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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bacteria DNA column extraction kit(with lysozyme)
- 库存:
584
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式细菌DNA提取试剂盒(含)厂商,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:柱式细菌DNA提取试剂盒(含)厂商
品牌:百奥莱博
编号:BTN60802B
规格:50次
产地:国产|进口
英文名:Bacteria DNA column extraction kit(with lysozyme)
本试剂盒可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到20分钟。
2.产率一般在5-20μg/mL过液培养的饱和菌液(108-109个细胞)。
3. OD260/280一般在1.8以上,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌,也可以使用菌落。
6. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
7. 安全无毒,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。
8. 本产品分A型(无溶菌酶,适用于革氏阴性细菌)和B型(含溶菌酶,适用于革氏阳性细菌)。
试剂盒组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 溶菌酶干粉 | 无 | 600mg |
| 溶液A | 15ml | 15ml |
| 溶液B | 7.5ml | 7.5ml |
| 溶液C | 30ml | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml | 10ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
一: 对革氏阴性细菌样品,只需用A型
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL离心管中,12000rpm室温离心1min沉淀细菌,弃上清。
2. 加入300μL预热的溶液A到细菌沉淀中,充分吹打均匀。
3. 再加入150μL预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠,可以采取称量方法取用,150μL约等于150-160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
5. 加入200μl自备*仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
6. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
7. 加入1.5倍体积(约0.7mL)的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
8. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
9. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
10. 重复上步操作一次。
11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
12. 加50-100μL通用洗脱液,室温放置3~5分钟。
13. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
二: 对革氏阳性细菌样品,需用B型(含溶菌酶)
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12000rpm室温离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶,配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存,每次只用一小管),颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间,自己摸索)。
2. 12000rpm室温离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
三:其他注意事项
1.可以直接使用细菌菌落提取DNA,操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中,后续操作同上。
2.从单个菌落中提取到的DNA较少,所以只用30μL通用洗脱液洗脱。
使用效果:
图注:用本产品提取1.0mL过夜培养的E.coli Tg1细菌,DNA最后溶于100μL TE中,取20μL上样。M表示全长的λDNA,其余均为提取的样品DNA。
关于柱式细菌DNA提取试剂盒(含)厂商的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
五肽胃泌素 Hot Taq DNA Polymerase 5534-95-2
PY01-143 脱氧胆酸 25克
4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷 LPS 6160-80-1
ARB12799 小鼠β*基己糖苷酶A(β-Hex A)含量测试 Mouse β-hexosaminidase a,β-hex a ELISA KIT
ARB10836 人抗环胍*酸肽抗体(CCP)Elisa定量检测 Human anti-cyclic citrullinated Peptide,ccp ELISA KIT
CYB161056 鸡IgG(冻干粉)
ARB12702 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)尿液中含量检测 Rat glycogen synthase kinase,gsk ELISA KIT
ARB13437 鸡甲状旁腺激素(PTH)含量测试 Chicken paRathyroid hormone,pth ELISA KIT
F030310 胶体金标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*GOLD
BTN30 常用PCR引物 Common PCR Primer
对甲*磺酸吡*(代"啶")盐 Crystal violet 24057-28-1
四正丁基碘化铵 D-LDH 311-28-4
F030501 FITC标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*FITC
柱式细菌DNA提取试剂盒(含)厂商关键词:BTN60802B,柱式细菌DNA提取试剂盒,柱式细菌DNA提取试剂盒(含),Bacteria DNA column extraction kit(with lysozyme)
·考马斯亮蓝R-250
编号:BTN131122
英文名称:Coomassie Blue R-250
规格:10g
考马斯亮蓝R-250是考马斯亮蓝系列染料中的一种。R表示其干粉颜色是蓝色偏红,250表示其纯度。其*盐的分子式是C45H44N3O7S2Na,分子量为826。在酸性条件下,染料的硫*(代"酸")基团能跟蛋白的碱性*基酸结合,故常用于主要用于SDS-PAGE染色。考马斯亮蓝R-250 比G-250少两个甲基基团,不能直接替换使用。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·博莱霉素溶液
编号:BTN120704
英文名称:Bleomycin Solution
规格:1mL
本产品浓度为100mg/mL博莱霉素的水溶液。博莱霉素(争光霉素;Bleocin ;Zeocin),分子式:C55H83N19O21S2Cu,分子量:1137.41,外观为绿色液体。博来霉素为弱碱性物质。易溶于水、甲醇,微溶于乙醇,是一种属于争光霉素家族的糖蛋白抗生素,在体内能作用于大多数细菌(包括E. coli)、真菌(如:酵母菌)、植物细、动物细胞。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
·平末端DNA加T试剂盒
编号:BTN60106
英文名称:dT Tailing Kit
规格:50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dTTP存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dT尾巴,主要用于制备T载体。其流程图如下:
产品特点:
1. 简单,2X Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA成本polymerase等酶合成的DNA片段。
3. 加T后的载体可以作为T载体使用。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA olymerase(5U/μL) | 50μl |
| 2×dT Tailing Buffer | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:反应前纯化处理:
平末端DNA片段或平末端质粒DNA可以采取胶回收和酚/*仿抽提法等常规方法纯化,最后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。必须注意的是,用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/*仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加T反应时,切除掉加上的T尾巴,干扰反应。
二:加T反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
| 回收的DNA片段 | 0.2-2μg |
| 2×dT Tailing Buffer | 25μL |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时 | |
三:反应后处理
加T反应后,Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合,所以必须酚/*仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再用酚/*仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即可用于后续连接反应。
柱式细菌DNA提取试剂盒(含)厂商关键词:BTN60802B,柱式细菌DNA提取试剂盒,柱式细菌DNA提取试剂盒(含),Bacteria DNA column extraction kit(with lysozyme)
11089-65-9 衣霉素 Tunicamycin
ARB10481 人白介素1β转换酶(ICE)含量测试 Human interleukin 1β converting enzyme,ice ELISA KIT
ARB13728 兔热休克蛋白90(HSP-90)Elisa分析 Rabbit heat shock protein 90,hsp-90 ELISA KIT
BL0766 AMV Reverse Transcriptase 反转录酶
ARB10028 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)酶联免疫定量检测 Human 6-keto-prostaglandin f1a,6-k-pgf1a ELISA KIT
ARB13699 兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)Elisa分析 Rabbit urokinase-type plasminogen activator receptor,plaur/upar ELISA KIT
9068-59-1 中性蛋白酶
ARB10536 人主要穹窿蛋白(MVP)含量检测 Human major vault protein,mvp ELISA KIT
细胞色素C Sodium dodecanoate 9007-43-6
F030809 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*BIOTIN
ARB10017 人26S蛋白酶体(26S PSM)代做ELISA实验 Human 26s proteasome,26s psm ELISA KIT
松二糖 Hexylamine 547-25-1
ARB10643 人血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt-1)Elisa方法检测 Human vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,vegfr-1/flt1 ELISA KIT
BOC-L-*丙*酸 Apramycin sulfate 13734-34-4
ARB11736 人登革热抗体(DF-Ab)ELISA代测服务 Human dengue fever antibody,df ELISA KIT
ARB10929 人吡哆醛/吡哆醇维生素B6磷酸酶(PDXP)酶标法分析 Human pyridoxal/pyridoxine vitamin b6-phosphatase,pdxp ELISA KIT
F030711 BIOTIN标记羊抗乙肝核心抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBcAg*BIOTIN
丙*(代"酸")* Ethyl oxamate 4075-81-4
ARB12031 大鼠β羟丁酸(βOHB)定量分析 Rat beta-hydroxybutyric acid,β-ohb ELISA KIT
SJ0324 G-1-P D-葡萄糖-1-磷酸二*
SJ0683 50bp plus
BL0842 羊抗兔IgG纯化抗体
北京百莱博科技有限公司是DNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购柱式细菌DNA提取试剂盒(含)厂商。
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文献和实验,我们想看看是否存在一个临界点,即污染DNA的背景水平在实际的S.bongori含量中占主导地位。为了排除污染问题仅限于单个DNA提取试剂盒制造商的可能性,我们使用四个不同制造商的试剂盒从稀释系列中提取DNA并进行比较。 低生物量微生物群样品特别容易受到影响在我们的研究结果中,我们不仅发现了S.bongori,还发现了各种各样的污染细菌,其中许多来自土壤/水,还有一些皮肤殖民者。样品越稀释(即添加的细菌生物量越低),污染对测序结果的影响越大。污染物DNA占主导地位的稀释样品中含有约100000
3.最好根据厂商的protocol来操作实验,这是实验成功的保证。如Cell signaling会建议用含5%BSA 的TBST稀释phospho-p38等抗体,效果不错,而不是用常见的含5%non-fat milk的TBST。 4.抗体的稀释倍数也要适当。不同厂商也会有不同要求。 5.研究完某一蛋白的磷酸化情况后最好也要研究一下该蛋白总的表达量。如压完phospho-p38抗体后,我会把相同的membrane做strip后再压p38,然后再strip一次,再压内标actin
1.迅速灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活: 1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块必须保证足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以确保瞬间令RNA酶失活。3)立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中。它是一种水相、无毒的收集试剂,能立即稳定并保护完整、未冻结的组织和细胞样品中的 RNA。关键要点是组织样品切片一定要够薄(2.使用正确的细胞或组织储存条件在样品用液氮
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