常用来显示糖原和其他多糖,而且还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。阿利新蓝和PAS技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性粘液和酸性粘液。

    阿利新蓝(又称阿尔辛蓝、爱先蓝),是类铜钛花青染料,这种阳离子染料与酸性基团结合,即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫*(代"酸")根形成不溶性复合物,可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。PAS技术可将中性粘液染成红色,由于阿利新蓝与雪夫试剂结合并发生反应,又将既含中性粘液又含酸性粘液的组织和细胞染成深浅不同的紫色。最终,实验结果中酸性粘液物质呈蓝色,中性粘液物质呈红色,混合粘液物质呈紫红色,细胞核呈浅蓝色。

    产品组份:
    阿利新蓝染液(蓝色液体)————20 ml
    高碘酸溶液(无色液体)—————20 ml
    雪夫试剂(淡红色液体)—————20 ml
    苏木素(紫红色液体)——————20 ml

    注意事项
    1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    2)试剂盒临用前前半小时取出恢复室温,用后应放回冰箱保存。
    3)雪夫试剂染色时间不宜过长,一般组织变色后即可。
    4)苏木素复染细胞核时应淡染,这样与阿利新蓝容易区别,也可以选择不染。

    储存条件:室温,有效期36个月


    细胞增殖示踪荧光探针现货关键词:CFDA, SE,细胞增殖示踪荧光探针,150347-59-4


    ·JC-1线粒体膜电位检测试剂盒
    编号:SY0489
    英文名称:JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
    规格:100 tests
    JC-1线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit)是一种以JC-1 为荧光探针,快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒,可以用于早期的细胞凋亡检测,也是用来检测细胞早期凋亡的常用方法。

    JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm 的理想荧光探针,JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时,只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

    线粒体膜电势的破坏是细胞凋亡早期发生的一个标志性事件。细胞受到凋亡诱导后线粒体膜电位的变化使得膜的通透性发生改变。膜通透性的增加,使得线粒体蛋白包括细胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸内切酶G(EndoG)、凋亡诱导因子(AIF)等从线粒体基质释放到细胞浆。细胞色素C的释放伴随膜电位的完全丧失,进而引发细胞凋亡酶的级联效应。

    本试剂盒提供了CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品,本试剂盒共可以检测100 个样品;对于12 孔中的样品,本试剂盒共可以检测200 个样品。

    试剂盒组份:

     
    组分 规格 保存方法
    JC-1(200×) 5× 100 μl/管 -20℃避光
    JC-1染色缓冲液(5×) 80 ml -20℃避光,也可4℃保存
    CCCP(50 mM) 20 μl -20℃避光
    超纯水 90 ml 4℃保存


    储存条件:20℃避光,尽量避免反复冻融,有效期一年

    注意事项

    1)JC-1(200×)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20~25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
    2)必须先把JC-1(200×)用试剂盒提供的超纯水充分溶解混匀后,才可以加入JC-1染色缓冲液(5×)。不可先配制JC-1染色缓冲液(1×)再加入JC-1(200×),这样JC-1会很难充分溶解,会严重影响后续的检测。
    3)装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液(1×)洗涤时,使JC-1染色缓冲液(1×)保持4℃左右,此时的洗涤效果较好。
    4)JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
    5)请勿把JC-1染色缓冲液(5×)全部配制成JC-1染色缓冲液(1×),本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液(5×)。
    6)如果发现JC-1染色缓冲液(5×)中有沉淀,必须全部溶解后才能使用,为促进溶解可以在37℃加热。
    7)CCCP为线粒体电子传递链抑制剂,有毒,请注意小心防护。


    细胞增殖示踪荧光探针现货关键词:CFDA, SE,细胞增殖示踪荧光探针,150347-59-4


    ·牛髓磷脂碱性蛋白
    编号:SY0449
    英文名称:Bovine Myelin Basic Protein(MBP)
    规格:1mg
    本品是从牛脑中提取的天然蛋白,以冻干粉形式提供。髓磷脂碱性蛋白(Myelin Basic Protein,MBP)是中枢神经系统及某些神经元髓鞘的主要蛋白成分,约占髓鞘总蛋白的30%,是髓鞘的整体骨架成分。它被大量用于在脱髓鞘病损中的研究。在脱髓鞘病损的病人脑脊液和头部损伤的病人血清中,MBP量被检测出异常。作为抗原,它可引起自身免疫性脑脊髓炎,该模型可用来研究多发性硬化症。据报道,MBP会影响髓鞘中脂类与蛋白质的比例。此外,MBP在多个领域具有广泛应用:是一种可能的神经受体;体外可引起淋巴细胞增殖;MAPK通路的重要底物。

    中文别名:牛髓鞘碱性蛋白
    英文别名:MBP from bovine
    种属:牛
    分子量:约18.4 kDa,由170个*基酸残基组成的一条精*酸甲基化的多肽
    外观:灰白色或黄色冻干粉
    纯度:经SDS-PAGE检测,纯度≥90%
    溶解性:溶于水
    储存条件:-20℃,有效期4年

    ·碱性磷酸酶活性检测试剂盒
    编号:SY0467
    英文名称:Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit
    规格:100T
    本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒,可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照,可进行达100个样品的检测。

    碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,简写为ALP或AKP),又称碱性磷酸酯酶,是一组同工酶,目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织,是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解,从而将底物分子上的磷酸基团去除,转化为羟基。此类底物包括核酸(DNA、RNA)、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等;生物学中碱性磷酸酶(ALP)水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标,如:1)作为iPS成功诱导的标志;ALP在大多数细胞类型中均有表达,但是在iPS细胞内的表达水平明显升高;2)结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标;3)血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症,常被认为和恶性胆管阻塞,原发性硬化胆管炎,肝癌,肝硬化等肝胆疾病密切相关;4)血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成,以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关;5)碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况,多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说,血清内ALP的范围为40-150U/L。

    对硝基*(代"*")磷酸(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,碱性条件下,可在ALP作用下生成对硝基*(代"*")酚(p-nitrophenol, pNP),后者在碱性环境下呈黄色产物,并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深,说明ALP活性越高,反之则活性越低。因此,通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。

    产品规格:
    ALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer 15ml -20℃
    显色底物 pNPP Substrate 2管 -20℃避光
    pNP标准品溶液p-nitrophenol Standard 100ul (10mM) -20℃避光
    反应终止液 Stop Solution 12ml -20℃


    储存条件:-20℃,有效期一年。

    注意事项
    1) 如果进行酶活力的绝对定量,进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐孵育30min等较长时间,以减小操作过程中的时间误差。如果样品中酶活性较高,则可以预先适当稀释样品。
    2)样品溶液中须避免出现EDTA、*离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶抑制剂。
    3)ALP反应缓冲液和p-nitrophenol标准品溶液对人体有害,请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性,请小心操作。
    4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    1. 试剂准备
    将所有试剂取出,恢复至室温使用。
    1) 显色底物溶液:取一管显色底物,溶解于2.5ml的ALP反应缓冲液中,充分溶解和混匀,冰上放置。注意:新鲜配制的显色底物溶液需在数小时(≤ 6h)内使用。
    2) 标准品工作液:取10μl p-nitrophenol标准品溶液(10mM),用ALP反应缓冲液稀释至0.2ml,使得终浓度为0.5mM。

    2.样品准备
    1) 细胞或组织裂解液的准备:采用适当细胞或组织裂解液裂解细胞和组织,如果有必要需进行适当匀浆,随后离心取上清,用于ALP活性的检测。注意:裂解液中不能含有磷酸酶抑制剂。样品可以-80℃冻存,避免反复冻融。
    2) 血浆、血清和尿液的准备:血浆和血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。注意:血浆制备不能用含EDTA和柠檬酸盐的抗凝管。尿液通常也可以直接用于测定。上述样品可以-80℃冻存,避免反复冻融。
    3) 样品的稀释:若样品中含有较高活性的ALP,可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释,也可以采用试剂盒中的ALP反应缓冲液进行稀释。若使用上述反应缓冲液进行稀释,需保留足够的缓冲液用于试剂盒的检测过程。

    3.加样
    参考下表使用96孔板设置空白对照孔、标准品孔和样品孔。标准品的用量分别为4、8、16、24、32和 40μl,样品通常可以直接加50μl。如果样品中的碱性磷酸酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

    表1 各组分加样数据表
      空白对照(Blank) 标准品(Standard) 样品(Sample)
    ALP反应缓冲液 50μl (100-x)μl (50-y) μl
    显色底物 50μl 50μl
    样品 yμl
    标准品工作液 xμl


    4. 混匀:用枪头轻轻吹打混匀,也可借助摇床进行混匀。

    5. 孵育:37℃孵育5-10min。(待测样品中ALP活性较低时,可适当延长孵育时间至30min)

    6. 终止:每孔加入100μl反应终止液终止反应。此时,标准品或有ALP活性的孔会呈现不同深浅的黄色。

    7. 检测:405nm测定吸光度。如果不能测定405nm,也可以在400-415nm范围内检测吸光度。如果不能立即测定,可以在数小时内完成测定,所显现的黄色在数小时(≤ 6h)内稳定。

    8. 结果分析
    碱性磷酸酶活性单位的定义:在pH9.8的二乙醇胺(diethanolamine, DEA)缓冲液中,37℃条件下,每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位,也被称作一个DEA酶活力单位。在pH9.6的甘*酸缓冲液中,25℃条件下,每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位,也被称作一个甘*酸酶活力单位。一个甘*酸酶活力单位约相当于3个DEA酶活力单位。本试剂盒测定的是DEA酶活力单位。

    最后,根据酶活性单位的定义,计算出样品中的碱性磷酸酶活性。



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