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-20℃
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1~2个月
- 英文名:
Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein
- 库存:
915
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京Ad-GFP-LC3B大量库存促销,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京Ad-GFP-LC3B大量库存促销
品牌:百奥莱博
规格:1ml|10×1ml
编号:YT159
英文名:Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein
产地:国产|进口
本品是一种可以表达GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒,可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬(autophagy)的检测。
LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3 。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族,其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止,LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个氨基酸残基的蛋白,在蛋白合成后,被Atg4所酶切而失去了C端的22个氨基酸蛋白,从而暴露出C端的甘氨酸,人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中,其C端暴露的甘氨酸经过一个类似泛素化的过程,以ATG7为E1样激活酶, 以ATG3为E2样连接酶,以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶,在C端甘氨酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同,LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后,自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切,而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大,但由于其极强的疏水性,在SDS-PAGE电泳时,LC3B II比LC3B I迁移得更快,其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后,在非自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中;而在自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上,以斑点的形式表现出来。
自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关,在饥饿等不利的环境条件下, 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分,为细胞的生存提供能量及原材料,促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用,自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。
Ad-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒,感染后能够在靶细胞中有效表达绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白,呈现明亮的绿色荧光,可以用于细胞自噬的检测。
腺病毒感染细胞后为瞬时表达,通常不会与基因组DNA重组,不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后,有效表达时间通常不少于7天,不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。
百奥莱博的Ad-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统,感染普通的细胞后不能进行扩增和重组,从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。
本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。
本产品的滴度≥1×108 pfu/ml,使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞,每孔50万细胞计算,共可以感染10个孔;如果按照20 MOI感染24孔板的细胞,每孔10万细胞计算,共可以感染50个孔。如果MOI值提高,则相应可以感染的孔数会减少;如果MOI值降低,则相应可以感染的孔数会增加。
注意事项:
1. 反复冻融会降低病毒滴度,如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后,如果在一周内使用,可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年,可能会导致滴度下降,此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体,请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1),没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病,可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。
储存条件:-20℃,有效期1~2个月。
北京Ad-GFP-LC3B大量库存促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·Histone H3抗体
编号:YT799
英文名称:anti-Histone H3 antibody
规格:>30次
本抗体是用人工合成的人histone H3氨基端aa 1-20该段多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测30次。
本Histone H3抗体识别的是总histone H3(total histone H3),可检测内源性的Histone H3,未发现和其它组蛋白有交叉反应。
组蛋白histone H2A,H2B,H3和H4各两个分子组成的八聚体和与该八聚体相结合的DNA构成了染色质的基本结构核小体(necliosome)。组蛋白的存在确保了基因组DNA可以被相对致密而有序地堆放在细胞核中。人一个细胞的基因组DNA完全拉成线性的总长度约为1.4米,但染色质的总长度仅为9厘米,而有丝分裂时染色体的总长度仅为0.12毫米。除了核心组蛋白(core histone)histone H2A,H2B,H3和H4外,还有一类linker histone H1和H5。Histone H1可以结合核小体和DNA在核小体中进出的位点,从而使DNA的位置被锁定,有利于在核小体基础上形成更高级的空间结构(参考下图)。组蛋白结合区域的DNA长度为147bp,核小体间的DNA长度大约为50bp。染色质空间结构的松散还是致密很大程度上决定了该区域基因转录水平的高低(参考下图)。

组蛋白是真核生物中呈强碱性的蛋白。组蛋白可以被乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化修饰。这些修饰会改变染色质的空间结构,从而在基因转录调控、染色体装配等过程中起重要作用。通常,histone H2B的Lys5,Lys12和Lys15会发生乙酰化修饰。
Histone H3的Lys9,Lys14,Lys18和Lys23会发生乙酰化修饰。Histone H3的Ser10,Ser28和Thr11都会发生磷酸化修饰。Histone H3的这些磷酸化和有丝分裂或减数分裂过程中的染色质浓缩密切相关。Histone H3 Thr3的磷酸化在很多物种中都非常保守,可以被激酶haspin所催化。Histone H3的Thr3磷酸化发生在有丝分裂早期(prophase),在有丝分裂的晚期(anaphase)则被去磷酸化。Histone H3和H4是甲基化修饰的主要组蛋白,哺乳动物细胞中histone H3和H4是高度甲基化的。组蛋白可以被单、双或三甲基化(mono-, di-, and tri-methylated),和基因转录调控和染色体装配密切相关。
Histone H3在其氨基端有一个较长的N terminal tail,在核小体的装配过程中起关键作用。Histone H3是各种histone中修饰程度最高的,在表观遗传(epigenetics)中起重要作用。Histone H3包括H3A1、H3A2和H3A3。人的hitone H3由近15个基因分别单独编码。
产品组份:
Histone H3抗体————30μl
Western一抗稀释液————30ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人工合成的人histone H3氨基端aa 1-20该段多肽
宿主:兔
用途:WB,IF
交叉反应性:人
抗体识别位点:Histone H3 N-terminal
Histone H3分子量:~17kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IF(1:100)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京Ad-GFP-LC3B大量库存促销关键词:Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein,YT159,Ad-GFP-LC3B
·PDI抗体
编号:YT837
英文名称:anti-PDI antibody
规格:>20次
本抗体是用人工合成的人PDI中的一段多肽(aa495-506)进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本PDI抗体识别的是总PDI(total PDI),可以检测内源性的PDI。
分泌蛋白合成后被转位到内质网进行翻译后修饰和适当折叠。许多分泌蛋白需要通过在分子内或分子间形成二硫键,从而形成其天然构象,这个过程被称为氧化性蛋白折叠(oxidative protein folding)。PDI(protein disulfide isomerase),即蛋白二硫键异构酶,可以催化这些二硫键的形成和异构化。PDI一方面可以通过二硫键异构酶活性促进蛋白内或蛋白间形成正确的二硫键,另一方面也可以催化某些蛋白的二硫键的形成。催化某些蛋白二硫键形成时,PDI被还原,同时Ero1蛋白又会促进其氧化。氧化性蛋白折叠机制的研究表明分子氧可氧化内质网蛋白Ero1,Ero1又可氧化PDI导致其形成二硫键。PDI还可以起分子伴侣的作用,抑制蛋白积聚(protein aggregation)。PDI还分别是collagen prolyl 4-hydorxylase异源四聚蛋白复合物和microsomal triglyceride transfer protein异源二聚蛋白复合物的组成蛋白,分别在胶原蛋白合成中proline羟基化(hydroxylation)和中性脂转移到新生的脂蛋白颗粒过程中发挥作用。PDI还被报道具有钙离子依赖的transglutaminase活性。雌激素被报道可以和PDI相结合。PDI被广泛用作ER的分子标记(ER marker),但在某些细胞中PDI也可以表达在细胞表面、细胞浆或细胞核。分布在细胞表面的PDI被认为和细胞粘附有关。
产品组份:
PDI抗体————40μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原:人工合成的人PDI中的一段多肽(aa495-506)
宿主:兔
用途:WB,IP,IF
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,牛
抗体识别位点:PDI N-terminal
PARP分子量:~57kD
推荐稀释比例:WB(1:500),IP(1:25),IF(1:50)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京Ad-GFP-LC3B大量库存促销关键词:Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein,YT159,Ad-GFP-LC3B
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