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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃保存六个月,避免反复冻融;干冰运输
- 保质期:
-80℃保存六个月,避免反复冻融;干冰运输
- 英文名:
TOP10 Chemically Competent Cells
- 库存:
大量
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
ml/盒
E. coli TOP10菌株是一种常用于质粒克隆的菌株,其基因型为 F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ△M15 △lacX74 recA1 ara△139△(ara-leu)7697 galU galK rpsL(StrR) endA1 nupG。φ80 lacZ△M15基因的产物可通过与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端α互补,实现蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。本产品是经特殊工艺处理得到的TOP10化学感受态细胞,使用pUC19质粒检测,转化效率可高达108 cfu/μg DNA以上。
保存条件
-80℃保存六个月,避免反复冻融;干冰运输
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文献和实验TOP10 chemically competent cells
Overview This protocol is a variant of the Hanahan protocol [1] using CCMB80 buffer for DH10B, TOP10 and MachI strains. It builds on Example 2 of the Bloom05 patent as well. This protocol has been tested on TOP10, MachI and BL21(DE3) cells
Transforming chemically competent cells
Method Thaw TSS cells on ice. Add DNA, pipette gently to mix (1μl of prepped plasmid is more than enough). Note: If you are adding small volumes (~1μl), be careful to mix the culture well. Diluting the plasmid
Preparing chemically competent cells
Materials Plate of cells to be made competent TSS buffer LB media Ice Glassware & Equipment Falcon tubes 500μl Eppendorf tubes, on ice 200ml conical flask 200μl pipetman or repeating
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