革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)价格用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)价格
编号：BTN130950
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern Grade)
规格：10次

想要了解更多关于革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)价格的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·dGTP溶液(2.5mM)
编号：BTN130914
英文名称：dGTP Solution(2.5mM)
规格：2mL
dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2，消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·pUCm-T载体
编号：BTN160101
英文名称：pUCm-T vector
规格：1μg
本产品是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC系列载体改造而成，在pUC载体的多克隆位点处插入特殊的限制性内切酶识别位点，酶切后能在载体的3´端形成悬挂的“T”末端。很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在PCR产物双链DNA 每条链的3´端加上一个突出的碱基A。这样，pUCm-T载体的两端就可以和PCR产物的两端进行正确的AT 配对，在连接酶的催化下，就可以把PCR产物连接到，pUCm-T载体中，形成含有目的片断的重组载体。可以通过蓝白斑筛选有插入片断的重组克隆，大大提高了3´末端A 突出PCR产物的连接、克隆效率。本产品应用于进行TA 克隆，克隆PCR产物。对克隆后的PCR产物可以用M13通用引物进行DNA 测序。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一. 实验准备
1. PCR产物3´末端带有突出的A碱基：Taq、Tth、Ampli Taq、Klen Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物3´末端均带有突出的A碱基。建议扩增的PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳进行回收，再进行连接转化实验。
2. PCR产物3´末端没有突出的A碱基：Pfu、Pwo、Tli或DeepVent等DNA聚合酶具有3´5´外切酶活性，其扩增的PCR产物末端可能不带有3´A，要对这种平末端PCR产物进行克隆，应先对其进行3´末端加A，再进行连接转化实验。

二.连接反应
3.在一个标准的10mL连接反应体系中，加入下列成分：

 

反应组分	10μl反应体系
插入的目的片段	xμL(0.2 pmol)
本产品	1μL(50 ng)
10×连接酶缓冲液	1μL
T4 DNA连接酶	3-5 U
补水到	10 L

 注意:一般最后加入T4 DNA连接酶。
4. 用移液器吹打反应混合液使之混匀后，16-23℃连接1～12小时(或按T4 DNA连接酶供货商提供的操作手册进行连接)。

三．细菌转化和鉴定
5. 将100μl感受态细胞置于冰上解冻后，完全解冻后轻轻将细胞均匀悬浮。
6. 加入上述5μl连接液，轻轻混匀，冰上放置30分钟。
7. 42℃水浴热激90秒，再冰上放置15～20分钟。
8. 加入400μl自备的SOC培养基，37℃ 200～250rpm振荡培养1小时。
9. 4000rpm离心5分钟，用枪头吸掉400μl上清液，用剩余的培养基将细胞悬浮。
10. 将细菌悬液均匀涂布在含20μl的IPTG(100mM)和100μl的X-gal(20mg/mL)的*苄青霉素抗性的自备的LB平板上。(涂布菌液的用量可以根据连接的效率及感受态细胞的转化效率而进行适当的调整。)
11. 将平板于37℃培养1小时，然后倒置培养过夜。(先将平板正向放置1小时，以吸收过多的液体。)

四．筛选
12.转化子的蓝白筛选：
 当外源DNA片段插入到pUCm-T载体中后，由于外源DNA的核酸序列存在改变了LacZ基因的编码，从而影响了其产物β-半乳糖苷酶α-片段的活性，因此重组克隆在-gal/IPTG 平板上呈现为白色，而非重组克隆呈蓝色。选择在IPTG/X-gal 平板上生长的白色菌落，用牙签挑至含*苄青霉素的液体培养基，37℃培养过夜。
13.转化子的鉴定：
1)用上述培养的白色菌落的菌液抽提质粒，用PstI单酶切或用其它合适的酶切,琼脂糖凝胶电泳检查片段大小，确定是否含有目的片段。
2)用M13通用引物或其它合适的引物直接进行测序来确定是否含有目的克隆。

操作提示：
1. PCR产物的纯度：
 连接反应前需用琼脂糖凝胶电泳检测PCR反应产物，如果电泳检测PCR产物条带弥散，或出现非特异条带，则需要切下目的条带，用胶回收试剂盒对目的片段进行回收。若PCR产物电泳检测只有预期大小的明显条带，也应使用PCR产物纯化试剂盒直接纯化PCR产物，以除去引物二聚体。不经纯化的PCR产物在某些条件下可直接用于连接，但由于引物二聚体和PCR产物中其它物质的影响，造成含有插入片段的阳性克隆数减少，因而需要筛选很多克隆方可得到含有目的PCR产物的阳性克隆。
2. 平端PCR产物
 具有校正活性的热稳定性DNA聚合酶如Pfu、Pwo、Tli在进行PCR扩增时产生平端PCR产物。这种平端PCR产物可以进行3´末端加A 尾后连接到pUCm-T载体中，采用这种方法进行连接，可大大提高克隆的效率。
3.优化插入片段和载体的摩尔比
1)pUCm-T载体优化的插入DNA片段和载体的摩尔比为3:1，采用3-10:1的连接比例也可成功进行连接。如果你的PCR产物开始连接的不理想，则有必要优化连接比例。
2)PCR产物的量可采用以下公式进行换算：
PCR片段的量(ng)= [加入载体的量(ng)×插入片段大小(kb)/载体大小(kb)]×插入片段和载体的摩尔比
4.筛选含插入片段的转化子
插入片段成功克隆到pUCm-T载体中，可阻断β-半乳糖苷酶的编码序列，因而重组克隆可在指示培养基上通过颜色进行筛选。大多数情况下含有PCR产物的克隆菌为白色，如果PCR片段和LacZ基因在同一读码框内，即PCR片段碱基数是3的整数倍(含3´-A)，并且读码框无终止密码子，则重组克隆菌可能为蓝色。

质粒图谱：



革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)价格关键词：革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级),BTN130950,Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern


·大肠杆菌DNA连接酶
编号：BTN120419
英文名称：E.coli DNA Ligase
规格：1000U
本酶催化相邻DNA链的5´-P末端和3´-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，需NAD作辅酶。本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA，但不能催化DNA的5´-P末端与RNA的3´-OH末端以及RNA之间的连接。其工作原理图如下：


产品用途：
1．DNA片段和载体DNA的连接。
2．DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。
3．cDNA的第二条链的合成。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在20μl的连接反应体系中，6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位。

纯度：
1．360U的本酶和1μg的λ-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．360U的本酶和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发变化。
3．360U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

备注：BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

·Bouin固定液
编号：BTN130819
英文名称：Bouin Fixative Solution
规格：250mL
Bouin氏液是组织化学中最常用的混合型固定液之一，由苦味*(代"酸")饱和液(1.22%)、甲醛和冰醋酸按15:5:1的比例混合而成。此固定液对大多数组织固定效果良好。

产品特点：
1．其渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，染色效果好。
2．适用范围广，特别适合于富含结缔组织的标本和胚胎标本。能够软化皮肤角质，并可以用于植物组织的固定。
3．因为本产品含有苦味*(代"酸")，会溶解火棉胶，所以如果用于火棉胶包埋，必须进行洗脱苦味*(代"酸")处理。
4．标本尺寸不可太大，一般窄边不大于5mm。

储存条件：常温运输及保存，保存期为一年。

使用方法：
1．标本修块，厚度一般不超过5mm，置入本产品内固定8～24h(根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异)。
2．固定后用70%～80%乙醇洗涤。


革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)价格关键词：革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级),BTN130950,Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern

67-97-0 维生素D
2-*-1,3-二甲基咪唑鎓六*磷酸盐 24-Epicastasterone 101385-69-7
托普霉素 D-Mannosamine HC1 32986-56-4
ARB12708 大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)含量分析 Rat phosphatidylinositol antibody igg/igm,pi ab-igg/igM ELISA KIT
二甲*(代"酚")橙 Methyl-β-cyclodextrin  63721-83-5
003002 狗血浆
ARB12793 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA检测服务 Mouse beta-endorphin receptor,β-epr ELISA KIT
ARB12183 大鼠白细胞介素1β(IL-1β)Elisa定量检测 Rat IL-1β ELISA KIT
噻唑蓝 Dimethyl sebacate 298-93-1
CYB163056 羊抗马IgG-RBITC
E0613 抗凝裂解驴血(无菌) 100ml/500ml
BTN120517 零诱导培养基 Zero-induction Medium
CYB165019 生物素化羊抗兔IgG
F060101 艾滋抗原
2,4,6-三甲基*甲酰二*氧磷 Phenylfluorone 75980-60-8
ARB11736 人登革热抗体(DF-Ab)ELISA代测服务 Human dengue fever antibody,df ELISA KIT
矿物油 Potassium citrate monohydrate 8042-47-5
BL0803 山羊IgG抗原干粉(原装)

我公司正在打折促销DNA纯化全系列产品，恭候您的咨询选购革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)价格。