小鼠外周血单个核细胞分离液KITLDS1090

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

科镊子提起腹膜，用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS（勿扎到脏器），轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液，收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次，冲洗腹腔，可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项： 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞，且检测目的细胞非红细胞，先

ELISA 实验 FAQs 之试剂盒、样本

，最后取 5μL 2000 倍稀释样本到 245μL 标准品&样本稀释液内，做 50 倍稀释，总共稀释 100000 倍； 每步稀释时，取液量不少于 3μL，稀释倍数不超过 100 倍。每步稀释都需混合均匀。 Q3：大小鼠采血容量？ A3：根据实验方案所需采血量的要求，我们可以选择不同的采血方式。 鼠尾采血法： 取血量较少时，采用此方法。通常选择剪断尾巴进行采血。亦可不剪尾，用 7-8 号注射针头刺入尾静脉采血。 小鼠每次可取血 0.1mL，大鼠每次可取血 0.2~0.4mL，可多次反复采血

小鼠脾脏单细胞悬液制备流程及注意事项

细胞，计数，并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项： 一个正常大小的脾脏，根据经验大约可以得到4×107个细胞，实际细胞数以计数结果为准。 淋巴细胞约占小鼠脾脏裂解红细胞后总细胞量的60%~70%。 未染色的脾脏细胞样本，可以在荧光通道中看到少量（大约百分之零点几）非特异性信号。 若没有组织研磨棒，也可以用注射器里面的推杆替代。用推杆前端的橡皮垫研磨脾脏。 收集的脾脏细胞如需进一步培养，取小鼠脾脏时需置于无菌操作台上。如果只是做普通的流式实验，则可以不考虑无菌环境。 PBS可以用细胞染色染冲液