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- 2026年01月08日
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 适应物种：
人
- 检测范围：
0.48ng/m/L
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
定性检测
- 标记物：
人血清或血浆
- 样本：
人血清或血浆
- 供应商：
科润达
- 库存：
大量
- 规格：
96T
查加斯病IgG ELISA检测试剂盒
ELISA检测试剂盒
| RE58691 | Chagas IgG 查加斯病 IgG |
96T | 询价 | ELISA | 德国IBL |
通用名称：恰加斯（克氏锥虫）IgG检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Chagas (Trypanosoma cruzi) IgG ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
试剂盒可用于人血清或血浆（柠檬酸）中抗克氏锥虫IgG抗体的定性检测。
【前言简介】
克氏锥虫发生在中南美，被携带寄生虫的臭虫叮咬导致感染。疾病经历多个阶段，并且引起慢性疾病。在南非有大约400W到500W人正在经受这种疾病的折磨。10%的患者最后会导致致命的伤害，尤其是婴儿及新生儿。
叮咬并不直接传染，而是臭虫粪便通过皮肤损伤传染寄生虫。新生儿可能在子宫内被感染。血液也可能会传播。
1-2%的受感染人群会在1-4周的潜伏期后表现出症状。15岁以下儿童是主要的被影响人群。引起急性发热，腹泻，胃绞痛，肠绞痛，淋巴肿大及全身肿胀。多数情况下疾病是可以痊愈的。
潜伏期通常没有症状，只是有偶尔的免疫力下降，这一症状可以持续数年时间。
10-20%的感染人群处是在慢性疾病期，不同的内部器官，肠道以及神经系统受到影响。
死亡通常由于急性心脏猝死和慢性心脏衰竭。
【检测原理】
定性检测抗恰加斯IgG（克氏锥虫）抗体的此试剂盒采用ELISA的原理。包被板的微孔中包被了克氏锥虫抗原，这些抗原可以结合样品中相应的抗体。洗板除去未结合的样品，再加入辣根过氧酶标记的蛋白A酶联物。加TMB后会出现蓝色反应产物，形成了可见的免疫复合物。反应液的颜色强度与样品中克氏锥虫特异性抗体的浓度成正比。之后加入硫酸终止酶反应，反应液变成黄色。450nm处读取OD值。
【试剂盒组成成分】
- 包被孔：
- 样品稀释液：
- 终止液：
- 洗涤液：
- 克氏锥虫蛋白A酶联物：
- 底物液：
- 阳性质控：
- 临界质控：
- 阴性质控：
【样品要求】
实验中将用到血清或血浆（柠檬酸），如果样品在采集后5天内检测，可将样品储存于2-8℃的环境下，如果要储存更长时间的话，则样品必须储存于-20到-70℃。如果样品冻存了，则使用前必须将样品先融解，避免反复冻融。
样品稀释：
实验开始前，将所有的样品用样品稀释液按1：100的比例稀释。将10ul样品和1ml IgG样品稀释液加入相应的试管中，旋涡混匀。阳性质控和阴性质控都是即用型型的，不必稀释。
【检测方法】
实验开始之前仔细阅读操作步骤，严格遵守操作步骤才可以获得可靠的实验结果。如果这实验是在ELISA自动系统上进行，为了避免洗板的影响，建议在洗板步骤时，洗板3次改成洗板5次，洗涤液从300µl增加到350µl。实验开始之前，应当在试剂盒提供的结果单上标记好所有的样品和质控品，取适当数量的板条置于板架上。
请至少做以下几个孔：
1孔（例A1） 做空白孔
1孔（例B1） 做阴性质控
2孔（例C1+D1）做临界质控
1孔（例E1） 做阳性质控
如果有必要的话，我们建议您质控和病人样品做双份检测。照说明书给出的实验步骤进行操作，并避免不同步骤之间的时间隔无明显差别。加质控品和样品时都应当用新的取样吸头。把恒温箱调至37±1℃
1）将质控品和稀释好的样品分别100µl加入到相应的微孔中，留下A1做空白孔。
2）盖板。
3）37±1℃下温育1h±5min。
4）温育后，移去粘性金属板，弃取孔内反应液，用300µl洗涤液洗板3次。避免反应孔中的液体溅出。每次洗板间的浸润时间都应大于5秒。最后在吸水纸上拍干。
注意：洗板步骤很重要，洗板不充分将可能导致结果不精确或错误的OD值。
5）除空白孔外，在每一微孔中都加入100µl克氏锥虫蛋白A酶标物。
6）室温下温育30min，避免太阳直射。
7）重复步骤4。
8）在每一微孔中加入100µl TMB底物液。
9）室温下避光温育15min。
10）按加TMB底物液的顺序和速度在每一微孔中加入100µl终止液。
温育之后，包被板内试剂的颜色由蓝色变为黄色。
注意：高阳性的病人样品会引起染色剂沉淀。这些沉淀物会影响OD值的读取。例如：我们建议按1：1的比例用生理盐水预先稀释样品。然后按1：100的比例用稀释液稀释样品，并将结果乘以2。
11）加终止液后30min之内在450/620nm处读取OD值。
【结果计算】
实验有效标准
为了使每次检验都是有效的，必须满足以下标准：
空白对照孔A1： OD值应小于0.100 阴性质控B1：OD值应小于0.200
临界质控C1和D1：OD值应当在0.250和0.900之间 阳性对照E1：OD值应当等于或高于临界值。
结果计算
临界值是临界质控的平均OD值，例如：临界质控OD值0.49+临界质控OD值0.47=0.96/2=0.48
临界值=0.48
结果说明
如果样品的OD值比临界质控的OD高10%以上，则此样品为阳性。
如果样品的OD值位于110%的临界质控OD和90%临界质控OD之间时，则样品为可疑样品。建议2-4周后，采集新的样品并重新检测，如果样品的结果仍位于灰区内，则认为此样品为阴性。
如果样品的OD值临界质控的OD低10%以上，则此样品为阴性。
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文献和实验时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位：酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下，在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育，酶促反应开始进行，经过一定时间后，用终止液终止反应，通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量，除以时间即可
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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