SY0255型3:1琼脂糖特价优惠

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖SY0255型3:1琼脂糖特价优惠在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：SY0255型3:1琼脂糖特价优惠
英文名：NuSieve3:1Agarose
产地：国产|进口
规格：5g
编号：SY0255
品牌：百奥莱博
琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。

本品为NuSieve3:1 琼脂糖，与常规琼脂糖相比，对PCR产物，小片段DNA（1000bp以下）具有很高的分辨率。此外，还具有如下特点：
1）易溶解，胶液更清澈，可以配制高达5%的凝胶；
2）很低的背景；
3）品质稳定。

琼脂糖的基本参数，包括：
1）硫*(代"酸")盐含量（sulfate content）——纯度指标，因为硫*(代"酸")根是存在琼脂糖内的主要离子基团；
2）凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；
3）胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点。
4）电渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

产品性质：

外观：白色粉末
凝胶强度：≥650g/cm2（1.5% gel）
凝胶温度：≤36℃（1.5% gel）
融胶温度：≤80℃（1.5% gel）
电渗值：≤0.10
外观：无色清澈胶液
硫*(代"酸")盐：≤0.10%
水分：≤10%
灰分：≤0.5%

使用方法

1）配制适量电泳及制胶用的缓冲液（根据电泳需要，配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液），倒入合适三角瓶中。【注意】：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2）根据制胶量及凝胶浓度，加入准确称量的琼脂糖粉（总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量）。
3）在微波炉中加热溶解琼脂糖，设置中火加热至沸腾，保持胶液沸腾约 30s，戴上防热手套，移开三角锥瓶，小心摇动三角锥瓶，重悬未溶解颗粒，再次用高火加热1分钟（或加热直至琼脂糖完全溶解）。请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】：必须保证琼脂糖充分完全溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4）使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入*化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml，并充分混匀。
【注意】：*化乙锭是一种致癌物质。使用含有*化乙锭的溶液时，请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品（YeaRed 核酸染料，Cat# 10202），使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。
5）将琼脂糖溶液倒入制胶模具中，在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。
6）在室温下使胶凝固（大约30min-1h），然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存 2～5天。

琼脂糖浓度与DNA分离范围

 

线性DNA片段大小（bp）	10-100bp	100-500bp	500-1000bp
琼脂糖浓度（%），1×TAE Buffer	6.0	4.0	3.0
琼脂糖浓度（%），1×TBE Buffer	5.0	3.0	2.0

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·淋巴细胞分离液1.077
编号：SY0532
英文名称：Lymphocyte Separation Medium 1.077
规格：100ml
淋巴细胞分离液（Lymphocyte Separation Medium，简称LSM）是一种无菌的即用型分离液，基于Böyum的Ficoll-甲泛影*溶液做过一些改良，使得操作简单快速且分离效率更高。每100 ml淋巴细胞分离液中含有6.2 g 聚蔗糖（Ficoll）和9.4 g 泛影酸*，20℃下的密度为1.0770-1.0800 g/ml。不仅适用于外周血淋巴细胞，也可分离其他组织来源的淋巴细胞，包括脐带血和骨髓细胞。

工作原理
去纤维蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释，加在分离液上层，之后低速离心30 min。在离心过程中，差速迁移使其最终形成几个细胞分层。聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞，通过梯度迁移至管底。根据其密度的大小，淋巴细胞和其他单个核细胞如单核细胞，以及血小板分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收，并通过进一步清洗来去除血小板，LSM和血浆。

操作方法
注：此操作流程适用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人血。对于其他物种或者其他组织的血液，可能需要对此步骤做出一定的改进。



1）轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合；
2）无菌条件转移3 ml LSM到15 ml离心管中；
3）用2 ml 生理盐水混合2 ml去纤维蛋白血液或肝素化血液；
4）小心将稀释血液加入3 ml LSM（室温即可）的上层，使得在血液和LSM间形成一个明显的分层。不要将稀释血液混入LSM中；
5）室温下400g离心15-30min，离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞，同时可以在LSM上形成一层单核-淋巴细胞分层，如下图所示（从上到下，依次分为血浆层-淋巴细胞层-LSM层-RBC颗粒）；
6）吸出淋巴细胞层上方2-3 mm内的血浆；
7）吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层，并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中，室温离心10 min，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围，例如160 – 260 g（清洗去除LSM和降低血小板含量）；
8）用平衡盐缓冲液再清洗细胞一次，最后取适当的培养基重悬细胞。

注意事项
1）稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体。
2）为保持淋巴细胞的活性，应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层，包括淋巴细胞和单核细胞。
3）若溶液变浑浊，呈现出不同的黄色或可能有受污染迹象，不可再使用。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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