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上海禾午生物科技有限公司
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100T
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文献和实验AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡
基本原理: 吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观察原代细胞均可。吖啶橙对活原代细胞毒性小,配成1×10-4 —2×10-4 可用于直接染色活原代细胞和进行荧光显微镜观察,但不持久,用固定染色观察法效果更好。 材料: 1. 盖片单层
吖啶橙区分活细胞 DNA 和 RNA 的荧光组织化学染色法 吖啶橙《acridine oran。AO)属于三环杂芳香类异嗜性阳离子荧光染料,主要以两种方式与核酸结合,一是嵌入核酸双链的碱基对之间;二是与单链核酸的磷酸发生静电相互作用。当吖啶橙与DNA或RNA结合时,最大发射波长分别为525nm或650nm,产生绿色荧光或橙红色荧光,因此,吖啶橙是研究核酸的一种常用荧光组织化学染料。下面介绍应用吖啶橙区分活细胞和原位组织细胞DNA和RNA荧光组织化学染色法。 1.溶液
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