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- 2025年10月31日
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- 英文名：
质粒提取
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- 供应商：
上海三抒生物科技有限公司
- 规格：
200次
三抒生物质粒小量抽提试剂盒(Plasmid Mini Preparation Kit, Plasmid Miniprep Kit)是一种用于从大肠杆菌中进行小量质粒快速抽提的离心柱式试剂盒。
本试剂盒适用于常用的EndA-菌株DH5α、JM109和XL-1 blue等。对于EndA+菌株如JM110、BL21(DE3)、TG1和HB101等，可以顺利完成质粒抽提，但从EndA+菌株中抽提获得的质粒会有轻微的核酸酶污染，如果在内切酶缓冲液中37℃孵育1小时会导致质粒全部降解。从EndA+菌株中抽提质粒时推荐使用碧云天的D0007S/D0007M 质粒小量抽提试剂盒(通用型)、D0020 质粒中量抽提试剂盒(通用型)和D0028 质粒大量抽提试剂盒(通用型)。
野生型大肠杆菌中表达Endonuclease I，能切割并降解双链DNA。编码Endonuclease I的基因是endA，如果endA突变失活，其基因型会被标注为endA1，相应的突变菌株被称为EndA-菌株，而野生型菌株则被称为EndA+菌株。常见的EndA-和EndA+菌株参见附表1。从EndA+菌株中抽提的质粒，微量核酸酶和质粒结合而容易被共纯化，导致容易降解。
本试剂盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间，结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化。无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需不足30分钟即可完成。
每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。每个纯化柱可用于抽提1-5毫升用LB培养过夜的大肠杆菌。抽提所得质粒的OD260和OD280比值一般在1.80左右。抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。抽提获得的质粒DNA的OD260和OD280比值也会因菌种不同等原因而略有波动。
本试剂盒抽提所得到的质粒可直接用于转染细胞，DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化细菌，内切酶消化等。
保存条件：
室温保存，一年有效。
注意事项：
第一次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加到溶液I (悬浮液)中，混匀，并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
第一次使用前在每瓶溶液IV (洗涤液)中加入54ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
温度较低时，溶液II和溶液III可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀，37℃水浴加热溶解，混匀后使用。溶液II请勿过分剧烈混匀，否则会产生大量气泡。
溶液II使用完后，一定要盖紧瓶盖，防止被空气中二氧化碳酸化。
溶液II有强碱性，溶液II、溶液III和溶液IV对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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上海三抒生物科技有限公司将一直致力于生物、化学、医药、精细化工、食品工业、现代农业、地质矿产、生命科学、环境保护、疾病控制、新能源等领域的长远发展，一如既往地秉承“专业的”服务精神，“真诚的”服务理念和“客户至上”的服务宗旨，更好地服务于全体用户，为用户提供性价比最高的产品和最专业的技术服务！
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