- ¥890
- YANJIN
- 国产/进口
- YRA103-02
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温
- 保质期：
见产品包装
- 库存：
500
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
50次
EASYspin RNA Rapid Tissue and cell Kit
产品信息：
试剂盒组成 保存
保存条件：本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
产品介绍：
独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞 RNA 酶，然后用乙醇调节结
合条件后,RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的 RNase free H20 将纯净 RNA 从硅基质膜上洗脱。
自备试剂：乙醇, β-巯基乙醇
注意事项：
1.需要自备一次性注射器，研钵。RA105 EASYspin 组织 细胞RNA快速提取试剂盒
-MBI2.裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本公司的EASYspin 系列RNA 提取产品，在大多数 RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳 EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的
mRNA 表达量分析如荧光定量 PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
- 选用跨内含子的引物,以穿过 mRNA 中的连接区,这样 DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
- 选择基因组DNA 和 cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
- 操作步骤：
提示：
ð 第一次使用前请先在漂洗液 RW 瓶和 70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!ð 操作前在裂解液RLT 中加入β-巯基乙醇至终浓度 1%，如 1 ml RLT 中加入 10μl β-
巯基乙醇。此裂解液建议现用现配。配好的 RLT 4℃可放置一个月。
- 组织培养细胞
- 收集<107 悬浮细胞到一个 1.5ml 离心管，对于贴壁细胞，孔板培养可以直接裂解， 细胞瓶培养应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。
- 2,000rpm 离心 10 sec（或者 300g 离心 5 min），使细胞沉淀下来。完全吸弃上清，留下细胞团，注意不完全弃上清会稀释裂解液导致产量纯度降低。
- 轻弹管壁将细胞沉淀完全松散重悬， 加入 350μl（<5x106 细胞） 或者 600μl
-
- 用带钝针头的一次性 1ml(配 0.9mm 针头) 注射器抽打裂解物 5-10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆 30 sec),可以剪切 DNA,降低粘稠度和提高产量。
- 接操作步骤项下 3。
- 动物组织（例如鼠肝脑）
- 电动匀浆： 新鲜组织用解剖刀迅速切成小碎块, 加入 350μl(<20mg 组织) 或者
-
- 液氮研磨+匀浆：在液氮中研磨组织成细粉后，取适量组织细粉(20mg/30mg)转入 装有 350μl/600μl 组织裂解液 RLT 的 1.5ml 离心管中, 用手剧烈振荡 20 sec，充分裂解。用带钝针头的一次性 1 ml(配 0.9mm 针头) 注射器抽打裂解物 10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30 sec),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
- 将匀浆后裂解物 12,000rpm 离心 3 min,沉淀可能存在的裂解困难的碎片或者不溶物,
-
- 接操作步骤项下 3。
- 较精确估计裂解物(上清)体积,加入等体积的 70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!）,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
- 立刻将混合物(每次小于 700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱 RA 中，（吸附柱放入收集管中）12,000rpm 离心 60 sec，弃掉废液。
- 加 350μl 去蛋白液 RW1，室温放置 30 sec，12,000rpm 离心 30 sec，弃掉废液。将吸附柱 RA 放回收集管中。
- DNaseI 工作液的配制：取 10μl DNaseI 储存液放入新的 RNase-free 离心管中，加入
- 向吸附柱 RA 中央加入 80μl DNaseI 工作液，室温放置 15 min（一般情况下室温放置可得到较好的消化效果，如果室温效果不佳可选择在 37℃放置 15 min）。
- 加 350μl 去蛋白液 RW1，室温放置 30 sec，12，000rpm 离心 30 sec，弃掉废液。将吸附柱 RA 放回收集管中。
- 加入 500μl 漂洗液 RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心 30 sec，弃掉废液。加入 500μl 漂洗液 RW,重复一遍。
- 将吸附柱 RA 放回空收集管中，12,000rpm 离心 2 min，将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
- 取出吸附柱 RA，放入一个 RNase free 离心管中，根据预期 RNA 产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free wate（r 事先在65℃水浴中加热效果更好），室温放置1 min，
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文献和实验是TRIpure（RN01）加氯仿，异丙醇，70%乙醇，DEPC处理的水。(3) RN03 RNApure 超纯总RNA快速提取试剂盒。这个等于是TRIzol加离心柱子，在TRIzol的基础上加了离心柱子，速度更快，纯度更高，操作更简单。等于是TRIpure（RN01）加离心柱子。(4) RN07 EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒。这款等于是Qiagen的74104完全一样，它的优点在于不用苯酚，氯仿等毒性物质，速度最快，但是残留DNA可能稍多，必要时候还可能要用DNA
RNApure 离心柱型超纯总RNA提取试剂盒+漂洗液RD：RNApure的裂解液通过氯仿分层后去除绝大部分的DNA，过柱几次漂洗去蛋白和杂质，然后用漂洗液RD特异性的洗去残留的DNA，最后洗脱的RNA纯度极其的高，可以说是目前提取高质量RNA最好的方法。RNApure原价：680元/50次，体验价：544元/50次，漂洗液RD原价：100元/40ml，体验价：80元/40ml. 有些难以提取的样本有什么好的试剂盒
了长足的发展，比如BioTeke公司的荧光定量系列产品就以其优良的品质和亲民的价格越来越受到国内用户的青睐，目前还可以申请试用装。为了证明其荧光定量系列产品的品质，BioTeke公司特邀请了山东大学细胞发育遗传学实验室进行了BioTeke的SYBR GREEN I实时荧光定量产品和T公司的实时荧光定量试剂的比对实验。具体实验如下：实验材料小鼠肝脏组织山东大学实验室提供样品cDNA实验方法RNA提取：Bioteke RNApure高纯总RNA提取试剂盒，操作步骤请参考说明书。目的基因：小鼠管家基因β–
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