硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取) DNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取) DNA纯化，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取) DNA纯化
编号：BTN90303
英文名：Silica Spin Column For Maxiprep
产地：国产|进口
规格：1套
硅胶膜离心吸附柱目前广泛用于基因组DNA提取、总RNA提取、DNA反应纯化、DNA胶回收和质粒DNA制备等分子生物学实验，但是由于硅胶膜吸附核酸的能力千差万别(详细分析见百奥莱博综述Silica-DNA结合原理及影响因素)，使得市场上相关产品的质量也良莠不齐。百奥莱博经过精心研究，找到特殊的化学修饰方法，使普通硅胶膜吸附核酸的能力增加3-12倍，优于市场上绝大多数产品。本产品就是基于化学修饰硅胶膜的高载量离心吸附柱。

产品特点：
1.高载量，在同等上样条件下吸附能力比同类产品高1-2倍左右。
2.与50mL离心管兼容。
3.与各种常用的，基于Silica-DNA结合原理的上柱液和洗柱液兼容。
4.可以再生使用(需要百奥莱博的离心吸附柱再生液)。
5. 结合DNA的性能不会随放置的时间变化。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用效果：

图注：高拷贝质粒pWXL001从70mL过夜培养菌液中提取得到。从左到右分别为第一次，第二次，第三次，第四次和第五次洗脱，每次洗脱体积均为1mL。上样体积为10μl，最后在0.8%琼脂糖凝胶中电泳后紫外观察。使用的染料为百奥莱博绿如蓝染料，电泳缓冲液为超快电泳液。第一次洗脱约25%的质粒DNA，第二次洗脱约35%的质粒DNA；第三次洗脱约20%的质粒DNA；第四次洗脱约10%的质粒DNA；第五次洗脱约8%的质粒DNA。本次实验质粒DNA产量是465.5μg，产率是6.65μg/mL

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细胞分离液 XTT sodiu*(代"m") salt
PY02-066  抗生素检定培养基Ⅳ号  250克  
β-葡聚糖酶 Span 40 9025-70-1
BTN91101 一管式TMB显色液 One-Tube TMB Chromogenic Solution
ARB11202 人组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA检测服务 Human Histone deacetylase,hd ELISA KIT
L-半胱*酸盐*(代"酸")盐无水物 GPDA 52-89-1
N6-*甲酰基腺嘌呤 Ethanethioamide 4005-49-6
RealMasterMix（SYBR Green） 
膜蛋白提取试剂盒 Membrane protein extraction kit  50T|100T
BL0868 羊抗小鼠IgG免疫血清
F030510 FITC标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*FITC
环丙基*甲*(代"烷") Nα-Boc-D-tryptophan 7051-34-5
*乐灵 BOC-Nim-benzyl-L-Histidine 1582-09-8
BL1380 20×SSC PH7.4
BTN111116 一站式GST标记蛋白质微量纯化套装 One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack
黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐 PUC19 84366-81-4
ARB12249 大鼠血管活性肠肽(VIP)Elisa定量检测 Rat vasoactive intestinal Peptide，vip ELISA KIT
ARB12389 大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)血清中含量检测 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,trail r3 ELISA KIT
F020211 兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG
甲醛缓冲吸收液  100× 100ml|500ml
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·农杆菌AGL1化学感受态细胞
编号：BTN140382
英文名称：E.coli AGL1 Chemical Competent Cell
规格：10×100μL
 AGL1菌株为C58，RecA型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif和羧苄青霉素抗性基因carb，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒 pTiBo542DT-DNA，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件，pTiBo542DT-DNA质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA 顺利转移)。

 本产品为AGL1 农杆菌化学感受态细胞，适用于水稻、杨树、拟南芥等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

基因型：C58 RecA(rifr/carbr)Ti pTiBo542DT-DNA Succinamopine。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1μg(体积不大于10μl)质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2～3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。(注：当平板只含有50μg/mLkan时，28℃培养48小时即可；平板中同时加入50μg/mL kan，20μg/mL rif时，需28℃培养60小时；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90小时)。


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·农杆菌EHA105化学感受态细胞
编号：BTN140383
英文名称：E.coli EHA105 Chemical Competent Cell
规格：10×100μL
 本产品为EHA105农杆菌化学感受态细胞，为C58型背景，核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件，pEHA105(pTiBo542DTDNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。本产品适用于水稻、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1ug(体积不大于10μl)质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2～3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
 注：当平板只含有50μg/mL kan时，28℃培养48 h 即可；平板中同时加入50μg/mL kan、20μg/mL rif时，需28℃培养60 h；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90h。

注意事项：
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/mL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan，若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失，但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

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