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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、4℃保存、有效期一年。
- 保质期:
一年
- 英文名:
Mouse Genomic DNA
- 库存:
500
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
小鼠基因组DNA打折促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多小鼠基因组DNA等基因结构和功能产品请联系我司咨询订购。
名称:小鼠基因组DNA打折促销
品牌:百奥莱博
英文名:Mouse Genomic DNA
规格:100μg
编号:BTN131033
产地:国产|进口
本产品为小鼠基因组DNA,是从无疾病小鼠全血中分离到的。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括 PCR)及基因组文库构建等实验。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
想要了解更多关于小鼠基因组DNA打折促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
96949-21-2 中性树胶
PY01-163 磷酸*二*(无水) 500克
ARB10169 人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)定量分析 Human t-cell acute lymphoblastic leukemia antigen,talla-1 ELISA KIT
HC0161 吸头盒(蓝色)
ARB12559 大鼠脂蛋白脂酶(LPL)elisa检测操作说明书 Rat lipoprotein lipase,lpl ELISA KIT
ARB10988 人卵巢癌标志物CA125酶标法分析 Human ovarian cancer marker-ca125 ELISA KIT
ARB10402 人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)elisa检测说明书 Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,strail ELISA KIT
ARB10191 人α半乳糖基抗体(GAl)酶免分析 Human α-galactoyl,gal ELISA KIT
ARB10155 人S100*结合蛋白A9/*粒蛋白B(S100A9)尿液中含量检测 Human s100 calcium binding protein a9/calgranulin b,s100a9 ELISA KIT
ARB13111 小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)血清中含量检测 Mouse bone-specific alkphase b,alp-b ELISA KIT
2′-脱氧胸苷-5′-单磷酸二*盐 DNA 33430-62-5
α-*酚*甲醇 Benzo-18-crown-6 145-50-6
BL1442 X-gal(20mg/ml)
9013-20-1 链霉亲和素 Streptavidin
小鼠基因组DNA打折促销关键词:Mouse Genomic DNA,BTN131033,小鼠基因组DNA
ARB10131 人N端前脑*素(NT-proBNP)elisa检测说明书 Human n-terminal pro-brain natriuretic Peptide,nt-probnp ELISA KIT
PY02-395 A1培养基 250克
9002-04-4 Thrombin 凝血酶
1-乙基-3-(3-二甲*丙基)碳二亚胺盐*(代"酸")盐 D-Arginine 25952-53-8
2,4-二**氧乙酸* Dehydroascorbic acid 2702-72-9
ARB10259 人二胺氧化酶(DAO)血清中含量检测 Human diamine oxidase,dao ELISA KIT
ARB11249 人胃动素(MTL)酶标法分析 Human motilin,mtl ELISA KIT
BL1182 亲和层析柱10ml(1.5*8)
ARB10661 人血管紧张素Ⅰ(ANGⅠ)Elisa定量检测
反丁烯二酸 4-Amino-1-methyl-3-n-propyl-5-pyrazolecarboxamide 110-17-8
BTN130698 3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G帽结构类似物 RNA Cap Structure Analogs
DN1401 植物基因组DNA快速提取试剂盒
PY02-082 孟加拉红培养基 250克
298-83-*(代"9") NBT *化硝基四氮唑兰
F030821 BIOTIN标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*BIOTIN
HC0262 Conbitips Plus分液管
小鼠基因组DNA打折促销关键词:Mouse Genomic DNA,BTN131033,小鼠基因组DNA
·可保种型蓝白T载体
编号:BTN60803
英文名称:Blue-White Vector T
规格:50 ng
本产品是环状的可以制备Clion蓝白T载体的质粒DNA。T载体是克隆PCR扩增产物的必不可少的工具,但是由于市场上的各种T载体质量参差不齐,用户很难购买到满意的产品;同时购买的T载体为线性DNA,不能保种,必须反复购买,累计成本很高。为解决这一问题,我司特推出可保种型T载体,用户只需要购买Xcm I内切酶就可以自己制备高质量的T载体,随用随配,十分方便。
产品特点:
1.一次购买,终身拥有。本产品提供制备T载体用的环形质粒DNA,可以象其他质粒一样保种并长期保存。
2. 随用随配,十分方便。用户只需要提供Xcm I 限制性内切酶和基本分子生物学实验条件,就可以自己制备T载体。整个过程只需要两天。
3. T载体含T 率为100%。本方法不是使用传统的加尾法,而是使用Xcm I酶切法。质粒的多克隆位点上预先插入了一段长为1.3 Kb的Xcm I DNA片段,经Xcm I酶切后回收得到的质粒DNA(T载体)两端自然全部带有T 突出,比例远远高于用Taq DNA聚合酶加尾法和TdT 加尾法得到的T载体。
4. 方便各种下游操作。用本产品得到的蓝白T载体插入位点两侧有多种常见的酶切位点,便于后续克隆; Xcm I 位点在Alpha 互补区,可以使用蓝白斑筛选重组子;两边还有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,便于制备RNA探针。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
使用方法:
一.细菌的转化
1. 将100μl感受态细胞于冰上解冻。注意:最好使用end A1菌种(如DH1、DH5、DH5、JM109、XL1-Blue等。常用宿主细菌的基因型可以参考《分子克隆手册》等参考书)。因为这类细菌所含DNase少,制备T载体后,残留的DNase对的T末端的破坏机会更小。
2. 取5-10μl本产品加入到感受态细胞中,轻轻旋转几次以混匀内容物。在冰上放置30分钟。
3. 将管放入预加温到42℃的水浴中,热休克90秒。快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1~2分钟。
4. 每管中加900μl LB培养基,37℃振荡培养1小时。
5. 取100μl培养液涂布到含Amp的LB琼脂平板表面。
6. 将平板置于室温直至液体被吸收。
7. 倒置平皿,于37℃培养,12~16小时后可出现菌落。
二.细菌的鉴定
1. 挑取单个菌落进行过夜细菌培养。
2. 按常规的方法进行质粒小量制备。
3. 用Xcm I内切酶按下面条件酶切提取的质粒DNA,如果大规模酶切,需要按比例增加各成分用量:
| 成分 | 使用量 |
| Xcm I Buffer,10× | 5μl |
| 质粒DNA | <或= 2μg |
| Xcm I | 1μl |
| 超纯水 | 加到50μl |
37℃保温一小时,65℃保温20分钟使酶失活。
4.电泳,本产品被Xcm I酶切后将产生3 Kb和1.3 Kb的两段DNA。
5. 如果Xcm I酶切图谱正确,则按常规的方法进行细菌的保种。
三. T载体的制备
1. 参考《分子克隆手册》等参考书培养细菌和提取质粒DNA。注意:一定要去尽可能去除残留的RNA和蛋白质(含残留DNase)的污染。
2. 用Xcm I酶切质粒。注意:酶切时间最好不要超过一小时,避免残留的DNase对T末端的破坏。
3.电泳后切下含3Kb DNA(既蓝白T载体)的胶段。注意:千万不要用UV照射将要回收的片段,因为UV会使DNA交连,使DNA失去转化细菌的能力。如果酶切的DNA量大,可以使用百奥莱博绿如蓝核酸染料,可以直接在可见光和黑背景下切胶。如果别无选择,最好在长波(360nm)紫外灯下快速切胶,尽可能切掉多余的凝胶。为避免DNA交连,可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)
4. 用常规DNA回收方法进行胶回收。
5. 测定T载体DNA的浓度后,将T载体DNA保存在-20℃备用或直接使用。
四.连接反应
1. 短暂离心装有T载体的离心管。
2.在两个离心管中加入下列成分:
| 成分 | 样品管 | 阴性对照管 |
| T4 Ligase Buffer,10× | 1μl | 1μl |
| 蓝白T载体 | 20-50ng | 20-50ng |
| PCR 纯化产物 | 50-500ng | 不加 |
| T4 Ligase | 3-5U | 3-5U |
| 补水到 | 10μl | 10μl |
注意: PCR纯化产物与蓝白T载体的摩尔比最好为3:1-10:1。
3. 用移液器吹打连接反应使之混匀后,16℃孵育12小时(或按T4 Ligase供货商提供的操作说明书进行连接)。
五.细菌转化和鉴定
1. 取5μl连接产物进行转化,具体步骤见本手册一,最好使用含X-gal、IPTG、Amp的LB琼脂平板以便进行蓝白筛选。
2. 按经典的质粒提取+酶切或测序鉴定,可以选用的、在插入位点两侧都有酶切位点的酶有BstZ I、EcoR I和Not I。可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。按菌落PCR方法筛选,可选用百奥莱博的菌落PCR试剂盒(BTN50901)进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。
MCS位点:
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文献和实验8.0) 氯仿/异戊醇(24:1V/V) 10mol/LNH4AC,配制后高压灭菌,4℃贮存 无水乙醇(AR) 70%乙醇 2.器材 玻璃匀浆器; 离心机; 电泳仪; 电泳槽; 紫外透射反射分析仪。 三、操作 1.组织DNA的提取 ①取小鼠新鲜肝组织,去除结缔组织,用剪刀剪成细小碎块,加10倍体积TE缓冲液,用玻璃匀浆器在冰浴中中速匀浆
基酸,使 DNA 分子完整地分离出来。再用酚、酚/氯仿抽提除去蛋白质,接着用氯仿抽提以除去 DNA 溶液中微量酚的污染。最后用无水乙醇沉淀 DNA 。为获得高纯度 DNA ,操作过程中常加入 RNase 除去 RNA 。获得高分子量 DNA 的关键是防止 DNase 降解 DNA 。故标本必须新鲜,在提取前细胞就保持完整,核、溶酶体等细胞器应没有明显破坏,提取 DNA 用的离心管等器皿及试剂应消毒。操作在4 ℃以下进行。操作1 .组织 DNA 的提取1) 取小鼠新鲜肝组织,去除结缔组织,用剪刀剪成细小碎块
相关专题 实验目的 从新鲜的小鼠肝脏中提取基因组DNA,为southern杂交或DNA文库 的构建做好准备。 我们重点是要保证DNA的序列、产率和纯度,去除Dnase、机械剪切 (对于如此之大的基因组 ,防止机械剪切是很重要的)、物理、化学因素的影响。 实验原理及过程 实验步骤 实验原理 1
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










