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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次说明书
- 库存:
36
- 供应商:
上海一研
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次说明书实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次说明书实验步骤:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次说明书特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次说明书客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
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高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
氟他胺标准品 英文名称 Flutamide 规格: 200mg CAS: 13311-84-7 进口、国产
邻-氟他胺标准品 英文名称 o-Flutamide 规格: 50mg CAS: 进口、国产
氟替卡松丙酸酯标准品 英文名称 Fluticasone Propionate 规格: 100mg CAS: 80474-14-2 进口、国产
氟替卡松丙酸酯分离度用混合物标准品 英文名称 规格: 25mg CAS: 进口、国产
氟替卡松丙酸酯系统适用性用混合物标准品 英文名称 规格: 25mg CAS: 进口、国产
马来酸氟伏沙明标准品 英文名称 Fluvoxamine Maleate 规格: 200mg CAS: 61718-82-9 进口、国产
氟替卡松丙酸酯鼻喷剂分离度用混合物标准品 英文名称 规格: 25mg CAS: NA 进口、国产
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人胃肠道间质瘤细胞 英文名称: GIST
大鼠肝细胞 英文名称: CBRH-7919
细菌总数显色培养基/Total Genes Chromogenic Medium 检测细菌总数,培养24小时,细菌显红色 250毫升 国产/进口
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布氏琼脂/Brucella Agar 弯杆菌的抗生素敏感性试验和纯化培养 250克 国产/进口
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小鼠胰岛细胞完全培养基 100mL
志贺氏菌增菌肉汤配套试剂 规格: 10支 用途: 每支添加于225mL的志贺氏菌增菌肉汤(023141)中。
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次说明书碱性蛋白胨水 规格: 250g 用途: 用于嗜碱性细菌特别是弧菌的选择性增菌培养。(SN/T1022-2010)
Tolloid样蛋白1(TLL1)重组蛋白 英文名称: Recombinant Tolloid Like Protein 1 (TLL1)
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文献和实验最容易出错) (5)冰浴中,恒压60V转膜约1h。 (6)转膜后,用紫外交联仪固定RNA。 (7)42℃干燥15min。 4、杂交 (1)将膜放入50ml杂交管(也可使用普通50ml离心管,最好是螺纹旋转口的,不容易漏)中,用水侵润膜(注意将转有RNA的一面朝内,避免产生气泡)。 (2)加入4ml 预热(42℃提前预热)的杂交缓冲液(沿管壁缓慢加入,不要碰到膜),42℃旋转振荡30min。 (3)倒掉溶液,重新加入4ml 预热的杂交缓冲液,同时加入10μl miRNA探针(生物
miRNA Isolation Kit。有了这个试剂盒,可通过总RNA提取 或小RNA /miRNA富集的步骤分离miRNA。 Peng Jin(埃默里大学) 我们一般采用TRIzol从细胞中分离RNA。对于从组织或细胞中回收小RNA,TRIzol非常有效。 Winston Kuo(哈佛大学) 总的来说,我们实验室采用几种方法,这取决于图谱 分析所使用的方法。TRIzol和Ambion的mirVana miRNA分离试剂盒都很有效。其他方法也很管用
miRcute miRNA 提取分离试剂盒(DP501)操作指南——动物组织 miRNA 的提取
以下操作按照天根产品 DP501 miRcute miRNA 提取分离试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 动物组织样本2. 研磨器或液氮,研钵3. 无水乙醇,氯仿4. 移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml); 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)5. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液RD、漂洗液RW中
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