北京PCR级海藻糖溶液厂家

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百奥莱博专业生产供应北京PCR级海藻糖溶液厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京PCR级海藻糖溶液厂家
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN130506
规格：1.5mL
英文名：Trehalose Solution，PCR Grade
本产品为浓度为5M的海藻糖的水溶液，可以直接添加到PCR反应体系或逆转录反应中提高酶的热稳定性和活性。

产品特点：
1.在反应体系中加入海藻糖，可以增加热敏感的酶在高温下的稳定性和活性。
2. 海藻糖能增加鼠白血病病毒逆转录酶(Reverse Transcripatase)的热稳定和热激活特性，使其在60℃仍具有全部活性，足以在mRNA二级结构诱导终止反应之前合成全长的cDNA，反应效率大大提高。
3. 有助于提高干燥保存的酶的活性。

储存条件：低温运输，4℃保存，保存期一年

使用方法：按照1/3体积，将本产品加入到PCR体系中即可。

我公司的北京PCR级海藻糖溶液厂家，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
SJ0324 G-1-P  D-葡萄糖-1-磷酸二*
C1601 驴血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB10270 人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)血清中含量检测 Human interferon inducible t-cell chemoattractant,i-tac ELISA KIT
ARB11376 人前列腺酸性磷酸酶(PAP)elisa检测 Human prostatic acid phosphatase,pap ELISA KIT
*黄绿素二*盐 4-(4-Nitrophenylazo)-1-naphthol 108750-13-6
磷钼酸* Amaranth 1313-30-0
己糖激酶 Sepharose CL-4B 9001-51-8
F030242 HRP标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 HRP*Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY
BTN100814 Oligo dT12-18引物 Oligo dT12-18 Primer
ARB13758 鸭γ干扰素(IFN-γ)尿液中含量检测 Duck interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
PY01-085B  肝浸粉(牛)  250克|1公斤  
CYB162035 羊抗人血清(抗血清) 0.5ml
ARB11850 人凝血酶原片段F1+2(F1+2)酶免分析 Human prothrombin fragment 1+2,f1+2 ELISA KIT
乙酸铈 Cholic aicd sodiu*(代"m") Salt 206996-60-3
F050306 小鼠IgG抗体 Mouse IgG
ARB12680 大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)elisa检测说明书 Rat bladder tumor antigen,bta ELISA KIT
PY02-143  四环素检定琼脂  250克  
北京PCR级海藻糖溶液厂家关键词：Trehalose Solution，PCR Grade,BTN130506,PCR级海藻糖溶液

二*荃庚二酸 Kojic acid 583-93-7
ARB11377 人前降*素(PCT)检测服务 Human procalcitonin,pct ELISA KIT
3-(N-玛啡啉)丙磺酸*盐 o-Dianisidine dihydrochloride 71119-22-7
ARB10118 人L-乳酸脱*酶(L-LDH)elisa检测 Human l-lactate dehydrogenase,l-ldh ELISA KIT
Q琼脂糖凝胶FF VMA
PY02-438  改良Giolitti-Cantoni肉汤  250克  
ARB13332 犬狂犬病毒抗原 RV-Ag 酶联免疫定量检测 
吐温80 Sodium cromoglycate 9005-65-6
Na-*甲酰-L-精*酸乙酯盐*(代"酸")盐 DEAE Cellulose 2645-08-1
乙二*(代"胺")四乙酸三*盐 Mutarotase 65501-24-8
ARB13611 兔子组织多肽抗原(TPA)elisa测定使用说明书 Rabbit tissue polyPeptide antigen,tpa ELISA KIT
BL1177 DAB显色试剂盒(20×)
BTN81202 真菌总蛋白质微量提取试剂盒 Fungal Total Protein Miniprep Kit
ARB11517 人胸腺基质淋巴生成素(TSLP)Elisa方法检测 Human tslp   ELISA KIT
L-甘-甘-甘三肽 HSPYU 556-33-2
BL0809 HRP标记羊抗人IgA抗体
PY01-117  琼脂粉  日本进分  100克  
北京PCR级海藻糖溶液厂家关键词：Trehalose Solution，PCR Grade,BTN130506,PCR级海藻糖溶液


·HRP标记内参抗体(β-actin)
编号：BTN130592
英文名称：HRP Conjugated Loading Control Antibody(β-actin)
规格：20μL
本产品包含三种最常用的HRP标记内参抗体，β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594)，该系列抗体无需二抗孵育，可缩短实验周期，节约实验成本，大幅降低背景信息强度。

抗体类型：小鼠IgG1
应 用：Western blotting
建议浓度：1:1000～10000
交叉反应性：人，大鼠，小鼠

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

·人基因组DNA(男性)
编号：BTN131031
英文名称：Human Genomic DNA(Male)
规格：100μg
本产品为人基因组DNA，来源于多位匿名的捐献者，其中BTN131031为男性基因组DNA；BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。

·超级杂交液(含50%甲酰胺)
编号：BTN80915B
英文名称：Super hybrid solution(with 50% formamide)
规格：100mL
核酸杂交一般是指用一种标记的核酸探针与印迹膜上的核酸进行杂交，由此检测印迹膜上是否存在与探针同源的核酸分子(靶分子)。核酸杂交是分子生物学的基本技术之一，应用非常广泛。由于核酸杂交效率受印迹膜种类、杂交温度、探针浓度、杂交液离子强度、杂交液pH及杂交液粘度等因素影响，用户自己摸索和优化相关条件非常繁琐，因此本公司开发了本产品，其操作流程如下：


产品特点：
1. 既可用于Southern杂交(靶分子为DNA)，也可用于和Northern杂交(靶分子为RNA)，还可以用于菌落杂交，基因芯片等杂交。
2. 既可以用于同位素探针的杂交，也可以用于非同位素探针的杂交。
3. 既可以使用DNA(包括DNA Oligo)探针，也可以使用RNA探针(包括RNA Oligo)
4.含多种能够促进杂交的聚合物，使杂交反应能在6～12小时完成，而常规杂交反应一般需要12～24小时。
5.含多种封堵剂，能阻印迹膜对探针分子的非特异性吸附，能有效降低背景信号，延长曝光时间以便检测到低拷贝的RNA(Northern)和单拷贝的基因(Southern)。
6. A型不含甲酰胺，B型含50%的甲酰胺。后者使杂交在较低温度就可以完成，适合Tm 较高的分子杂交(如RNA-RNA和RNA-DNA杂交)。
7.跟各种常用的印迹膜兼容，包括硝酸纤维素膜和尼龙膜。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。本产品属于高盐溶液，低温下产生沉淀，必须在65℃加热溶解并充分摇匀后才能使用。

使用方法：

一、根据探针和靶分子的不同，分别按下面不同情况计算杂交分子的Tm 值
1. 对DNA-DNA杂交，其Tm = 81.5 + 16.6×log10[Na+] + 0.41×GC%–500/L
说明：L是探针或靶分子的长度(用两者中最短的一个)
GC%是探针或靶分子中的GC 百分比(用两者中最短的一个)
Na+浓度是本产品中Na+的浓度，为0.75 M，16.6 ×log10[Na+]=(-2.07)
2. 对DNA-RNA杂交，其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高10-15℃。
3. 对RNA-RNA杂交，其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高20-25℃。
4. 对Oligo探针杂交，Tm=GC 数量×4℃+AT 数量×2℃。

二、确定最佳杂交温度(预杂交温度跟杂交温度应该一样)
1. 对于大于200bp的DNA-DNA杂交，最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃，一般选择68℃。
2. 对RNA-RNA或DNA-RNA杂交，最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃。如果这样计算出的杂交温度很高(如高于70℃)，则RNA容易降解，所以最好选用含甲酰胺的超级杂交液(B型本产品)，以便能在42℃完成杂交。
3. 对Oligo探针的杂交，最佳杂交温度一般比Tm低5℃。由于Oligo较短，更容易受各种因素影响(如错配率、修饰碱基比例等)，所以最佳温度需要适度摸索和优化。

三、确定洗膜温度
一般使用0.1×SSC做洗膜液，在此条件下的最佳洗膜温度比Tm低5-12℃，一般情况下可以在55℃进行洗膜。Oligo探针可以室温洗膜。

四、预杂交步骤
预杂交就是用不含探针的本产品跟印迹膜进行孵育，其目的是用所含的非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物将印迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭，否则这些位点会吸附标记的探针，造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中，使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口，再剪掉一角，留一个小口)，按每平方厘米印迹膜加0.2mL超级杂交液的比例沿小口加入超级杂交液，然后用塑料封口机将口封牢。
3. 将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中，保温1-2小时，延长到12-16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中，使超级杂交液与印迹膜充分接触。

五、杂交步骤
1. 如果标记的探针是双链核酸，则需经变性处理。具体操作是将探针样品在沸水浴中加热5分钟，然后迅速置冰浴中。如果是单链DNA或RNA探针，则不需变性，直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口，加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率而定，一般要求终浓度不能低于1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因，探针的加入量应加大，而对于检测克隆的基因片段，则探针的量可减少。如果是放射性探针，应将此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3.在选定的杂交温度下继续保温，时间一般为6-12小时。

六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中，一定不要使印迹膜干燥。
此步是将与印迹膜非特异结合的探针分子洗去而只留下特异结合的探针分子。由于非特异性杂交的杂交分子解链温度较低，热稳定性较差，在一定的温度和较低的离子强度下，即可洗掉。
1.杂交完毕，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含探针的杂交液。此含探针的杂交液可以多次使用再倒弃。
2. 剪开杂交袋，用镊子取出印迹膜，浸没于大量的2×SSC(含0.5%SDS)溶液中，室温下振荡漂洗15分钟。
3. 重复上步操作一次。
4. 将印迹膜转移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中，在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
5. 重复上步操作一次。如果是同位素标记探针，则需要重复至用盖革计数器在无核酸区域检测不出放射信号为止。
6. 将印迹膜转移到滤纸上，吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。

疑难解答：
问题一：高背景(有或没有杂交信号)
解决方案：将放射性探针的比活降低到2×10E6 cpm/mL以下；将非放射性探针的终浓度降低到30 ng/mL以下；将探针长度控制在200–800 核苷酸；减少杂交时间；适当提高杂交温度。
问题二：没有杂交信号或杂交信号非常弱
解决方案：杂交过程中应应该连续振荡，不应该有气泡，避免印迹膜变干。将放射性探针活性提高到>5×10E8 cpm/ng，提高非放射性标记探针的终浓度；适当降低杂交温度。

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