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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
高 pH 缓冲液套装30 次直销
- 库存:
32
- 供应商:
上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
高 pH 缓冲液套装30 次直销详细介绍:
高 pH 缓冲液套装30 次直销技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
高 pH 缓冲液套装30 次直销操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
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pHT304(60908-4160) 终点显色法内毒素定量试剂盒
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小鼠抗Trx标签蛋白单抗(100) 荧光胺酸占替诺 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100356-201002 规格: 20mg/支
盐酸帕罗西汀 进口/国产 英文名称 HPLC法含量测定 含量: 100357-200301 规格: 20mg/支
卡巴胆碱 进口/国产 英文名称 UV法含量测定 含量: 100361-200301 规格: 20mg/支
西洛他唑 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100363-200301 规格: 20mg/支
氯唑沙宗 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100364-200301 规格: 20mg/支
茴拉西坦 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100365-200401 规格: 20mg/支
卡洛磺钠 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100366-200702 规格: 20mg/支
奥美拉唑 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100367-201003 规格: 20mg/支
维生素B2 进口/国产 英文名称 HPLC法含量测定 含量: 100369-200502 规格: 20mg/支
泛酸钙 进口/国产 英文名称 HPLC法含量测定 含量: 100370-200301 规格: 20mg/支
乌苯美司 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100371-200802 规格: 20mg/支
阿苯达唑 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100373-200502 规格: 20mg/支
苯磺酸氨氯地平 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100374-200903 规格: 20mg/支
盐酸特拉唑嗪 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100375-200502 规格: 20mg/支
氯化钠 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100376-201001 规格: 20mg/支
氨力农 进口/国产 英文名称 UV法含量测定 含量: 100379-200501 规格: 20mg/支
更昔洛韦 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100380-200301 规格: 20mg/支
肾上腺色腙 进口/国产 英文名称 检查用 含量: 100381-200301 规格: 20mg/支
紫杉醇 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100382-200301 规格: 20mg/支
大蒜素 进口/国产 英文名称 含量测定 含量: 100384-200501 规格: 20mg/支
豆腐果苷 进口/国产 英文名称 HPLC法含量测定 含量: 100385-200401 规格: 20mg/支
高 pH 缓冲液套装30 次直销公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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文献和实验在碱性条件易降解,所以底物尽量要现用现配。 分析不同 pH 环境对 RPT 活性的影响,如图 2b 所示,rPT 在 pH 3.0 NaAc-HAc 缓冲液里最为稳定。随着 pH 的升高,RPT 酶活的损失程度也随之提高。在测定 rPT 最适 pH 值时发现,pH≤5 底物条件下,RPT 蛋白几乎无活性,如图 2a 所示。在 pH≤5 的缓冲液中,2 小时后依然保持较高的活性。说明在 pH≤5,RPT 稳定,自降解的速率大大降低,酶分子处于相对稳定的状态。此时把酶液转入到 pH 7.6 的测活
20°C下配制的缓冲液,在较高或较低的温度下PH值会改变吗?
对于普通使用的缓冲液,PH值随温度变化而变化。 下表列出温度改变10℃时,PH值的变化情况: 例如 20℃下配制PH7.4 Tris缓冲液,40℃时PH值为 7.4-(2x0.310)=6.78 缓冲系统 pKa/20℃ [ Delta]pKa/10℃ Mes 6.15 -0.110 Ada 6.60 -0.110 Pipes 6.80 -0.085 Aces 6.90 -0.200 Bes 7.15 -0.160 Mops 7.20 -0.013 Tes
基础科研离不开免疫组化(IHC)的实验方法,因为要实现组织中蛋白的可视化定位和定量,并有助于发表高影响因子的文章。临床病理学离不开免疫组化技术,因为它能用于定义正常细胞和疾病过程,并有助于发现疾病治疗的潜在方法。无论您是 IHC 实验的新手还是久经战场在病理科奋战的老将,一定对下面的免疫组化五步非常了解甚至游刃有余了,但是想要获得高质量 IHC 图像,不免有点「道理都是懂的,就是做不到」的捉急。为什么获得高质量的 IHC 图像不是件容易的事呢?因为有太多的要点值得注意。01 样本处理02 抗原
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