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351
- 英文名:
CFDA, SE
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一年
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北京百奥莱博科技有限公司
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特别提示:包括细胞增殖示踪荧光探针在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞增殖示踪荧光探针
英文名称:CFDA, SE
产品规格:25mg
CAS#:150347-59-4
CFDA, SE,英文全称Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。
CFDA, SE是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)的衍生物,具细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的*基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。
CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。CFSA,SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。本品以粉末形式提供,需用DMSO制备储存液后再使用。
注意事项
1)不同的细胞其细胞内酯酶活性不同,因此染色效果具有差异性。
2)荧光染料均存在淬灭问题,染色过程需尽量避光。
3)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
CAS:150347-59-4
分子量:557.46
分子式:C29H19NO11
纯度:≥95%(HPLC)
储存条件:-20℃干燥避光,避免反复冻融,有效期一年
结构式
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文献和实验相关专题 细胞荧光探针北欧广泛应用于测定细胞总量、干细胞体外实验、追踪活细胞行踪,细胞荧光探针有许多种,由于篇幅原因这就主要介绍以下三种:细胞增殖示踪荧光探针CFDA SE、活细胞荧光示踪探针VFSE 450、DiI(细胞膜 红色荧光探针)。 细胞增殖示踪荧光探针 CFDA SE CFDA SE的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,是一种
光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光)。其中DiR的红外荧光可穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。 图3 DiI 标记的外泌体通过静脉注射观察在体内器官的分布情况 J Cereb Blood Flow Metab. 2018 May;38(5):767-779. 图4 DiO 标记的外泌体与 HCT116 细胞共孵育 BMC Cancer. 2018 Jan 6;18(1):47. 图5 DiR 标记的外泌体静脉注射小鼠结肠癌肿瘤模型 J
亲脂性荧光染料分子如PKH家族已被广泛用于外泌体标记。有研究使用纳米颗粒跟踪分析(NTA)系统地评估了PKH标记对外泌体尺寸的影响,所有被PKH标记外泌体的尺寸均明显增加[1],并引入了假阳性结果[3],故认为PKH不是示踪外泌体的可靠技术。 PKH容易引入假阳性 PKH可在四个方面引起假阳性: 1. 染料聚集造成的假阳性 研究表明,PKH的聚集会在体系中引入了新的非外泌体纳米颗粒。如下图(Fig.1)PKH(不含EV)在NTA下观测
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