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- 上海
- L71155
- 2025年10月17日
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4℃,12个月
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4℃,12个月
- 英文名：
详见说明书
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充足
- 供应商：
上海禾午生物科技有限公司
- CAS号：
无
- 规格：
100ml
双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法，双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色。所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为 540nm。双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响，另外，对于血清总蛋白的双缩脲分析，胆红素、脂类、血红蛋白、葡聚糖具有一定干扰作用。 双缩脲总蛋白试剂由硫酸铜、酒石酸钾钠等组成，在 10～ 160mg/ml 浓度范围内有较好的线性关系，是对蛋白质的精确定量分析试剂。
操作步骤(仅供参考)：
取1ml 蛋白标 准配制液或稀释液加入到蛋白标准(BSA)中，充分溶 解后配 制成160mg/ml 的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 作为溶解 BSA 稀释液。
2、将标准品按 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到 96 孔板的标准品孔，加稀释液补足至 20μl。
3、加适当体积待测蛋白样本到 96 孔板的样品孔中。如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液不同，应在待测蛋白样本孔中加入 20μl 稀释液；如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液相同，无需在待测蛋白样本孔中加入 20μl 稀释液。
4、各孔加入 200μl 双缩脲总蛋白试剂, 室温放置 10～15min。
5、测定 540nm 波长处的吸光值，如无 540nm，520～562nm 之间的波长也可。
6、根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
用途：专门用于双缩脲法蛋白定量,通过1、 酶标仪或分光光度计进行蛋白的精确定量分析注意事项：主要由硫酸铜、酒石酸钠、碘化钾等组成。
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文献和实验蛋白质显色反应之一，即在蛋白质的碱性水溶液中加数滴稀硫酸铜溶液，则显紫蓝～紫红色。除二肽外，肽也会产生同样的反应。由于双缩脲（NH2－CONHCONH2）也显示同样的反应，故以此命名。也可用于蛋白质的定量测定，但灵敏度低。为了克服这缺点，可以和O.Folin的酚试剂反应结合起来使用。
（一）实验原理 双缩脲（NH3CONHCONH3）是两 个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1~10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨
一、原理 蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与二价铜离子作用生成紫红色的络合物，产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质的含量成正比，但双缩脲反应并非蛋白质特有的颜色反应，分子中含二个以上肽键者有此反应。 二、双缩脲 试剂 未失结晶水的硫酸铜（CuSO 4· 5H 2 O）3.0g溶于500ml新鲜制备的 蒸馏 水或刚煮沸冷却的去离子水中，加酒石酸钾钠（NaKC
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