森林脑炎ELISA检测试剂盒-德国IBL

森林脑炎ELISA检测试剂盒-德国IBL

货号	RE57411
规格	96T
方法	ELISA
温育时间	2 x 1h/1 x 30min
样本和体积	10 µL血清、血浆或者50µLCSF
底物液	TMB
认证	CE认证

【预期用途】

森林脑炎ELISA检测试剂盒-德国IBL可用于人血清或血浆（柠檬酸盐/肝素）中森林脑炎IgM抗体的体外定量检测。

【检测原理】

针对TBE病毒的IgM类抗体的定性免疫酶学测定基于ELISA（酶联免疫吸附测定）技术。

微量滴定板预先包被有TBE病毒抗原以结合样品中的相应抗体。 洗涤孔以除去所有未结合的样品物质后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人IgM缀合物。 该结合物结合捕获的TBE病毒特异性抗体。。通过第二次洗涤，未结合的酶联物被洗去， 通过加入产生蓝色反应产物的底物显色。该产品的显色强度与样品中TBE病毒特异性IgM抗体的量成正比。 加入终止液停止反应后， 这将产生黄色终点颜色。 使用ELISA微孔板读数器读取450nm处的吸光度。 

【检测方法】

测试前准备

在使用森林脑炎ELISA检测试剂盒-德国IBL进行测定之前，请仔细阅读测试方案。 结果可靠性取决于是否严格遵守所述的测试协议。 以下测试程序仅对手动程序进行了验证。 如果在ELISA自动系统上进行测试，我们建议将洗涤步骤从3次升到5次，洗涤液体积从300μl增加到350μl，以避免洗涤步骤影响结果。 在开始测定之前，应在试剂盒中提供的结果表中仔细确定所有标本和对照的分布和排版。 选择所需数量的微量滴定条或孔，并将其插入支架。

按照给定的顺序执行所有测定步骤，并且在步骤之间没有任何明显的延迟。应使用干净的一次性吸头来分配每个质控和样品。将培养箱调整至37°C±1°C。

1.将100μl质控品和稀释样品加入到各孔中。保留A1为基底空白。

2.使用试剂盒中提供的盖板膜盖板。

3.在37±1℃下孵育1小时±5分钟。

4.孵育完成后，移去铝箔盖板膜，弃去孔中的内容物，用300μl洗涤液洗涤各孔三次。避免溶液溢出反应孔。每个洗涤周期之间的浸泡时间应为> 5秒。最后，在下一步之前，在吸水纸上拍干板孔中液体。

注意：洗涤至关重要！洗涤不足导致精度差和吸光度值错误升高。

5.将100μl酶结合物加入到除空白孔（例如A1）外的所有孔中。盖板。

6.室温（20〜25℃）孵育30分钟。避免暴露在阳光下。

7.重复步骤4。

8.每孔加入100μl底物溶液。

9.在黑暗中室温（20〜25℃）孵育15分钟。由于酶反应，颜色变蓝。

10.以与底物溶液相同的顺序和相同的速率将100μl终止液加入到所有孔中。

孵育过程中溶液有蓝色变黄。

11.在加入终止液后30分钟内测量样品在450 / 620nm处的吸光度。

测定

使用A1孔中的底物空白将ELISA读数器调零。

如果由于技术原因，使用A1孔中的底物不能将ELISA读数器调整为零，则从测量的所有其他吸光度值中减去孔A1的吸光度值，以获得可靠的结果！

测量所有孔在450 nm处的吸光度，并记录每个对照和患者样品在分布和排版中的吸光度值。

推荐使用620 nm作为参考波长的双波长读数。适用时计算所有复孔的平均吸光度值。