双缩脲总蛋白试剂

双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法，双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色。所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为 540nm。双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响，另外，对于血清总蛋白的双缩脲分析，胆红素、脂类、血红蛋白、葡聚糖具有一定干扰作用。 双缩脲总蛋白试剂由硫酸铜、酒石酸钾钠等组成，在 10～ 160mg/ml 浓度范围内有较好的线性关系，是对蛋白质的精确定量分析试剂。



操作步骤(仅供参考)：
取1ml 蛋白标 准配制液或稀释液加入到蛋白标准(BSA)中，充分溶 解后配 制成160mg/ml 的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 作为溶解 BSA 稀释液。
2、将标准品按 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到 96 孔板的标准品孔，加稀释液补足至 20μl。
3、加适当体积待测蛋白样本到 96 孔板的样品孔中。如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液不同，应在待测蛋白样本孔中加入 20μl 稀释液；如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液相同，无需在待测蛋白样本孔中加入 20μl  稀释液。
4、各孔加入 200μl 双缩脲总蛋白试剂, 室温放置 10～15min。
5、测定 540nm 波长处的吸光值，如无 540nm，520～562nm 之间的波长也可。
6、根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。


用途：专门用于双缩脲法蛋白定量,通过1、 酶标仪或分光光度计进行蛋白的精确定量分析注意事项：主要由硫酸铜、酒石酸钠、碘化钾等组成。