5×加A反应液现货价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括5×加A反应液现货价格在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：5×加A反应液现货价格
品牌：百奥莱博
规格：20次(200μl)
编号：RFT097
产地：国产|进口
本品由pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段，如该平末端DNA片段需要和T载体相连接，需要先利用加A反应液在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。本MasterMix提供了加A尾需要的所有成分，可以在20分钟左右完成整个过程。用于平末端片段的加A反应。

使用方法：
1、平末端PCR产物用PCR产物纯化试剂盒(无非特异扩增；货号RTP2202)或凝胶回收试剂盒纯化(有非特异扩增，货号RTP2201)回收。
2、纯化后的平末端DNA片段按照以下反应体系加A，全量为50μl：
平末端DNA片段——————0.5～5μg
5×加A反应液-——————10μl
ddH2O——————————up to 50μl

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

更多有关5×加A反应液现货价格的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·超低分子量蛋白Marker III(3.4～100kd)
编号：RFT046
英文名称：μltra Low Molecμlar Weight Protein Marker III
规格：10T(50μl)
本产品包含5种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.4kD-100kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。



使用说明：
第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本产品为即用型，融化后既能使用，不能95℃加热处理。

一. 制胶：
I 配制分离胶
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4．静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一 (一块0.75mm mini胶用量)

 

	分离胶	浓缩胶
	18％T, 5%C /6.0ml	5％T, 3.3%C/2 ml
40% PAA(19:1)	2.7 ml	/
40% PAA (29:1)	/	0.25 ml
4×凝胶缓冲液	1.5 ml	0.5 ml
乙二醇(电泳级)	1.8ml	/
ddH2O	/	1.25 ml
10％APS	50-65μl	20μl
TEMED	6μl	2μl

注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2．加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4．静置30-60分钟装待凝胶聚合

二. 电泳：
1. 取一管分装好的Marker样品，彻底融化，不要加热处理，充分混匀后备用。
2. 电泳前，将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液，轻柔拔出梳子，将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液处理)加入点样孔，根据表二条件进行电泳，至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
表二 多肽电泳条件

恒电压	150 V
起始电流	45-55 mA
结束电流	10-15 mA
电泳时间	2-3小时

三. 染色
根据常规实验步骤进行染色和观察。

储存条件：-20℃,有效期12个月。


5×加A反应液现货价格关键词：RFT097,5×加A反应液,5×A-plus MasterMix

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