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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
- 保质期:
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
- 英文名:
2×SuperStar PCR Mix with Loading Dye
- 库存:
大量
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
ml/盒
本产品为预混的含有优化浓度的SuperStar超保真DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、高保真反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染几率。PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。
SuperStar超保真DNA聚合酶是一种混合酶,具有5'到3'DNA 聚合酶活性和3'到5'的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的48倍、Pfu DNA Polymerase的6倍。该酶还具有快速的DNA合成速度,其合成速度约相当于普通Taq DNA Polymerase的4倍、Pfu DNA Polymerase的8倍。
本产品有含染料(红色)和不含染料(无色)两种选择。使用含染料的产品在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与300 bp 双链DNA片段相近。
【用途】
• 高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等。
• 高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增
【特点】
• 高保真性:保真性是Taq的48倍, Pfu的6倍
• 高效扩增:可扩增20 kb的长片段
• 批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测
【产品组分】
2 × SuperStar PCR Mix 1 ml
ddH2O 1 ml
2 × SuperStar PCR Mix含有3.0 mM MgCl2, MgCl2在反应体系中的终浓度为1.5 mM。
【保存条件】
-20℃恒温保存一年,小量分装,避免反复冻融
【活性定义】
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74oC、 30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定
义为1个活性单位( U)。
【质量控制】
• 以λ DNA为模板,可以有效扩增20 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增15 kb的基因
• 无内切酶、外切酶污染
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文献和实验5 min 结果:可见Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix试剂对于原核或真核生物DNA均可高效。相较于同类的taq mix的扩增效率更高,且对于高GC含量也可得到很好的扩增。取扩增产物10 μL用1%琼脂糖凝胶电泳如图可见明亮条带。 三、 cDNA扩增 人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA扩增1.2 kbp片段 模板:人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA 200 ng/50 μL Primer: PrimerF
1 0.1-0.5µM Primer 2 0.1-0.5µM 10X Reaction buffer 1X Magnesium 1.0-3.0mM dNTP mix 200 mM each dNTP Thermostable DNA polymerase 1-4 units/100 ml reactionRT-PCR基础 RT-PCR将以RNA为模板的cDNA合成同PCR结合在一起,提供了一种分析基因表达的快速灵敏的方法。RT-PCR用于对表达信息进行
-stop PCR only; see Steps 1-22)SSCP loading dye (for SSCP only; see Steps 23-37)95% (v/v) formamide10 mM NaOH0.25% (w/v) bromophenol blue0.25% (w/v) xylene cyanolTaq DNA polymerase (5 U/µl)TBE Buffer (1X and 5X)Prepare a 5x stock solution in 1 liter
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