乙脑-IgG ELISA检测试剂盒

乙脑-IgG ELISA检测试剂盒

美国InBios原装进口 ELISA检测试剂盒

货号	产品名称	规格	方法	备注
JEGS-1	乙脑-IgG	96T	ELISA	美国InBios 原装进口

【产品名称】
通用名称：乙脑病毒IgG检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：JE Detect™ IgG ELISA

【产品规格】96T

【预期用途】
试剂盒可用于人血清中抗重组抗原（来源于JEV）的IgG抗体的检测。此试剂盒并不用于血液或血液成分的筛查，且该试剂盒尚未针对疫苗诱导的血清转化研究进行优化，仅供专业人士和体外检测使用。

【前言简介】
感染日本脑炎病毒会引起包括脑炎等一系列症状。本试剂盒使用了一种称为JERA的重组抗原，它可以作为日本脑炎病毒感染的血清学敏感标记物。JERA蛋白是由日本脑炎病毒抗原的不同部分的肽链构成的重组抗原。

【检测原理】
本试剂盒由一种酶促扩增的“两步”夹心式免疫测定法组成。在测试中，JE阴性质控，阳性质控和使用样本稀释液稀释的未知样本首先加入到包被有单克隆抗体的微孔板上进行孵育。洗涤后加入酶联物进行第二次孵育。洗涤后加入底物液，加入终止液终止反应。测量450nm处的吸光度，在一定的阈值以上，JERA和对照孔的吸光度的比值准确地决定了是否存在JEV抗体。

【试剂盒组成成分】

1. 微孔板：          
2. 样本稀释缓冲液： 
3. 阴性质控：      
4. 阳性质控：    
5. 酶联物：       
6. 洗涤缓冲液：    
7. EnWash：        
8. 底物液：        
9. 终止液：      

试验所需材料（未提供）

1. 酶标仪
2. 生物或高级水
3. 真空泵
4. 洗板机
5. 37℃培养箱
6. 1-10μL单通道移液器，50-200μL单通道和多通道移液器
7. 聚丙烯试管
8. 封口膜或小的封板纸
9. 计时器
10. 涡旋混合器

【试剂制备】
1x洗涤缓冲液：
使用前用生物或高级水稀释，例如，120mL洗涤缓冲液（10x）+1080mL生物或高级水，混合均匀
稀释后的洗涤缓冲液在室温下可储存6个月

【样本收集和制备】

1. 本检测必须使用人血清样本进行，全血或血浆样本不能直接检测（注意：脑脊液（CSF）可用于检测，但是本试剂盒尚未使用CSF进行测试或优化，在使用试剂盒之前，必须优化CSF系统）
2. 尽快从红细胞凝块中分离血清，避免溶血
3. 样本收集后应尽快进行检测，不要将样本置于室温过长时间
4. 应通过静脉穿刺收集血清，样本在2-8℃下可储存7天，若要储存更长时间，应在-20℃或更低温度下储存，避免反复冻融
5. 冷冻样本应室温解冻并在使用前轻轻混合均匀，每次使用前都快速颠倒混匀
6. 如果观察到任何生长的迹象，则不要使用血清

【检测步骤】
微孔板A-D行预包被了JERA，E-H行预包被了NCA

1. 确定所需微孔板数量并做好标记（JERA和NCA部分质控品都应做双孔，样本可做单孔或双孔）
2. 用样本稀释缓冲液1:300稀释血清样本和质控品（至少使用3µL进行稀释，例如，3µL血清+897µL样本稀释缓冲液）
3. 将50µL稀释后的质控品和样本加入相应的孔中
4. 封板，在37℃培养箱中孵育1小时
5. 在洗板机上每孔每次用300µL洗涤缓冲液洗涤6次
6. 将50µL酶联物加入每个孔中
7. 封板，在37℃培养箱中孵育1小时
8. 重复洗涤步骤
9. 将150µL EnWash加入所有孔中
10. 封板，在室温下孵育5分钟
11. 重复洗涤步骤
12. 将75µL底物液加入所有孔中
13. 在室温下黑暗中孵育10分钟（不封板）
14. 将50µL终止液加入所有孔中，在室温下孵育1分钟（不封板）
15. 测量450nm处吸光度（请确保酶标仪不会减去或规范化任何空白值或孔）

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