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长期
- 英文名:
TRITC Phalloidin
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537
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货罗丹明标记鬼笔环肽优惠价是高品质的蛋白类产品,由北京百奥莱博供应,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多罗丹明标记鬼笔环肽等蛋白类产品请联系我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货罗丹明标记鬼笔环肽优惠价,产品信息:
类别:蛋白类
英文名:TRITC Phalloidin
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 罗丹明标记鬼笔环肽 | QN0267 | 300T |
编号:QN0267
品牌:百奥莱博
规格:300T
产地:国产|进口
英文名:TRITC Phalloidin
本品为TRITC标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。
别名:罗丹明鬼笔环肽
分子式:C60H70N12O13S2
分子量:1231.4
性状:紫色粉末(冻干粉)
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
1. 工作液准备
本品以溶于甲醇的 20µM 储存液形式提供,总量为 300µl。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60ml 的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,-20℃避光冻存,一年稳定。开始实 验前,使用 1×PBS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM。现配现用。
2. 染色步骤
1) 细胞爬片生长 24h,使其密度达到 50%汇合度。
2) 吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3) 使用溶于 PBS 的 4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定 10min。 注意:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4) 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
5) 室温条件下,用丙*(代"酮")(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6) 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
7) 取 200µl 配制好的 TRITC 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30min(通常情况下, 4℃~37℃孵育皆可)。 注意:为了降低背景,可于 TRITC 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥 发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8) 用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5min。
9) 使用 200µl DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30s。
10) 用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫 掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。 注意:也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9)10),简化步骤。
11) 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择 TRITC 激发/发射滤片(Ex/Em=540/570nm)和 DAPI 激 发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。
北京现货罗丹明标记鬼笔环肽优惠价专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:罗丹明鬼笔环肽,罗丹明标记鬼笔环肽,百奥莱博
我公司坚持“品质至上”, 通过与国际知名品牌的合作,选择高品质的产品,提供优质的客户服务。罗丹明标记鬼笔环肽现货供应,以保证产品质量和市场需求率为主要目标,争取能在科研生命道路上能够长久的服务于广大新老客户。
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| QN0113 | 维生素类 | 维生素B1(硫胺素) |
| QN0217 | 植物激素类 | 多效唑 |
| QN0540 | 其他分子生物学试剂 | 尿苷-5"-二磷酸*盐 |
| QN0786 | 其他生化试剂 | DPPH |
| QN1281 | 蛋白质研究 | 变性蛋白预制胶(8~20%) |
| QN0862 | 其他生化试剂 | 橙花叔醇(顺反异构体混和物) |
| QN0357 | *基酸类 | N-乙酰-L-半胱*酸 |
| QN0107 | 维生素类 | 维生素E(天然) |
| QN0136 | 缓冲剂类 | Tris |
| QN0098 | 抗生素类 | 红霉素 |
| QN0195 | 碳水化合物类 | 6-磷酸果糖二* |
| QN0965 | 核酸扩增(PCR) | Pfu DNA 聚合酶 |
| QN0570 | 其他分子生物学试剂 | 三磷酸腺苷二* |
| QN0121 | 维生素类 | 维生素C(抗坏血酸) |
| QN0415 | 酶和辅酶 | 单宁酶 |
| QN0632 | 其他生化试剂 | 六水*化* |
| QN1289 | 细胞凋亡与增殖 | DCFH-DA活性氧ROS荧光探针 |
| QN0218 | 植物激素类 | 噻*隆(TDZ)(进口) |
| QN0017 | 抗生素类 | 亚胺培南 |
| QN0682 | 其他生化试剂 | 碘化硫代乙酰胆碱 |
| QN1111 | 蛋白质研究 | Bis-Acr制胶试剂 |
| QN0613 | 其他生化试剂 | N-乙基顺丁烯二酰亚胺 |
| QN0507 | 酶和辅酶 | 酸性蛋白酶(1:50000) |
| QN0627 | 其他生化试剂 | N,O-双(三甲基硅烷基)三*乙酰胺 |
| QN1233 | 蛋白质研究 | EDTA抗原修复液(1×) |
| QN1105 | 蛋白质研究 | 剥离硅烷 |
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文献和实验微丝的显示方法步骤:1. 用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s; 2. 用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min; 3. 用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次,每次10min; 4. PBS漂洗3次; 5. 用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phalloidin)(1:10)室温中反应15min; 6. PBS漂洗3次; 7. 60%甘油+荧光防淬剂封片; 8. 荧光显微镜观察; 微管的显示方法:
元活动变成永久的红色荧光蛋白表达(图7)。研究人员通过转基因技术将这种新型蛋白导入到实验动物的神经系统中,然后用高强度的紫外光照射动物的大脑,通过检查荧光,找到发红色荧光的神经元,这些神经元即是在紫外光照射期间活跃的神经元。由于紫外光可以对着整个大脑进行照射,所以理论上,人们可以对全脑进行检查。 图7 CaMPARI技术原理(Eric R. Schreiter, et al., Science, 2015)5、jRGECO1a&RCaMP:红色的钙离子敏感蛋白,可以同GCaMP一起使用,标记同一
病毒的六十个位点进行罗丹明B标记,其标记效率达到100%。 点击化学在多肽合成中最早期的应用来自Meldal及其同事们的工作,他们将这类反应成功引入到多肽固相合成中[2],而类似地,Ghadiri等则利用点击反应来高效合成环状多肽[3]。 将多肽或蛋白与高分子进行偶联的工作也不做少数,以期得到功能化的高分子材料或性能改善的生物分子。Lutz课题组[4]将通过ATRP制备的结构确定的聚合物与RGD(细胞黏附序列)或TAT(蛋白转导结构域)的短肽通过点击环加成反应进行偶联,实现了高分子材料的功能
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