蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 现货价格

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名称：蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物蛋白提取用) 现货价格
产地：国产|进口
英文名：Protease inhibitor cocktail for mammalian cell and tissue extracts
规格：1ml|5×1ml
编号：RFT195
品牌：百奥莱博
蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用)是一种用于哺乳动物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(100mM AEBSF, 80μM Aprotinin,5mM Bestatin,1.5mM E64,2mM Leupeptin and1mM Pepstatin A in DMSO)，并提供独立包装的0.5MEDTA。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。

哺乳动物细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。

本产品为经优化和测试的用于哺乳动物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及*基肽酶抑制剂。

本产品使用便捷，通常以1:100的比例分别把蛋白酶抑制剂混合物和0.5MEDTA加入裂解液中，如用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA。

本产品可以有效抑制哺乳动物细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性，如丝*酸蛋白酶、*基肽酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆抑制剂，其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作为PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Aprotinin是丝*酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂；Bestatin是*基肽酶可逆抑制剂；E64是半胱*酸蛋白酶不可逆抑制剂；Leupeptin是丝*酸和半胱*酸蛋白酶可逆抑制剂；Pepstatin A是天冬*酸蛋白酶可逆抑制剂；EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂。


使用方法：
1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液，使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。根据需要，0.5M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中(如用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA)。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后，就可以开始进行哺乳动物组织的裂解和蛋白提取。

注意事项：
1、蛋白酶抑制剂混合物尽量避免反复冻融，第一次使用后，可按照每次使用量分装冻存。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后，就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

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·36KD蛋白Marker
编号：RFT040
规格：10mg
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质，分子量大小为36kD，可以用来判断 SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本Marker以干粉状态提供。

使用方法：
1、配制10mg/ml 36kD蛋白Marker母液：取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液

 

配制量	浓度	36KD母液(10mg/ml)	超纯水	5×DualColor蛋白上样缓冲液
10μl	0.2 μg/μl	0.2μl	7.8μl	2μl
50μl	0.2 μg/μl	1μl	39μl	10μl
100μl	0.2 μg/μl	2μl	78μl	20μl

3、取配制好的溶液彻底混匀后，95℃处理5分钟立即上样电泳，每次上样10μl。
4、电泳结束后，染色，观察结果。

储存条件：-20℃。


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·GST标签抗体
编号：RFT171
英文名称：Mouse anti-GST Monoclonal antibody
规格：20μl
小鼠抗GST单抗克隆IgG，抗体推荐用于重组蛋白GST标签检测，不管GST 位于重组蛋白N 端或者C 端。本品采用蛋白A纯化自小鼠腹水，浓度为1mg/ml，

推荐应用比例(最优稀释比例依不同实验具体情况而定)：
Western Blot————1:3000～1:50000
ELISA-———————1:5000～1:200000

储存条件：-20℃

·胰酶细胞消化液
编号：RFT187
英文名称：Trypsin-EDTA Solution
规格：100ml
胰酶细胞消化液含0.25%胰酶(Trypsin)和0.02%EDTA，不含Ca2＋和Mg2＋。该消化液已经过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点，通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

使用方法：
1、贴壁细胞的消化：
a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b.加入少量胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化，或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液；加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。
e.如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

2、组织的消化：不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项：
1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。

储存条件：4℃，有效期12个月。

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