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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光
- 保质期:
一年
- 英文名:
Hoechst 33258 Stain solution(ready-to-use)
- 库存:
697
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")Hoechst 33258 染色液(即用型)销*(代"售"),我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:Hoechst 33258 染色液(即用型)销*(代"售")
产地:国产|进口
规格:10ml|50mL
英文名:Hoechst 33258 Stain solution(ready-to-use)
编号:QN1321
本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
CAS号:23491-45-4
分子式:C25H24N6O·3HCl
分子量:533.88
储存条件:-20℃避光,有效期一年
Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。
使用方法:
1. 对于固定的细胞或组织:
a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织:
a. 加入适当量Hoechst 33258染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
Hoechst 33258 染色液(即用型)销*(代"售")极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·POPOP
编号:QN0794
英文名称:POPOP (1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene)
规格:1g
本品为闪烁体材料,光谱位移试剂,适用于液体发光光谱。
别名:1,4-双(5-*基-2-噁唑基)*
CAS号:1806-34-4
分子式:C24H16N2O2
分子量:364.40
性状:淡黄色针状结晶
溶解性:不溶于水、乙醇,微溶于甲*,溶于吡*(代"啶")
储存条件:室温
·泰乐菌素
编号:QN0016
英文名称:Tylosin
规格:1g|5g
CAS:1401-69-0
分子式:C46H77NO17
分子量:916.1
别名:太乐菌素;泰乐霉素;泰洛霉素;泰洛星
储存条件:2~8℃
·Bradford法蛋白浓度测定试剂盒
编号:QN1072
英文名称:Bradford Protein Assay Kit
规格:250T
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS的浓度低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。
操作说明:
一.微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品,取10ul,稀释至250ul ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml 5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
二.分光光度计法 如无酶标仪,染色反应可在离心管中进行,反应液混匀后加入比色皿中,使用分光光度计测定吸光值。步骤如下:
1. 取八支(或者更多)干净的10ml离心管,标记上号。
2. 取100ulBSA加入PBS 2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。
3. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取10ml的5×G250染色液,加入40ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
储存条件:密封保存,有效期九个月。
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文献和实验Hoechst33258(或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 (或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液:称取Hoechst33258(或Hoechst33342)1mg,用20ml蒸馏水溶解,过滤,4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液,pH7.0。 固定液:4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化,用PBS洗5min; 或冰冻切片用冰丙酮固定15min,吹干,用PBS洗5min; 或细胞
Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。 5. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。 6. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,尽量避免气泡。使细胞接触封片液,切勿弄反。 7. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。 二、悬浮细胞 1. 离心收集细胞样品于1.5 ml离心管内,加入0.5 ml固定液,缓缓悬起细胞,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。 2. 离心去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次
%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。C. 去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。E. 用PBS
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