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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
NP40 Lysis Buffer
- 库存:
492
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京BTN131009型NP40裂解液价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:NP40裂解液
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:NP40 Lysis Buffer
规格:250mL
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
产品特点:
1.本产品裂解能力强度温和,对膜蛋白的处理能力一般;对核蛋白的提取能力较好;对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2.本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3.本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
4.用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1.融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2.对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-~250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3.充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
对于组织样品:
1.把组织剪切成细小的碎片。
2.融解NP-40裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3.按照每20mg组织加入150~250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4.用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5.充分裂解后,10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6.如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
备注:
1.为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
关键词:BTN131009,NP40裂解液,NP40 Lysis Buffer
关于北京BTN131009型NP40裂解液价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
| 编号 | 名称 |
| BTN60602 | 柱式植物DNA提取试剂盒 |
| BTN81204 | 5×SDS-PAGE上样液 |
| BTN100914 | 10%Sarkosyl溶液(DNA级) |
| BTN100905 | 8M盐*(代"酸")胍溶液(RNase-Free) |
| BTN100808 | *化乙锭干粉(EB干粉) |
| BTN120412 | 微球菌核酸酶 |
| BTN131108 | ONPG干粉 |
| BTN130665 | Cre重组酶 |
| BTN130983 | RNase喷雾清除剂 |
| BTN120679 | 6nt随机引物(抗水解)(0.5mM) |
| BTN70503Y | DNA marker(100-5000bp) |
| BTN130620 | Poly(U)聚合酶 |
| BTN90207 | 大肠杆菌JM109感受态细胞 |
| BTN140428 | 大肠杆菌BL21化学感受态细胞 |
| BTN70503C | DNA marker(200-1500bp) |
| BTN131208 | DNA探针变性液 |
| BTN100813 | SOB培养基 |
| BTN131231 | Oligo(dT)纤维素 |
| BTN130864 | Hoechst 33258干粉 |
| BTN130910 | 长片段Taq DNA聚合酶 |
| BTN51208B | dNTP溶液(10mM) |
| BTN131288 | Maximov固定液 |
| BTN130815 | taq酶抗体 |
| BTN100907 | 10M*化*溶液(RNase-Free) |
| BTN80201 | 一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒 |
| BTN130699 | RNase抑制剂(小鼠源)(40U/μL) |
| BTN150801 | 大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞 |
| BTN101116 | 柱式植物油DNA提取试剂盒 |
| BTN60807 | 柱式无内毒素质粒DNA提取试剂盒 |
| BTN131282 | 多聚甲醛-磷酸缓冲固定液 |
| BTN100920 | 生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP) |
| BTN100307B | 酸洗玻璃珠(200μm) |
| BTN151203 | 生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP ) |
| BTN130307 | 25mM*化锰溶液(PCR级MnCl2溶液) |
| BTN60201 | 非酶DNA清除剂(>200nt) |
| BTN160101 | pUCm-T载体 |
| BTN111109 | DOP-PCR试剂盒 |
| BTN71203 | 植物RNA柱式提取试剂盒 |
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文献和实验,三个一起上 从以上三个结果可以看到,第一种孵育方法抗原得率最高,第三种抗原得率最低。如果靶蛋白丰度较高,第一种和第二种差别并不显著。注意,整个体系选择同样的孵育顺序,以确保结果的重复性。 5、各种 buffer 整个 co-IP 系统,涉及到裂解液,结合液,洗涤液,洗脱液,这4种溶液要如何考量呢? 裂解液---样本质量很大程度受限于裂解液,要考虑其中的去垢剂种类。 非变性裂解液,含有非离子型去垢剂,有助于稳定天然蛋白构象,比如 IP lysis buffer。不建议使用变性裂解液
细胞裂解分析化学,论坛,化学分析,仪器分析,分析测试,色谱,电泳,光谱u5kLlIO T 采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质分析化学论坛~O/b:te} 相互作用,多采用非离子变性剂(NP40或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。 不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的cocktailer。 2、如何得到比较纯的包涵
0.5 M EDTA,pH=8.0,加蒸馏水定容至1 L,工作液为稀释的0.5×TBE 7. 裂解液成分:50 mM KCl,10 mM Tris pH 8.4,0.45% Tween 20,0.2% gelatin,0.45% NP40,60 μg/ml proteinase K 实验设备 1. 高速冷冻离心机(3K-30)[德国Sigma公司] 2. 恒温水浴锅[北京六一仪器厂] 3. 电泳
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









