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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L说明书
- 库存:
49
- 供应商:
上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L说明书详细介绍:
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
GAPDH小鼠单抗(30 μL) Ruminococcus albus medium
pUXV7 pDD
Succinate Buffer(琥珀酸缓冲液),0.2M,pH5.0 小鼠瘦素(LEP)ELISA Kit
人胆囊收素/胆囊素八肽(CCK-8)ELISA Kit 克必隆G载体
Thermococcus celer medium pRS420
pFredB CAPSO Buffer,0.2M,pH8.5
鱼骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA Kit 大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA Kit
种及感受态细胞 Pfennig's medium i (modified 1988, for purple sulfur bacteria)
pSM23 pCYM3-11(pCYM311)
HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.5 豚鼠生长激素(GH)ELISA Kit
鸡白痢抗体检测(PD)ELISA Kit 硅胶膜DNA离心吸附柱(大提)
Spirochaeta isovalerica medium pPCR-Script Amp(pPCRScriptAmp)
pEF1α-IRES-ZsGreen1(pEF1αIRESZsGreen1) Lieb结晶紫溶液(Crystal Violet, Lieb's Solution)
小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA Kit 大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA Kit四氯杀螨砜标准品CAS号:116-29-0250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
噻菌灵标准品CAS号:148-79-8250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
噻虫啉标准品CAS号:111988-49-9100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
快胜标准品CAS号:153719-23-4100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
甲砜霉素标准品CAS号:15318-45-3100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
噻草啶标准品CAS号:117718-60-2100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
赛苯隆标准品CAS号:51707-55-2250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
甲基噻吩磺隆标准品CAS号:79277-27-3100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
禾草丹标准品CAS号:28249-77-6250mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
甲基乙拌磷标准品CAS号:640-15-3100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L说明书硫粘菌素标准品CAS号:55297-96-6100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
替米考星标准品CAS号:108050-54-0100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
硫普罗宁标准品CAS号:100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
托芬那酸标准品CAS号:13710-19-5100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
甲苯三嗪酮标准品CAS号:69004-03-1100mg 进口/国产 英文名称 含量: 规格: 20mg/支
柱式探针纯化试剂盒 Hyphomicrobium methylovorum medium
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L说明书公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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文献和实验注意事项 1.认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分,常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根据实验需要决定。2.配制是要保证充分溶解,NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。3.配制所用的水应是三蒸水,离子浓度很低。4.所用器皿应严格消毒。5.配制好的培养基应马上过滤,无菌保存于4度。6.液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基,它是一种灭菌后保证无菌的溶液,必要时可制成无内毒素
的 SDS-PAGE 的相关知识。(PS:附带一张简单明了的 DNA 印迹、RNA 印迹及蛋白质印迹流程图~~)一、配胶、制胶首先 SDS(十二烷基硫酸钠,一种阴离子洗涤剂)能使蛋白变性,并使所有蛋白质颗粒表面覆盖一层 SDS→使蛋白均匀地带上负电荷→从而使质量相似但形状或电荷不同的蛋白在电泳液中能以相似的速度进行迁移→→因此 SDS 被加到凝胶溶液、蛋白样品和电泳液中,以确保蛋白在整个过程都展开并保持负电荷。其实所谓的凝胶,其本质是聚丙烯酰胺。过程中,多格聚丙烯酰胺分子相互交联,最后形成一个蛋白
一、材料与仪器30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,PH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,PH6.8;电泳缓冲液,PH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板,电泳电源架,电泳槽,电泳仪等;蛋白Mark。二、方法与步骤1) 分离胶和浓缩胶配制按下表比例分别配制分离胶和浓缩胶:2)凝胶板的准备a) 洗板:将洗洁精用温水稀释后,用它浸透海绵擦洗二块玻璃板,然后用自来水洗净,再用酒精将板擦干。b)配板
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